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麦族抗条锈病基因WKS的克隆、遗传转化及其应用

缩略词第1-11页
中文摘要第11-13页
Abstract第13-15页
1 引言第15-46页
   ·我国小麦条锈病的研究进展第15-28页
     ·我国小麦条锈病的区域划分及流行特点第15-18页
       ·我国小麦条锈病流行区域的划分第15-16页
       ·中国小麦条锈病流行特点第16-18页
         ·条锈病菌的越夏第16-18页
         ·小麦条锈病在流行及传播第18页
     ·小麦条锈病生理小种及其进化第18-23页
       ·中国小麦条锈菌生理小种及其命名第18-19页
       ·我国不同时期主要生理小种及其动态变化第19-20页
       ·中国小麦条锈病菌生理小种的演变规律第20-23页
         ·中国小麦条锈病菌小种与小麦品种的协同进化第20-22页
         ·新小种的发生、传播扩展规律第22页
         ·生理小种分布的区域性与小麦品种布局第22-23页
     ·小麦条锈病的防治第23-27页
       ·条锈病小种监控第23页
       ·化学防治及农艺防治措施第23页
       ·小麦抗条锈病育种第23-27页
         ·小麦条锈病抗性的鉴定第23-25页
         ·小麦条锈病抗性的分类第25-26页
         ·中国小麦条锈病抗性的遗传基础第26-27页
     ·问题与展望第27-28页
   ·植物抗病基因的分类及进化第28-35页
     ·植物抗病基因的分类第28-30页
     ·植物抗病基因产物的结构及功能第30-31页
       ·NBS的结构和功能第30-31页
       ·LRR的结构和功能第31页
     ·植物抗病基因的作用机理第31-33页
       ·基因对基因假说第31-32页
       ·激发子/受体模型假说第32页
       ·防卫假说第32-33页
     ·植物抗病基因的进化第33-35页
       ·基因复制第33页
       ·重复序列交换第33-34页
       ·异位重组第34页
       ·类转座元介导的进化第34-35页
   ·植物抗病基因工程的研究进展第35-42页
     ·植物抗病基因工程的原理第35页
     ·植物抗病基因及相关基因的分离与克隆第35-40页
       ·功能克隆第35-36页
       ·图位克隆第36-37页
       ·转座子标签法第37页
       ·抑制性差减杂交法第37-38页
       ·同源克隆第38页
       ·基因芯片技术第38-39页
       ·电子克隆第39-40页
     ·植物抗病基因工程目的基因的分类第40-41页
       ·植物抗病基因第40页
       ·病原体无毒基因第40-41页
       ·植物防卫反应基因第41页
       ·降解或抑制病原物致病因子的基因第41页
     ·植物抗病基因的转化方法第41-42页
       ·农杆菌介导法第41-42页
       ·基因枪法第42页
       ·其他转化方法第42页
   ·作物分子辅助育种的研究进展第42-46页
     ·分子辅助育种的产生及研究内容第42-43页
     ·分子标记的类型第43-44页
       ·第一代分子标记第43页
       ·第二代分子标记第43页
       ·第三代分子标记第43-44页
     ·分子标记辅助选择在育种中的应用第44页
     ·分子标记辅助选择在应用中的问题与前景第44-46页
       ·种质资源的匮乏第44-45页
       ·多基因、多亲本及复杂性状的辅助选择第45-46页
2 材料与方法第46-58页
   ·实验材料第46页
   ·实验方法第46-58页
     ·材料种植第46-47页
     ·DNA提取步骤及试剂配制第47-48页
       ·DNA提取步骤第47页
       ·DNA提取试剂的配制第47-48页
     ·RNA提取步骤及试剂配制第48页
       ·RNA提取的步骤第48页
       ·RNA提取试剂的配制第48页
     ·cDNA合成第48-49页
     ·同源克隆及表达载体构建第49-50页
     ·基因枪介导的遗传转化第50-52页
       ·外植体愈伤的准备第50页
       ·共转化表达载体的制备第50页
       ·金粉与转化载体的处理第50页
       ·基因枪轰击的步骤第50-51页
       ·恢复培养、分化培养及移苗第51页
       ·转基因苗Basta抗性检验第51页
       ·Bar基因和TeWKS1基因PCR检测及表达分析第51页
       ·基因枪转化的培养基及试剂配制第51-52页
     ·CEL1酶的提取及准备工作第52-54页
       ·CEL1酶的提取第52-53页
       ·材料及试剂配制第53-54页
     ·PCR反应及电泳第54-58页
       ·引物设计及反应条件第54-57页
       ·CEL1酶切体系及反应条件第57页
       ·琼脂糖凝胶电泳方法及试剂配制第57页
       ·聚丙烯酰胺凝胶(3%)电泳方法第57-58页
     ·抗条锈病基因的分子聚合育种及抗病鉴定第58页
       ·抗条锈病基因的分子聚合育种第58页
       ·接种及抗病表型鉴定第58页
3 结果与分析第58-79页
   ·麦族种质中WKS基因检测第58-62页
     ·WKS基因在麦族种质中的分布第58-59页
     ·LINE转座子元件在麦族WKS基因中分布第59-62页
   ·野生二粒Yr36基因的等位变异分析第62-63页
   ·WKS基因的同源克隆第63-64页
   ·长穗偃麦草WKS基因-TeWKS1的遗传转化及表达分析第64-67页
     ·转基因苗T_0代Bar基因及TeWKS1基因的检测第64-65页
     ·转基因T_1代Bar基因及TeWKS1基因的检测第65-67页
   ·小麦条锈病抗性基因Yr10、Yr18和Yr36的分子聚合育种第67-79页
     ·Yr10、Yr18、Yr36在中国小麦品种中的分布第67-69页
       ·Yr10在中国小麦品种中的分布第68-69页
       ·Yr18在中国小麦品种中的分布第69页
     ·受体亲本的抗病检测第69页
     ·BC_1F_1的分子标记标记辅助选择第69-79页
4 讨论第79-81页
   ·基于Yr36基因功能分子标记的种质筛选和等位性变异分析第79页
   ·长穗偃麦草TeWKSt的遗传转化第79-80页
   ·抗条锈病基因Yr10、Yr18和Yr36的分子聚合育种第80-81页
5 结论第81-82页
6 参考文献第82-95页
7. 附录第95-103页
8. 致谢第103-104页
9. 攻读博士期间发表论文第104页

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