| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| ·概述 | 第10-11页 |
| ·乳腺癌的研究与治疗 | 第11-13页 |
| ·乳腺癌的研究现状 | 第11-12页 |
| ·乳腺癌的基因治疗 | 第12-13页 |
| ·癌细胞转移与钙离子敏感受体CASR | 第13-18页 |
| ·癌细胞转移 | 第13-15页 |
| ·乳腺癌细胞的骨转移 | 第15-16页 |
| ·CaSR简介 | 第16页 |
| ·CaSR与乳腺癌 | 第16-18页 |
| ·RNA干扰技术 | 第18-20页 |
| ·RNAi简介 | 第18页 |
| ·小干扰 RNA(small interfering RNA) | 第18-19页 |
| ·siRNA用于疾病的治疗和研究 | 第19-20页 |
| ·本论文的研究意义和技术路线 | 第20-22页 |
| ·研究意义 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 小干扰RNA片段(SIRNA)的设计与载体构建 | 第22-40页 |
| ·试验材料 | 第22-26页 |
| ·质粒和菌株 | 第22页 |
| ·药品和试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·所用试剂配制 | 第23-26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·CaSR基因序列的选择 | 第26-29页 |
| ·siRNA表达载体psiRNA-hH1neo | 第29-30页 |
| ·siRNA干扰片断的设计选择 | 第30-31页 |
| ·靶向CaSR基因siRNA载体的构建 | 第31-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-39页 |
| ·psiRNA-hH1 neo质粒的提取鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的测序 | 第37-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 SIRNA干扰质粒对MDA-MB-231细胞内CASR基因抑制的检测 | 第40-56页 |
| ·实验材料 | 第40-45页 |
| ·质粒和细胞系 | 第40页 |
| ·药品与试剂 | 第40-41页 |
| ·实验仪器与设备 | 第41-42页 |
| ·实验试剂配制 | 第42-45页 |
| ·实验方法 | 第45-51页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·脂质体转染siRNA表达质粒 | 第45-47页 |
| ·Real-Time PCR检测CaSR mRNA表达 | 第47-49页 |
| ·Western Blot 蛋白水平检测CaSR基因表达 | 第49-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-55页 |
| ·CaSR基因mRNA水平Real-Time PCR检测结果 | 第51-54页 |
| ·psiRNA-CaSR2 有效的沉默CaSR | 第54页 |
| ·CaSR蛋白水平检测psiRNA-CaSR2干扰质粒干扰效果 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第四章 RNA干扰CASR基因对MDA-MB-231细胞体外迁移性的影响 | 第56-62页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·质粒和细胞系 | 第56页 |
| ·药品与试剂 | 第56-57页 |
| ·实验仪器与设备 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·细胞的培养与刮伤 | 第57-58页 |
| ·拍照统计处理 | 第58-59页 |
| ·试验结果与讨论 | 第59-61页 |
| ·Cell Scratch结果 | 第59页 |
| ·细胞迁移速率计算 | 第59-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 结论与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附件 | 第71页 |
