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拟南芥类受体蛋白激酶GHR1的结构研究及腾冲嗜热厌氧菌中ECF转运蛋白的ATPase亚基的结构分析

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-9页
缩略语表第9-10页
第一部分 拟南芥类受体蛋白激酶GHR1的结构研究第10-67页
 第一章 引言第10-33页
   ·激酶的结构特征及催化机制第10-16页
     ·激酶的整体结构第10-13页
     ·激酶的激活机制第13-15页
     ·激酶的催化机制第15-16页
   ·蛋白激酶的分类第16-20页
     ·AGC家族蛋白激酶第16-17页
     ·Ca~(2+)/CaM依赖性蛋白激酶第17-18页
     ·CMGC家族蛋白激酶第18-19页
     ·酪氨酸蛋白激酶第19-20页
     ·其它类蛋白激酶第20页
   ·植物受体蛋白激酶研究进展第20-33页
     ·植物受体蛋白激酶的发现第21-22页
     ·植物受体蛋白激酶的分类第22-27页
     ·植物受体蛋白激酶的信号通路第27-30页
     ·植物受体蛋白激酶GHR1参与调空ABA信号通路第30-33页
 第二章 实验材料与实验方法第33-48页
   ·实验材料第33-35页
     ·引物第33页
     ·试剂及工具酶第33-34页
     ·实验仪器第34页
     ·载体及菌株第34页
     ·表达体系第34-35页
   ·实验试剂的配置第35-39页
     ·常用培养基的配置第35-36页
     ·常用缓冲液的配制第36-38页
     ·亲和柱再生方法第38页
     ·BL21(DE3)感受态细胞的制备第38-39页
     ·昆虫细胞的培养第39页
   ·实验方法第39-48页
     ·GHR1-ECD基因的克隆第39-41页
     ·携带GHR1-ECD基因的重组粘粒的获得第41-42页
     ·转染昆虫细胞第42页
     ·扩增杆状病毒第42页
     ·在昆虫细胞中小量测试表达GHR1-ECD第42-43页
     ·GHR1-ECD蛋白的亲和纯化第43页
     ·GHR1-ECD蛋白的大量表达纯化第43-44页
     ·GHR1-ECD蛋白的结晶第44-45页
     ·GHR1-KD的基因克隆第45-46页
     ·GHR1-KD蛋白表达的可溶性测试第46页
     ·GHR1-KD蛋白的大量表达纯化第46-47页
     ·GHR1-KD蛋白晶体数据的收集第47-48页
 第三章 实验结果与分析第48-66页
   ·GHR1-ECD基因的克隆第48页
   ·GHR1-ECD蛋白的真核表达测试第48-49页
   ·GHR1-ECD蛋白的大量表达纯化第49-50页
   ·GHR1-ECD蛋白的结晶第50-52页
   ·GHR1-ECD蛋白晶体衍射能力测试第52页
   ·糖苷酶消化GHR1-ECD蛋白第52-54页
   ·GHR1-KD的基因克隆第54-55页
   ·GHR1-KD蛋白原核表达测试第55页
   ·大量表达纯化GHR1-KD蛋白第55-57页
   ·GHR1-KD蛋白的结晶第57-58页
   ·GHR1-KD蛋白晶体数据收集第58-59页
   ·GHR1-KD蛋白结构分析第59-63页
     ·GHR1-KD的整体结构第59-60页
     ·GHR1-KD与GTP分子的结合第60-62页
     ·GHR1-KD与其它激酶分子的结构比对第62-63页
   ·讨论第63-66页
 第四章 结论与展望第66-67页
   ·结论第66页
   ·展望第66-67页
第二部分 腾冲嗜热厌氧菌中ECF转运蛋白的ATPase亚基的结构分析第67-81页
 第五章 引言第67-71页
   ·ABC转运蛋白的结构特征第67-68页
   ·ABC转运蛋白的工作原理第68-69页
   ·ECF transporters是ABC transporters的一个亚家族第69-71页
 第六章 结果与分析第71-81页
   ·CbiO蛋白的表达与纯化第71-72页
   ·CbiO的结晶与数据收集第72-75页
   ·CbiO的结构分析第75-79页
     ·CbiO的整体结构第75-76页
     ·C端的螺旋结构介导CbiO二聚化第76-78页
     ·CbiO中的Arg82残基的特殊性第78-79页
     ·CbiO结合了一个DDM分子第79页
   ·讨论与展望第79-81页
参考文献第81-89页
致谢第89-90页
作者简介第90页

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