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低能N~+注入介导秦艽基因组DNA转化酵母的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
缩写表第10-11页
目录第11-15页
1 绪论第15-28页
   ·药用植物秦艽的概况第15-17页
     ·生物学特征第15-16页
     ·秦艽的主要有效成分第16页
     ·秦艽中萜类化合物的合成途径及其应用研究第16-17页
     ·秦艽的药理学研究第17页
   ·龙胆苦苷的研究概述第17-19页
     ·龙胆苦苷的理化性质第17-18页
     ·龙胆苦苷的药理作用第18页
     ·龙胆苦苷的提取分离与检测第18-19页
     ·龙胆苦苷的生物合成途径第19页
   ·离子束生物工程技术的研究概况第19-22页
     ·低能离子注入技术原理第19-20页
     ·离子注入技术的特点第20页
     ·低能离子注入技术的应用第20-22页
   ·多形汉逊酵母的研究概况第22-23页
     ·多形汉逊酵母的培养特性第22-23页
     ·多形汉逊酵母的应用第23页
   ·谷胱甘肽的研究概况第23-24页
   ·本课题的目的与意义第24页
     ·本课题的目的第24页
     ·本课题的意义第24页
   ·本课题的前期研究进展第24-25页
   ·本课题研究内容第25页
     ·多形汉逊酵母培养条件的研究第25页
     ·N~+注入多形汉逊酵母条件的考察第25页
     ·产龙胆苦苷工程菌的构建第25页
   ·本课题的基本原理及基本路线第25-28页
     ·本课题的基本原理第25-26页
     ·本课题采用的技术路线第26页
     ·本课题研究工作中面临的技术难点和拟采取的解决办法第26-28页
2 多形汉逊酵母 DL-1 培养条件的研究第28-38页
   ·试验材料与仪器第28-29页
     ·实验材料第28页
     ·主要试剂与设备第28-29页
   ·试验方法第29-30页
     ·培养基及培养方法第29-30页
     ·分析方法第30页
   ·研究内容第30-31页
     ·DTNB 法测定 GSH第30-31页
     ·温度对多形汉逊酵母 DL-1 生长的影响第31页
     ·初始 pH 对多形汉逊酵母 DL-1 生长的影响第31页
     ·变温分批发酵生产 GSH第31页
     ·高密度发酵生产 GSH第31页
   ·结果与分析第31-37页
     ·DTNB 法测定 GSH第31-33页
     ·温度对 GSH 产量及菌体生长的影响第33页
     ·初始 pH 对 GSH 产量影响第33-34页
     ·多形汉逊酵母 DL-1 生长曲线的测定第34-35页
     ·变温调控分批发酵生产 GSH第35页
     ·高密度发酵生产 GSH第35-37页
   ·小结第37-38页
3 N~+注入多形汉逊酵母 DL-1 条件的考察第38-46页
   ·试验材料与仪器设备第38-39页
     ·实验材料第38页
     ·主要试剂与仪器设备第38-39页
   ·试验方法第39页
     ·多形汉逊酵母的 N~+注入方法第39页
     ·GSH 高产菌株的选育第39页
   ·研究内容第39-41页
     ·ZnCl2抗性筛选物浓度的确定第39-40页
     ·N~+注入能量及剂量的考察第40页
     ·正突变率的测定第40页
     ·GSH 高产菌株的诱变选育第40-41页
     ·突变菌的遗传稳定性试验第41页
   ·结果与分析第41-44页
     ·抗性筛选物浓度的确定第41页
     ·不同能量与剂量注入后菌株的生长情况第41-43页
     ·氮离子注入多形汉逊酵母 DL-1 的诱变效果第43页
     ·谷胱甘肽高产菌株的筛选第43-44页
     ·突变菌的传代稳定性试验第44页
   ·小结第44-46页
4 产龙胆苦苷酵母工程菌的构建第46-65页
   ·实验材料及仪器设备第46-48页
     ·实验材料第46页
     ·主要试剂与仪器设备第46-48页
   ·试验方法第48-49页
     ·秦艽有效成分的定性检识第48-49页
     ·龙胆苦苷的定性定量分析第49页
     ·秦艽基因组 DNA 的提取第49页
     ·酵母菌转化第49页
     ·产龙胆苦苷工程菌的筛选第49页
   ·研究内容第49-52页
     ·定性检识方法的研究第49-51页
     ·龙胆苦苷定量分析的方法学研究第51页
     ·秦艽基因组 DNA 提取第51页
     ·多形汉逊酵母 DL-1 的注入与转化第51页
     ·酵母菌平板培养与计数第51-52页
     ·产龙胆苦苷工程菌的筛选第52页
   ·结果与分析第52-63页
     ·秦艽有效成分的初步定性检识第52-54页
     ·TLC 法定性检测样品溶液中龙胆苦苷第54-55页
     ·HPLC 法定量分析龙胆苦苷第55-57页
     ·秦艽基因组 DNA 的提取及检测第57-58页
     ·重组酵母菌的平板培养与计数第58页
     ·产龙胆苦苷工程菌筛选第58-61页
     ·高效液相色谱法定量分析酵母工程菌发酵产物第61-62页
     ·重组菌株稳定性试验第62-63页
   ·小结第63-65页
5 结论与展望第65-67页
   ·结论第65页
   ·展望第65-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-75页
攻读学位期间发表的学术论文目录第75-76页

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