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一种与小麦叶片衰老相关的丝氨酸型蛋白酶的纯化及其生化特性鉴定

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词对照表第10-11页
前言第11-13页
文献综述第13-23页
 一、植物体内的蛋白水解酶第13-18页
   ·植物体内蛋白水解酶的类型第13-14页
   ·植物体内蛋白水解酶的生理功能和定位第14-15页
   ·内肽酶的研究技术和方法第15-18页
 二、枯草杆菌类蛋白酶研究进展第18-22页
   ·枯草类蛋白酶概述第18页
   ·枯草杆菌类蛋白酶的结构特点第18-20页
   ·枯草杆菌蛋白酶的基因工程研究第20-22页
 三、研究目的与意义第22-23页
第一章 小麦叶片内一种衰老相关的蛋白酶的分离纯化第23-37页
 1 材料与方法第23-26页
   ·实验材料第23页
   ·仪器与试剂第23页
   ·层析柱的准备第23页
   ·叶片暗诱导衰老处理第23-24页
   ·粗酶液的提取第24页
   ·蛋白含量测定第24页
   ·蛋白水解酶活性梯度凝胶电泳第24页
   ·普通天然梯度凝胶电泳第24-25页
     ·银染方法第24页
     ·考马斯亮蓝R—250染色法第24-25页
   ·蛋白酶的分离纯化第25-26页
     ·热变性处理第25页
     ·硫酸铵分级沉淀第25页
     ·sephadex G-25层析脱盐第25页
     ·Q-sepherose fast flow强阴离子交换柱层析第25页
     ·电泳分离和蛋白回收第25-26页
   ·质谱鉴定第26页
   ·目的蛋白酶系统进化树的构建第26页
 2 结果与分析第26-35页
   ·热变性处理第26-27页
   ·硫酸铵分级沉淀第27-28页
   ·Q-sepherose fast flow强阴离子交换柱层析第28-30页
   ·电泳分离和蛋白回收第30-31页
   ·梯度凝胶电泳测定蛋白酶分子量第31-32页
   ·切胶回收蛋白质谱鉴定第32-35页
   ·目的蛋白酶的系统进化树第35页
 3 讨论第35-37页
第二章 暗诱导衰老小麦叶片内一种枯草类蛋白酶的生化特性鉴定第37-45页
 1 材料与方法第37-39页
   ·实验材料第37页
   ·仪器与试剂第37页
   ·蛋白含量测定第37页
   ·内肽酶同工酶梯度凝胶电泳第37页
   ·普通梯度凝胶电泳第37页
   ·蛋白酶生化特性分析第37-39页
     ·抑制剂对蛋白酶活性的影响第37-38页
     ·温度对酶活性的影响第38页
     ·pH对酶活性的影响第38页
     ·蛋白酶的热稳定性第38页
     ·有机试剂等强变性剂对蛋白酶活性的影响第38-39页
 2 结果与分析第39-43页
   ·抑制剂对蛋白酶活性的影响第39-40页
   ·温度对该蛋白酶活性的影响第40页
   ·pH对该酶活性的影响第40-41页
   ·该蛋白酶的热稳定性第41-42页
   ·不同有机试剂对蛋白酶活性的影响第42-43页
 3 讨论第43-45页
全文结论第45-47页
创新之处第47-49页
参考文献第49-53页
致谢第53页

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