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七鳃鳗B细胞连接蛋白(BLNK)基因克隆、表达及生物信息学分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 B 细胞连接蛋白的研究进展第10-17页
   ·BLNK 在B 细胞受体(BCR)信号通路中作用第10-13页
     ·BLNK 参与PLC-γ2 的激活第11页
     ·BLNK 与Cbl 结合能够负调节PLC-γ2 的活化第11-12页
     ·BLNK 参与Ras 通路的激活第12-13页
     ·BLNK 参与Vav 和Nck 的磷酸化过程第13页
   ·在B 细胞发育过程中BLNK 的作用第13-14页
   ·在巨噬细胞中BLNK 的作用第14页
   ·BLNK 阻止非整倍体的产生第14-15页
   ·BLNK 抑制前体B 细胞白血病的产生第15-16页
   ·小节第16-17页
第2章 七鳃鳗体内BLNK 基因的分子克隆及生物信息学分析第17-43页
   ·日本七鳃鳗白细胞中BLNK 基因的克隆第17-21页
     ·材料第17-18页
     ·方法第18-21页
   ·七鳃鳗BLNK 推导的氨基酸序列生物信息学分析第21-22页
     ·数据库和软件第21-22页
     ·一级结构分析第22页
     ·拓扑结构分析和二级结构预测第22页
     ·三级结构模拟第22页
     ·同源序列比对第22页
   ·脊椎动物BLNK 进化分析第22-23页
     ·序列比对和系统发育分析第23页
     ·BLNK 保守性分析第23页
   ·七鳃鳗BLNK 基因克隆第23-24页
     ·七鳃鳗白细胞总RNA 的提取第23页
     ·七鳃鳗BLNK 5’RACE 结果第23-24页
   ·七鳃鳗BLNK 基因编码氨基酸序列生物信息学分析第24-34页
     ·理化性质分析第24-26页
     ·信号肽和跨膜结构预测第26-28页
     ·二级结构预测第28-29页
     ·三维结构模拟第29页
     ·同源序列比对第29-33页
     ·保守基序预测第33-34页
   ·脊椎动物BLNK 蛋白家族进化分析第34-40页
     ·系统发育树分析第34页
     ·保守性分析第34-40页
   ·讨论第40-42页
   ·小结第42-43页
第3章 七鳃鳗BLNK 基因表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备第43-60页
   ·实时荧光定量PCR 法检测BLNK 的表达第43-46页
     ·材料第43-44页
     ·方法第44-46页
   ·七鳃鳗BLNK 基因原核表达及重组蛋白纯化第46-51页
     ·材料第46页
     ·方法第46-51页
   ·兔、鼠抗七鳃鳗血清BLNK 蛋白多克隆抗体的制备及ELISA 重组蛋白纯化..第51-54页
     ·材料第51-52页
     ·方法第52-54页
   ·结果第54-57页
     ·BLNK 基因在七鳃鳗各组织中的相对表达量第54-56页
     ·重组BLNK 载体的构建及原核表达、纯化第56-57页
     ·兔抗七鳃鳗血清和鼠抗七鳃鳗血清BLNK 多克隆抗体的制备和效价测定第57页
   ·讨论第57-59页
   ·小结第59-60页
第四章 结论第60-61页
本论文的创新点第61-62页
参考文献第62-68页
附录第68-86页
 附录1 所有脊椎动物BLNK 的BTK 基因的FASTA 格式氨基酸序列第68-84页
 附录2 部分组织总RNA 的电泳结果第84-85页
 附录3 部实时荧光定量PCR 管家基因GAPDH 和目的基因BLNK 标准曲线第85-86页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第86-87页
致谢第87页

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