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空肠弯曲菌cdtB和cdtC原核表达及其产物的单克隆抗体制备

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-10页
符号说明第10-12页
综述 细胞致死性肿胀毒素第12-23页
 1 编码和/或产生CDT的细菌种类第12-13页
   ·大肠杆菌第12页
   ·志贺氏菌第12-13页
   ·空肠弯曲杆菌第13页
   ·其他细菌第13页
 2 CDT的遗传学第13-14页
 3 CDT结构第14页
 4 CDT各组成部分的功能第14-16页
   ·CdtB的功能第14-15页
   ·CdtA/CdtC的功能第15-16页
 5 CDT的作用机制第16-17页
 6 CDT影响的细胞类型第17页
 7 CDT作为一个可能的致病因素第17-18页
 8 展望第18页
 参考文献第18-23页
第一章 空肠弯曲菌细胞致死性肿胀毒素cdtB、cdtC的原核表达第23-34页
 1 材料与方法第23-26页
   ·材料第23-24页
   ·方法第24-26页
 2 结果第26-31页
   ·cdtB和cdtC基因扩增第26-27页
   ·PCR产物与克隆载体的连接第27页
   ·重组原核表达质粒pET-cdtB、pGEX-6p-1-cdtB、pET-cdtC、pGEX-6p-1-cdtC的构建与鉴定第27-28页
   ·cdtB,cdtC基因在重组菌中的表达第28-31页
 3 讨论第31-32页
 参考文献第32-34页
第二章 基于CdtB蛋白检测空肠弯曲菌抗体的间接ELISA方法建立及初步应用第34-47页
 1 材料与方法第34-36页
   ·材料第34页
   ·方法第34-36页
 2 结果第36-45页
   ·CdtB蛋白的同源性分析第36-37页
   ·阳性血清的制备第37页
   ·蛋白包被浓度、血清稀释度的确定第37-38页
   ·封闭液的选择第38-39页
   ·封闭时间的确定第39-40页
   ·血清稀释液的选择第40页
   ·血清作用时间的确定第40-41页
   ·二抗稀释度的确定第41-42页
   ·二抗作用时间的确定第42页
   ·显色时间的确定第42-43页
   ·间接ELISA方法步骤的确定第43页
   ·特异性实验第43-44页
   ·重复性实验第44页
   ·间接ELISA方法的初步应用第44-45页
 3 讨论第45-46页
 参考文献第46-47页
第三章 CdtB和CdtC单克隆抗体的制备和初步应用第47-61页
 1 材料和方法第47-51页
   ·材料第47-48页
   ·方法第48-51页
 2 结果第51-58页
   ·间接ELISA检测方法的建立第51-52页
   ·杂交瘤细胞株的建立第52页
   ·单抗亚类、上清和腹水效价的测定结果第52-53页
   ·单抗Western-blot试验第53-54页
   ·中和抗体的选择第54-55页
   ·基于CaCo-2细胞的黏附和侵袭实验第55-56页
   ·基于HD-11细胞的黏附和侵袭实验第56页
   ·HD-11细胞形态和细胞数目的变化第56-58页
 3 讨论第58-60页
 参考文献第60-61页
攻读硕士学位期间发表论文目录第61-62页
致谢第62-63页

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