| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-19页 |
| ·研究背景 | 第11页 |
| ·抗菌肽的基本特性 | 第11-15页 |
| ·抗菌肽的理化性质 | 第11页 |
| ·抗菌肽的来源 | 第11页 |
| ·抗菌肽的结构（二级结构） | 第11-13页 |
| ·抗菌肽的作用机理 | 第13-14页 |
| ·影响抗菌肽活性的结构因素 | 第14-15页 |
| ·两栖类皮肤分泌物生物活性肽研究进展 | 第15-16页 |
| ·历史和背景 | 第15页 |
| ·两栖动物以及其皮肤分泌物简介 | 第15页 |
| ·研究成果及其进展 | 第15-16页 |
| ·抗菌肽研究和应用的现状 | 第16-18页 |
| ·抗菌肽发展存在问题和展望 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·实验用菌株 | 第19页 |
| ·实验耗材和仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-30页 |
| ·滇南臭蛙皮肤分泌液中抗菌肽的分离纯化 | 第20-22页 |
| ·滇南臭蛙皮肤分泌物的收集 | 第20页 |
| ·抗菌肽的分离纯化 | 第20页 |
| ·抗菌活性检测 | 第20-21页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第21页 |
| ·质谱分析 | 第21-22页 |
| ·滇南臭蛙皮肤 cDNA 文库的构建 | 第22-24页 |
| ·滇南臭蛙 RNA 的提取 | 第22页 |
| ·滇南臭蛙皮肤组织 cDNA 一链的合成 | 第22-23页 |
| ·滇南臭蛙皮肤组织 cDNA 二链的合成 | 第23-24页 |
| ·滇南臭蛙（Odorrana tiannanensis）抗菌肽基因的克隆 | 第24-27页 |
| ·引物的设计 | 第24页 |
| ·PCR 扩增滇南臭蛙（Odorrana tiannanensis）抗菌肽基因 | 第24-25页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第25页 |
| ·目的 DNA 片段与载体的连接 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的转化 | 第26页 |
| ·菌落 PCR 及测序 | 第26-27页 |
| ·多肽的人工合成 | 第27页 |
| ·多肽的生物活性测定 | 第27-30页 |
| ·抗菌肽抑菌活性的检测 | 第27页 |
| ·抗菌肽最小抑菌浓度（MIC）的测定 | 第27-28页 |
| ·溶血活性分析 | 第28页 |
| ·细胞毒性检测 | 第28-29页 |
| ·抗氧化活性检测 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-39页 |
| ·滇南臭蛙皮肤分泌物多肽的分离和纯化 | 第30-31页 |
| ·多肽序列的测定和特征描述 | 第31页 |
| ·滇南臭蛙皮肤组织 RNA 提取以及 CDNA 文库的构建结果 | 第31-32页 |
| ·基因克隆以及成熟肽的特征描述 | 第32-36页 |
| ·所有克隆出的 AMPs 序列 | 第32-33页 |
| ·选择合成的四条抗菌肽序列 | 第33-35页 |
| ·合成抗菌肽的结构比较 | 第35页 |
| ·合成抗菌肽的理化性质 | 第35页 |
| ·合成抗菌肽的螺旋模型（双亲性） | 第35-36页 |
| ·滇南臭蛙抗菌肽的功能分析 | 第36-39页 |
| ·抑菌活性的检测结果 | 第36-37页 |
| ·溶血活性检测 | 第37页 |
| ·细胞毒素检测 | 第37页 |
| ·抗氧化活性检测 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第51页 |
