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文蛤胞内铜锌超氧化物歧化酶的基因克隆与表达及重组蛋白活性的测定

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 文献综述第8-14页
   ·文蛤养殖现状及分子生物学研究进展第8-10页
     ·我国文蛤养殖现状第8-9页
     ·文蛤的分子生物学研究第9-10页
   ·铜锌超氧化物歧化酶基因研究现状第10-12页
     ·超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的发现与种类第10-11页
     ·Cu/Zn-SOD 的结构特征第11页
     ·Cu/Zn-SOD 的理化性质第11-12页
     ·影响Cu/Zn-SOD 活性的因素第12页
   ·本研究的意义第12-14页
2 文蛤胞内铜锌超氧化物岐化酶基因的克隆与序列分析第14-23页
   ·前言第14页
   ·材料与方法第14-15页
     ·材料第14页
     ·方法第14-15页
   ·结果与讨论第15-22页
     ·结果第15-21页
     ·讨论第21-22页
   ·小结第22-23页
3 文蛤胞内铜锌超氧化物歧化酶的时序表达与组织分布表达第23-33页
   ·前言第23页
   ·实验方法第23-28页
     ·实验材料第23-24页
     ·实验步骤第24-26页
     ·Real-time PCR第26-28页
   ·结果与讨论第28-32页
   ·小结第32-33页
4 文蛤胞内铜锌超氧化物歧化酶的体外重组表达与活性鉴定第33-47页
   ·前言第33页
   ·载体构建第33-36页
     ·引物设计第33页
     ·构建克隆载体PMD-Mm-Cu/Zn-SOD第33-35页
     ·构建表达载体PET-Mm-Cu/Zn-SOD第35-36页
   ·诱导第36-37页
     ·诱导培养第36-37页
     ·超声破碎第37页
     ·煮样第37页
   ·蛋白电泳第37-39页
     ·电泳液制备第37页
     ·制胶(BIO-RAD)第37-38页
     ·电泳第38页
     ·染色第38页
     ·大量诱导第38-39页
   ·蛋白纯化第39-41页
     ·配制蛋白纯化所用Buffer第39页
     ·预处理第39-40页
     ·过柱子第40页
     ·透析第40-41页
   ·重组表达蛋白活性测定第41-42页
     ·纯化蛋白的定量第41页
     ·酶活测定第41-42页
   ·结果与讨论第42-46页
     ·诱导表达结果与讨论第42-44页
     ·活性测定结果与讨论第44-45页
     ·温度及pH 对文蛤铜锌超氧化物歧化酶活性的影响第45-46页
   ·小结第46-47页
结论第47-48页
参考文献第48-51页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第51-52页
致谢第52页

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