摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第1章 B 细胞连接蛋白的研究进展 | 第10-17页 |
·BLNK 在B 细胞受体(BCR)信号通路中作用 | 第10-13页 |
·BLNK 参与PLC-γ2 的激活 | 第11页 |
·BLNK 与Cbl 结合能够负调节PLC-γ2 的活化 | 第11-12页 |
·BLNK 参与Ras 通路的激活 | 第12-13页 |
·BLNK 参与Vav 和Nck 的磷酸化过程 | 第13页 |
·在B 细胞发育过程中BLNK 的作用 | 第13-14页 |
·在巨噬细胞中BLNK 的作用 | 第14页 |
·BLNK 阻止非整倍体的产生 | 第14-15页 |
·BLNK 抑制前体B 细胞白血病的产生 | 第15-16页 |
·小节 | 第16-17页 |
第2章 七鳃鳗体内BLNK 基因的分子克隆及生物信息学分析 | 第17-43页 |
·日本七鳃鳗白细胞中BLNK 基因的克隆 | 第17-21页 |
·材料 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-21页 |
·七鳃鳗BLNK 推导的氨基酸序列生物信息学分析 | 第21-22页 |
·数据库和软件 | 第21-22页 |
·一级结构分析 | 第22页 |
·拓扑结构分析和二级结构预测 | 第22页 |
·三级结构模拟 | 第22页 |
·同源序列比对 | 第22页 |
·脊椎动物BLNK 进化分析 | 第22-23页 |
·序列比对和系统发育分析 | 第23页 |
·BLNK 保守性分析 | 第23页 |
·七鳃鳗BLNK 基因克隆 | 第23-24页 |
·七鳃鳗白细胞总RNA 的提取 | 第23页 |
·七鳃鳗BLNK 5’RACE 结果 | 第23-24页 |
·七鳃鳗BLNK 基因编码氨基酸序列生物信息学分析 | 第24-34页 |
·理化性质分析 | 第24-26页 |
·信号肽和跨膜结构预测 | 第26-28页 |
·二级结构预测 | 第28-29页 |
·三维结构模拟 | 第29页 |
·同源序列比对 | 第29-33页 |
·保守基序预测 | 第33-34页 |
·脊椎动物BLNK 蛋白家族进化分析 | 第34-40页 |
·系统发育树分析 | 第34页 |
·保守性分析 | 第34-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第3章 七鳃鳗BLNK 基因表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备 | 第43-60页 |
·实时荧光定量PCR 法检测BLNK 的表达 | 第43-46页 |
·材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·七鳃鳗BLNK 基因原核表达及重组蛋白纯化 | 第46-51页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-51页 |
·兔、鼠抗七鳃鳗血清BLNK 蛋白多克隆抗体的制备及ELISA 重组蛋白纯化.. | 第51-54页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-54页 |
·结果 | 第54-57页 |
·BLNK 基因在七鳃鳗各组织中的相对表达量 | 第54-56页 |
·重组BLNK 载体的构建及原核表达、纯化 | 第56-57页 |
·兔抗七鳃鳗血清和鼠抗七鳃鳗血清BLNK 多克隆抗体的制备和效价测定 | 第57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第四章 结论 | 第60-61页 |
本论文的创新点 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
附录 | 第68-86页 |
附录1 所有脊椎动物BLNK 的BTK 基因的FASTA 格式氨基酸序列 | 第68-84页 |
附录2 部分组织总RNA 的电泳结果 | 第84-85页 |
附录3 部实时荧光定量PCR 管家基因GAPDH 和目的基因BLNK 标准曲线 | 第85-86页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |