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烟田土壤青枯菌的分子检测技术及应用

致谢第1-9页
摘要第9-10页
1 文献综述第10-24页
   ·烟草青枯菌研究概况第10-16页
     ·烟草青枯病的发生、分布与危害第10页
     ·烟草青枯菌的分类地位第10-11页
     ·青枯菌亚群鉴定第11页
     ·病原形态及存活条件第11-12页
     ·寄主范围第12页
     ·危害症状第12页
     ·烟草青枯病的流行规律第12-13页
       ·越冬和传播第12页
       ·影响病害流行的因素第12-13页
     ·烟草青枯病的致病机制第13页
     ·烟草青枯病的防治研究现状第13-16页
       ·抗病育种第13-14页
       ·栽培措施防治第14页
       ·化学防治第14-15页
       ·生物防治第15-16页
   ·青枯菌的检测方法研究现状第16-19页
     ·常规检测方法第16页
     ·指示植物法第16-17页
     ·血清学方法第17-18页
       ·酶联免疫吸附法第17页
       ·间接免疫荧光染色法第17-18页
     ·分子生物学方法第18-19页
       ·分子杂交检测法第18页
       ·PCR 扩增技术第18-19页
   ·PCR 技术在土壤微生物检测中的应用第19-24页
     ·土壤微生物总DNA 提取方法研究进展第20-23页
       ·裂解细胞第20-21页
       ·提取核酸第21-22页
       ·纯化核酸第22-23页
     ·PCR 技术在土壤病原菌微生物检测中的应用第23-24页
2 引言第24-25页
3 材料与方法第25-35页
   ·烟田土壤青枯菌的分离培养与生理生化鉴定第25-26页
     ·材料第25页
       ·培养基第25页
       ·试验所用试剂第25页
       ·供试土样第25页
     ·试验方法第25-26页
       ·土壤样品的采集第25页
       ·供试菌株的分离与培养第25页
       ·细菌形态及培养性状第25-26页
       ·鞭毛染色第26页
       ·革兰氏测定第26页
       ·氧化酶反应第26页
       ·致病性测定第26页
   ·青枯菌 PCR 检测体系第26-29页
     ·材料第26-27页
       ·试验所用培养基第26页
       ·试验所用缓冲液第26页
       ·试验所用主要试剂及主要仪器设备第26页
       ·供试菌株第26-27页
     ·试验方法第27-29页
       ·模板 DNA 的制备第27页
       ·细菌性青枯菌 PCR 检测体系第27-29页
   ·烟田土壤中烟草青枯菌 PCR 检测体系第29-32页
     ·材料第29页
       ·供试土样第29页
       ·试验所用的主要试剂第29页
       ·试验所用主要仪器第29页
     ·试验方法第29-32页
       ·土壤总 DNA 的提取方法第29-31页
       ·土壤中烟草青枯菌 PCR 检测体系的优化建立第31-32页
       ·土壤中青枯菌 PCR 检测体系实用性检测第32页
   ·土壤青枯菌分子检测技术的应用研究第32-35页
     ·应用土壤青枯菌的 PCR 检测技术半定量评价土传青枯菌的越冬数量第32-34页
       ·供试土样第32-34页
       ·土壤中青枯菌越冬数量的分子检测第34页
     ·应用土壤青枯菌的 PCR 检测技术评价烟草青枯菌的早期侵染情况第34页
       ·供试土样第34页
       ·土壤青枯菌早期侵染的分子检测第34页
     ·应用土壤青枯菌的 PCR 检测技术评价不同防治措施对烟草青枯菌的控制作用第34-35页
       ·供试土样第34页
       ·不同处理对土壤青枯菌数量的控制作用检测第34-35页
4 结果与分析第35-50页
   ·烟田土壤青枯菌理化鉴定结果第35-37页
     ·细菌形态与培养性状第35页
     ·鞭毛染色第35页
     ·革兰氏测定第35页
     ·氧化酶反应第35-36页
     ·致病性测定第36-37页
   ·烟草青枯菌 PCR 检测结果第37-41页
     ·引物筛选及特异性检测第37-39页
     ·PCR 扩增条件优化第39页
     ·PCR 灵敏性检测第39-41页
   ·烟田土壤青枯菌的 PCR 检测技术第41-45页
     ·土壤 DNA 提取方法比较第41页
     ·土壤青枯菌的 PCR 检测条件优化第41-43页
     ·土壤中青枯菌 PCR 检测体系建立第43页
     ·土壤青枯菌检测体系实用性检测第43-45页
   ·土壤青枯菌分子检测技术的应用研究第45-50页
     ·应用土壤青枯菌的PCR 检测技术半定量评价土传青枯菌的越冬数量第45-46页
     ·应用土壤青枯菌的PCR 检测技术评价烟草青枯菌的早期侵染情况第46-48页
     ·应用土壤青枯菌的 PCR 检测技术评价不同防治措施对烟草青枯菌的控制作用第48-50页
5 结论与讨论第50-53页
   ·结论第50-51页
   ·讨论第51-53页
     ·引物检测的特异性第51页
     ·不同土壤总DNA 提取方法对检测结果的影响第51页
     ·PCR 检测性能对检测结果的影响第51-52页
     ·PCR 检测假阳性与假阴性的排除与降低第52页
     ·PCR 检测体系的评价第52页
     ·PCR 检测体系应用效果评价第52-53页
参考文献第53-63页
ABSTRACT第63-64页

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