| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-29页 |
| ·天然维生素E的研究进展 | 第12-21页 |
| ·天然维生素E及其结构 | 第13-14页 |
| ·天然维生素E的合成部位及分布 | 第14页 |
| ·天然维生素E的功能与应用 | 第14-15页 |
| ·天然维生素E的生物合成途径 | 第15-17页 |
| ·天然维生素E合成的调控和基因工程 | 第17-21页 |
| ·高油玉米的研究进展 | 第21-24页 |
| ·高油玉米的特点 | 第21-22页 |
| ·高油玉米的种质改良 | 第22页 |
| ·高油115的特性 | 第22-24页 |
| ·植物遗传转化研究进展 | 第24-26页 |
| ·植物遗传转化的优点 | 第24页 |
| ·植物遗传转化方法 | 第24-26页 |
| ·模式植物拟南芥的遗传转化研究进展 | 第26-28页 |
| ·拟南芥的生物学特性 | 第27-28页 |
| ·拟南芥的遗传转化方法 | 第28页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 第2章 玉米γ-TMT基因的克隆和原核表达 | 第29-46页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌种和载体 | 第29页 |
| ·工具酶和试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·测序和引物合成 | 第29页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·玉米叶片总RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·反转录获得玉米总RNA的cDNA第一链 | 第31页 |
| ·玉米γ-TMT基因的cDNA序列测定 | 第31-34页 |
| ·玉米γ-TMT基因的原核表达 | 第34-35页 |
| ·考马斯亮蓝测定总蛋白浓度 | 第35-37页 |
| ·γ-TMT体外酶活性分析及比活对比 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-44页 |
| ·高油115号玉米总RNA的提取及电泳 | 第37-38页 |
| ·玉米γ-TMT基因全长cDNA序列的获得 | 第38-39页 |
| ·玉米γ-TMT基因的原核表达 | 第39-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第3章 玉米γ-TMT基因转基因拟南芥的获得及功能分析 | 第46-72页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·菌种和载体 | 第46页 |
| ·MS培养基母液配制 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-61页 |
| ·组成型植物表达载体pBI121-MTMT的构建 | 第47页 |
| ·农杆菌LBA4404电击感受态细胞的制备和农杆菌转化 | 第47-48页 |
| ·转化农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第48-49页 |
| ·拟南芥转化(粘花法Floral Dipping) | 第49-50页 |
| ·转基因拟南芥的抗性筛选 | 第50页 |
| ·转基因拟南芥的PCR检测 | 第50-51页 |
| ·转基因纯系植株的获得 | 第51页 |
| ·纯系转基因拟南芥的ELISA分析 | 第51-53页 |
| ·纯系转基因拟南芥的Western blotting分析 | 第53-55页 |
| ·纯系转基因拟南芥的Northern blotting分析 | 第55-60页 |
| ·转基因拟南芥α-生育酚与γ-生育酚比值的测定 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·组成型植物表达载体pBI121-MTMT的构建 | 第61页 |
| ·农杆菌转化子的PCR鉴定 | 第61页 |
| ·拟南芥的转化 | 第61-65页 |
| ·转基因拟南芥的ELISA检测 | 第65页 |
| ·转基因拟南芥的Western blotting | 第65-66页 |
| ·转基因拟南芥的Northern blotting | 第66-67页 |
| ·转基因拟南芥α-生育酚与γ-生育酚的比值 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 第4章 玉米γ-TMT基因的亚细胞定位 | 第72-80页 |
| ·实验材料 | 第72页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·菌种和载体 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-74页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第72页 |
| ·农杆菌电击转化和转化子的PCR鉴定 | 第72-73页 |
| ·烟草转化 | 第73页 |
| ·转基因烟草的PCR鉴定 | 第73-74页 |
| ·PCR阳性转基因烟草的GFP观察 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-79页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第74页 |
| ·农杆菌转化子的PCR鉴定 | 第74页 |
| ·烟草转化 | 第74-75页 |
| ·转基因烟草的GFP观测 | 第75-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| 第5章 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
