| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-28页 |
| ·橡胶树概况 | 第10-13页 |
| ·橡胶树形态及生理学 | 第10-11页 |
| ·橡胶树死皮病研究概况及进展 | 第11-13页 |
| ·植物程序性细胞死亡研究概况及进展 | 第13-22页 |
| ·植物界普遍存细胞凋亡现象 | 第14-16页 |
| ·植物细胞凋亡在植物发育中的作用 | 第14-15页 |
| ·植物超敏反应与PCD | 第15页 |
| ·环境胁迫与PCD | 第15-16页 |
| ·植物细胞凋亡的调节 | 第16-17页 |
| ·与植物细胞凋亡相关的蛋白酶 | 第17-19页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶 | 第17页 |
| ·液泡加工酶(VPE) | 第17-18页 |
| ·Metacaspases | 第18页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第18-19页 |
| ·细胞色素c | 第19页 |
| ·核酸酶 | 第19页 |
| ·与植物细胞凋亡相关的基因 | 第19-22页 |
| ·ACD2基因 | 第20页 |
| ·AtBI-1基因 | 第20页 |
| ·AtMYB30基因 | 第20页 |
| ·GA相关的合成基因 | 第20-21页 |
| ·HbMybl基因 | 第21页 |
| ·Iisl基因 | 第21页 |
| ·Isdl基因 | 第21页 |
| ·mlo基因 | 第21页 |
| ·nucellin基因 | 第21页 |
| ·sus基因 | 第21-22页 |
| ·twin基因 | 第22页 |
| ·Ts2基因 | 第22页 |
| ·非细胞体系 | 第22-23页 |
| ·非细胞体系研究细胞凋亡的优越性 | 第22页 |
| ·植物非细胞体系研究现状 | 第22-23页 |
| ·植物细胞凋亡的检测方法 | 第23-26页 |
| ·细胞形态观察 | 第23-24页 |
| ·光学显微镜 | 第23页 |
| ·荧光显微镜 | 第23-24页 |
| ·电子显微镜 | 第24页 |
| ·生化及分子生物学法 | 第24-25页 |
| ·凝胶电泳 | 第24页 |
| ·原位标记法(TUNEL法) | 第24页 |
| ·流式细胞仪 | 第24-25页 |
| ·caspase活性检测 | 第25页 |
| ·免疫学方法 | 第25页 |
| ·酶联免疫吸附(ELISA)法 | 第25页 |
| ·检测细胞色素c的释放 | 第25页 |
| ·生理学检测 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义及研究内容 | 第26-27页 |
| ·目的和意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第27页 |
| ·本研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-38页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·主要生化试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-38页 |
| ·转HbMyb1基因烟草的鉴定 | 第28-32页 |
| ·卡那霉素筛选及形态学鉴定 | 第28-29页 |
| ·转HbMyb1基因烟草无菌苗的获得及卡那霉素筛选 | 第28-29页 |
| ·转HbMyb1基因烟草的形态学鉴定 | 第29页 |
| ·PCR检测 | 第29-30页 |
| ·转HbMyb1基因烟草叶片总DNA提取(CTAB法) | 第29页 |
| ·PCR检测 | 第29-30页 |
| ·Southern检测 | 第30-32页 |
| ·转HbMyb1基因烟草叶片总DNA提取(CTAB法) | 第30页 |
| ·探针的标记 | 第30-31页 |
| ·烟草总基因组的酶切 | 第31页 |
| ·电泳与转膜 | 第31-32页 |
| ·预杂交及杂交 | 第32页 |
| ·洗膜及显影 | 第32页 |
| ·烟草细胞悬浮系的建立 | 第32-34页 |
| ·烟草无菌苗的获得 | 第32-33页 |
| ·初始愈伤组织的获得 | 第33页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第33-34页 |
| ·烟草细胞悬浮系的建立 | 第34页 |
| ·烟草细胞核的分离与纯化 | 第34-35页 |
| ·烟草原生质体的分离与纯化 | 第34页 |
| ·烟草细胞核的分离与纯化 | 第34-35页 |
| ·胶乳非细胞体系的建立 | 第35-36页 |
| ·胶乳DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·胶乳非细胞体系的建立 | 第36页 |
| ·烟草细胞核凋亡的诱导及检测 | 第36页 |
| ·烟草细胞核凋亡的诱导 | 第36页 |
| ·凋亡细胞核核酸降解检测 | 第36页 |
| ·TUNEL检测 | 第36页 |
| ·确定橡胶树胶乳中与细胞凋亡相关的核酸酶 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-53页 |
| ·转HbMyb1基因烟草的鉴定 | 第38-43页 |
| ·种子萌发率 | 第38页 |
| ·转HbMyb1基因烟草的形态学鉴定 | 第38-40页 |
| ·PCR检测 | 第40-43页 |
| ·烟草叶片DNA完整性分析 | 第40-41页 |
| ·PCR检测 | 第41-42页 |
| ·Southern检测 | 第42-43页 |
| ·烟草细胞悬浮系的建立 | 第43-45页 |
| ·烟草愈伤组织诱导培养基的筛选 | 第43页 |
| ·最佳继代培养基的筛选及脆散性愈伤组织的获得 | 第43-44页 |
| ·烟草细胞悬浮培养体系的建立 | 第44-45页 |
| ·烟草细胞核的分离和纯化 | 第45-48页 |
| ·酶液浓度对原生质体分离的影响 | 第45-46页 |
| ·酶解时间对原生质体分离的影响 | 第46-47页 |
| ·烟草细胞核的分离和纯化 | 第47-48页 |
| ·胶乳非细胞体系的建立 | 第48-50页 |
| ·胶乳DNA的提取 | 第48-49页 |
| ·胶乳非细胞体系的建立 | 第49-50页 |
| ·烟草细胞核凋亡的诱导及检测 | 第50-52页 |
| ·胶乳非细胞体系中凋亡细胞核的统计 | 第50-51页 |
| ·TUNEL标记 | 第51页 |
| ·DNA特异性降解检测 | 第51-52页 |
| ·确定胶乳中与细胞凋亡相关的核酸酶 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| ·应用非细胞体系研究细胞凋亡的优越性 | 第53页 |
| ·2,4-D在烟草组织培养中的作用 | 第53页 |
| ·不同孔径不锈钢筛网对原生质体分离纯化的影响 | 第53页 |
| ·细胞核纯化过程中的损失 | 第53-54页 |
| ·建立胶乳非细胞体系的意义 | 第54页 |
| ·后续工作展望 | 第54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 缩写词及其英汉对照 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
