摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词对照表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
文献综述 | 第13-23页 |
一、植物体内的蛋白水解酶 | 第13-18页 |
·植物体内蛋白水解酶的类型 | 第13-14页 |
·植物体内蛋白水解酶的生理功能和定位 | 第14-15页 |
·内肽酶的研究技术和方法 | 第15-18页 |
二、枯草杆菌类蛋白酶研究进展 | 第18-22页 |
·枯草类蛋白酶概述 | 第18页 |
·枯草杆菌类蛋白酶的结构特点 | 第18-20页 |
·枯草杆菌蛋白酶的基因工程研究 | 第20-22页 |
三、研究目的与意义 | 第22-23页 |
第一章 小麦叶片内一种衰老相关的蛋白酶的分离纯化 | 第23-37页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·实验材料 | 第23页 |
·仪器与试剂 | 第23页 |
·层析柱的准备 | 第23页 |
·叶片暗诱导衰老处理 | 第23-24页 |
·粗酶液的提取 | 第24页 |
·蛋白含量测定 | 第24页 |
·蛋白水解酶活性梯度凝胶电泳 | 第24页 |
·普通天然梯度凝胶电泳 | 第24-25页 |
·银染方法 | 第24页 |
·考马斯亮蓝R—250染色法 | 第24-25页 |
·蛋白酶的分离纯化 | 第25-26页 |
·热变性处理 | 第25页 |
·硫酸铵分级沉淀 | 第25页 |
·sephadex G-25层析脱盐 | 第25页 |
·Q-sepherose fast flow强阴离子交换柱层析 | 第25页 |
·电泳分离和蛋白回收 | 第25-26页 |
·质谱鉴定 | 第26页 |
·目的蛋白酶系统进化树的构建 | 第26页 |
2 结果与分析 | 第26-35页 |
·热变性处理 | 第26-27页 |
·硫酸铵分级沉淀 | 第27-28页 |
·Q-sepherose fast flow强阴离子交换柱层析 | 第28-30页 |
·电泳分离和蛋白回收 | 第30-31页 |
·梯度凝胶电泳测定蛋白酶分子量 | 第31-32页 |
·切胶回收蛋白质谱鉴定 | 第32-35页 |
·目的蛋白酶的系统进化树 | 第35页 |
3 讨论 | 第35-37页 |
第二章 暗诱导衰老小麦叶片内一种枯草类蛋白酶的生化特性鉴定 | 第37-45页 |
1 材料与方法 | 第37-39页 |
·实验材料 | 第37页 |
·仪器与试剂 | 第37页 |
·蛋白含量测定 | 第37页 |
·内肽酶同工酶梯度凝胶电泳 | 第37页 |
·普通梯度凝胶电泳 | 第37页 |
·蛋白酶生化特性分析 | 第37-39页 |
·抑制剂对蛋白酶活性的影响 | 第37-38页 |
·温度对酶活性的影响 | 第38页 |
·pH对酶活性的影响 | 第38页 |
·蛋白酶的热稳定性 | 第38页 |
·有机试剂等强变性剂对蛋白酶活性的影响 | 第38-39页 |
2 结果与分析 | 第39-43页 |
·抑制剂对蛋白酶活性的影响 | 第39-40页 |
·温度对该蛋白酶活性的影响 | 第40页 |
·pH对该酶活性的影响 | 第40-41页 |
·该蛋白酶的热稳定性 | 第41-42页 |
·不同有机试剂对蛋白酶活性的影响 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
全文结论 | 第45-47页 |
创新之处 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53页 |