摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
符号表 | 第6-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-21页 |
·沙门氏菌及其危害 | 第10页 |
·减毒沙门氏菌 | 第10-11页 |
·减毒沙门氏菌基因缺失疫苗 | 第11-15页 |
·减毒沙门氏菌的侵入机制 | 第11-12页 |
·可作为疫苗的沙门氏菌减毒株 | 第12-15页 |
·理想的减毒疫苗 | 第15页 |
·减毒沙门氏菌载体 | 第15-19页 |
·减毒沙门氏菌载体递呈外源抗原的优点 | 第15-16页 |
·减毒沙门氏菌作为载体存在的问题 | 第16页 |
·减毒沙门氏菌载体在疫苗中的应用 | 第16-19页 |
·展望 | 第19-21页 |
第2章 鼠伤寒沙门氏菌缺失菌株 crp cyaSL1344 的构建与鉴定 | 第21-31页 |
·材料 | 第21-22页 |
·菌株、质粒及培养条件 | 第21页 |
·主要试剂和抗生素的配制 | 第21页 |
·主要培养基及其配制 | 第21-22页 |
·主要实验器材 | 第22页 |
·方法 | 第22-25页 |
·引物设计与合成 | 第22-23页 |
·细菌的活化 | 第23页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
·细菌或重组质粒的 PCR 鉴定 | 第23页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第23-24页 |
·鼠伤寒沙门氏菌 crp cyaSL1344 缺失株的构建 | 第24-25页 |
·结果与分析 | 第25-27页 |
·缺失株Δcrp cyaSL1344 的构建及筛选 | 第25-27页 |
·讨论 | 第27-31页 |
·重组自杀性质粒在同源重组中的应用 | 第28-29页 |
·菌株基因缺失的选择 | 第29-31页 |
第3章 鼠伤寒沙门氏菌 crp cyaSL1344 缺失株生物学特性初步研究 | 第31-42页 |
·材料 | 第31-32页 |
·菌株 | 第31页 |
·实验动物 | 第31页 |
·主要试剂、培养基及其配制 | 第31-32页 |
·主要实验器材 | 第32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·沙门氏菌的 PCR 特异性鉴定 | 第32-33页 |
·缺失株 crp cyaSL1344 的表型鉴定 | 第33页 |
·缺失株 crp cyaSL1344 的遗传稳定性 | 第33页 |
·缺失株 crp cyaSL1344 的生长特性 | 第33页 |
·缺失株 crp cyaSL1344 的毒力测定 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-39页 |
·缺失株 crp cyaSL1344 的表型鉴定 | 第34-35页 |
·缺失株 crp cyaSL1344 的遗传稳定性 | 第35-36页 |
·缺失株ΔcrpΔcyaSL1344 的生长特性 | 第36-37页 |
·缺失株ΔcrpΔcyaSL1344 的毒力测定 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
·基因缺失对菌株表型的影响 | 第39-40页 |
·基因缺失对菌株毒力的影响 | 第40-42页 |
第4章 鼠伤寒沙门氏菌 crp cyaSL1344 缺失株对雏鸡免疫原性初步观察 | 第42-48页 |
·材料 | 第42-43页 |
·菌株 | 第42页 |
·实验动物 | 第42页 |
·主要试剂、培养基及其配制 | 第42-43页 |
·主要实验器材 | 第43页 |
·方法 | 第43-45页 |
·免疫用菌液的制备 | 第43页 |
·ELISA 抗原的制备 | 第43页 |
·间接 ELISA 法的步骤 | 第43-44页 |
·抗原最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定 | 第44页 |
·血清最佳反应时间确定 | 第44页 |
·底物显色时间确定 | 第44页 |
·雏鸡血清抗体 IgG 的检测 | 第44-45页 |
·结果与分析 | 第45-46页 |
·ELISA 法最佳反应条件 | 第45页 |
·雏鸡血清抗体 IgG 检测结果 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46页 |
·展望 | 第46-48页 |
第5章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
缩略语词汇表 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第58页 |