| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 目录 | 第13-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-41页 |
| ·启动子的类型 | 第17-19页 |
| ·组成型启动子 | 第17-18页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第18页 |
| ·诱导型启动子 | 第18-19页 |
| ·启动子克隆及研究方法 | 第19-22页 |
| ·启动子克隆方法 | 第19-20页 |
| ·基因组文库筛选法 | 第19页 |
| ·启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第19-20页 |
| ·利用PCR技术克隆启动子 | 第20页 |
| ·启动子研究方法 | 第20-22页 |
| ·生物信息学分析其功能基序 | 第20页 |
| ·实验分析方法 | 第20-21页 |
| ·常用报告基因 | 第21-22页 |
| ·双生病毒研究现状 | 第22-33页 |
| ·病毒的基因组结构及功能 | 第22-27页 |
| ·Mastrevirus病毒 | 第22-23页 |
| ·Curtovirus病毒 | 第23页 |
| ·Topocuvirus病毒 | 第23-24页 |
| ·Begomovirus病毒 | 第24-26页 |
| ·其他属病毒 | 第26-27页 |
| ·双生病毒致病相关因子 | 第27-33页 |
| ·C2 | 第27-29页 |
| ·C4 | 第29-30页 |
| ·BC1 | 第30-31页 |
| ·BV1 | 第31-32页 |
| ·βC1 | 第32-33页 |
| ·双生病毒启动子研究现状 | 第33-36页 |
| ·Mastrevirus病毒启动子 | 第33页 |
| ·Curtovirus病毒启动子 | 第33-34页 |
| ·Begomovirus病毒启动子 | 第34-36页 |
| ·启动子的鉴定 | 第34-35页 |
| ·启动子的调控 | 第35-36页 |
| ·Nanovirus病毒启动子 | 第36-38页 |
| ·双生病毒启动子的功能研究 | 第38-39页 |
| ·立题依据 | 第39-41页 |
| 2 赛葵黄脉病毒βC1启动子调控元件的分析 | 第41-59页 |
| ·材料与方法 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·载体构建 | 第42-46页 |
| ·启动子表达载体构建 | 第42-45页 |
| ·缺失5UTR Py-rich stretch的MYVB突变体侵染性克隆的构建 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的植物接种 | 第46-47页 |
| ·GUS荧光活性分析 | 第47-48页 |
| ·荧光光度测定 | 第47页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第47-48页 |
| ·GFP活性分析 | 第48页 |
| ·数据分析 | 第48页 |
| ·病毒DNA的提取及Southern blot检测 | 第48-49页 |
| ·叶盘复制试验 | 第49页 |
| ·序列分析 | 第49页 |
| ·结果及分析 | 第49-56页 |
| ·启动子表达载体构建及序列分析 | 第49-51页 |
| ·利用瞬时表达方法分析启动子表达载体活性 | 第51-53页 |
| ·5UTR Py-rich stretch元件对βC1启动子活性和MYVB复制效率的调控作用 | 第53-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 3 中国番茄黄曲叶病毒伴随betasatellite启动子的鉴定及症状决定因子分析 | 第59-93页 |
| ·材料与方法 | 第60-69页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·载体构建 | 第60-67页 |
| ·TYLCCNB-Y25启动子表达载体的构建 | 第60-62页 |
| ·TYLCCNB-Y10及TYLCCNB-Y25嵌合体卫星的构建 | 第62-66页 |
| ·TYLCCNB-Y10及TYLCCNB-Y25嵌合体卫星侵染性克隆的构建 | 第66页 |
| ·TYLCCNB-Y25 βC1转基因表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·烟草的转化 | 第67-68页 |
| ·GUS荧光活性分析和组织化学染色 | 第68-69页 |
| ·农杆菌介导的植物接种 | 第69页 |
| ·病毒DNA的Southern blot检测 | 第69页 |
| ·转基因植株的Northern blot检测 | 第69页 |
| ·结果与分析 | 第69-88页 |
| ·TYLCCNB-Y25启动子分析 | 第69-75页 |
| ·启动子瞬时表达活性 | 第69-72页 |
| ·转基因烟草中GUS活性分析 | 第72-75页 |
| ·与TYLCCNV伴随卫星分子症状决定因子的定位 | 第75-88页 |
| ·野生型卫星TYLCCNB-Y10和TYLCCNB-Y25诱导症状表型分析 | 第75-78页 |
| ·嵌合体卫星诱导症状分析 | 第78-82页 |
| ·表达TYLCCNB-Y25 βC1转基因植株的症状 | 第82-84页 |
| ·症状较小决定因子定位 | 第84-88页 |
| ·讨论 | 第88-93页 |
| ·启动子分析 | 第88-90页 |
| ·症状决定因子的定位 | 第90-93页 |
| 4 烟草曲茎病毒伴随alphasatellite启动子的鉴定和分析 | 第93-105页 |
| ·材料与方法 | 第93-96页 |
| ·病毒材料 | 第93页 |
| ·载体构建 | 第93-95页 |
| ·瞬时表达 | 第95页 |
| ·GUS及GFP荧光活性分析 | 第95-96页 |
| ·烟草转化 | 第96页 |
| ·GUS活性的组织化学染色 | 第96页 |
| ·Real time PCR检测GUS基因的表达量 | 第96页 |
| ·结果与分析 | 第96-103页 |
| ·TbCSA Rep全长启动子的序列分析 | 第96-97页 |
| ·瞬时表达中Rep启动子的GUS活性 | 第97-100页 |
| ·TbCSA Rep基因表达调控分析 | 第100-103页 |
| ·讨论 | 第103-105页 |
| 附 侵染夜香牛的双生病毒分子鉴定 | 第105-114页 |
| 1 材料和方法 | 第105-108页 |
| ·病毒分离物 | 第105页 |
| ·克隆方法 | 第105-106页 |
| ·病毒基因组序列分析 | 第106-108页 |
| 2 结果与分析 | 第108-113页 |
| ·病毒DNA结构 | 第108-110页 |
| ·病毒伴随卫星分子的结构特征 | 第110-113页 |
| 3 讨论 | 第113-114页 |
| 全文小结 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-132页 |
| 附录A 本论文所用病毒缩写及中英文对照 | 第132-134页 |
| 附录B 常用培养基及缓冲液配方 | 第134-138页 |
| 作者攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第138页 |
