| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| ·卵清蛋白概述 | 第10页 |
| ·卵清蛋白信号肽的研究现状 | 第10-14页 |
| ·信号肽的功能及其新发现 | 第10-11页 |
| ·卵清蛋白瞬时疏水信号肽序列研究 | 第11-12页 |
| ·卵清蛋白 NH2端的信号肽序列研究 | 第12-14页 |
| ·卵清蛋白表达的研究 | 第14-16页 |
| ·卵清蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第14-15页 |
| ·卵清蛋白在真核毕赤酵母的表达 | 第15-16页 |
| ·卵清蛋白突变体在酵母中的表达 | 第16页 |
| ·人 CD14 的生物学功能 | 第16-17页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-20页 |
| 第2章 OVA 基因的克隆及两种载体的构建 | 第20-38页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·组织样品 | 第20页 |
| ·菌种和质粒 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·试验所用溶液的配制方法 | 第21-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·OVA 基因的扩增 | 第24-28页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·RNA 的提取 | 第25页 |
| ·OVA 基因的扩增 | 第25-28页 |
| ·T-OVA 载体的构建 | 第28-29页 |
| ·OVA 基因 T 载体的构建 | 第28页 |
| ·T-OVA 载体的阳性质粒的筛选 | 第28-29页 |
| ·CD14SP-OVA 基因的扩增及两载体构建 | 第29-36页 |
| ·CD14sp-OVA 基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·真核表达载体 pcDNA3.1-OVA 的构建 | 第30-32页 |
| ·真核表达载体 pcDNA3.1-CD14sp-OVA 的构建 | 第32-33页 |
| ·pcDNA3.1-OVA 和 pcDNA3.1-CD14sp-OVA 筛选阳性质粒 | 第33-34页 |
| ·阳性质粒筛选及小量制备 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第3章 分泌蛋白的表达及其鉴定 | 第38-46页 |
| ·实验材料 | 第38-41页 |
| ·细胞株 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38-39页 |
| ·试验相关溶液及配制方法 | 第39-41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·HEK293T 细胞的培养 | 第41-42页 |
| ·细胞复苏 | 第41页 |
| ·细胞传代 | 第41-42页 |
| ·细胞冻存 | 第42页 |
| ·表达蛋白的鉴定 | 第42-45页 |
| ·磷酸钙转染 HEK293T 细胞 | 第42页 |
| ·OVA 表达蛋白的浓缩 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分离蛋白 | 第43-44页 |
| ·Western-blot 分析表达产物 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第4章 实验结果分析与讨论 | 第46-56页 |
| ·实验结果与分析 | 第46-54页 |
| ·RNA 的提取 | 第46页 |
| ·RT-PCR 合成 cDNA | 第46页 |
| ·OVA 基因的扩增及其 T-OVA 载体的连接 | 第46-48页 |
| ·CD14sp-OVA 基因的扩增及两载体构建 | 第48-50页 |
| ·两种真核表达载体阳性质粒筛选结果 | 第50-51页 |
| ·OVA 基因和 CD14sp-OVA 基因扩增及其流程对照图 | 第51-53页 |
| ·HEK293T 细胞生长状况 | 第53页 |
| ·Western-blot 表达产物鉴定结果 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 攻读硕士学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
