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AcrAB外输泵介导的鸡沙门氏菌耐药性研究

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-22页
   ·病原微生物耐药分子机制研究进展第14-16页
     ·遗传机制第14-15页
     ·生化机制第15-16页
   ·病原微生物对氟喹诺酮类药物的耐药机制研究进展第16-19页
     ·DNA 旋转酶和拓扑异构酶IV第17-18页
     ·药物主动外输系统(Efflux System)第18-19页
     ·膜通透性降低第19页
   ·氟喹诺酮类药物耐药性的抑制第19-20页
   ·定量PCR 技术第20-21页
   ·试验的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-35页
   ·试验材料第22-24页
     ·菌株第22页
     ·药品第22页
     ·主要试剂第22页
     ·分子量标准参照物第22页
     ·酶和试剂盒第22页
     ·克隆载体第22页
     ·主要仪器设备第22-23页
     ·溶液及培养基的制备第23-24页
     ·细菌生化微量鉴定管第24页
     ·鸡沙门氏菌属多价诊断血清第24页
   ·方法第24-35页
     ·鸡沙门氏菌耐药菌株的体外诱导及鉴定第24-25页
     ·鸡沙门氏菌耐药菌株的药敏试验第25页
     ·不同耐药水平鸡沙门氏菌株对环丙沙星的摄取试验第25-26页
     ·不同耐药水平鸡沙门氏菌acrA 基因的克隆及测序第26-30页
     ·不同耐药水平鸡沙门氏菌acrA 基因转录水平的检测第30-33页
     ·不同耐药水平鸡沙门氏菌acrB 基因转录水平的检测第33-35页
3 结果与分析第35-51页
   ·鸡沙门氏菌耐药菌株的体外诱导及鉴定第35-36页
     ·环丙沙星的MIC 测定第35页
     ·耐药菌株的体外诱导第35页
     ·生化鉴定结果第35页
     ·药敏试验结果第35-36页
   ·不同耐药水平鸡沙门氏菌株对环丙沙星的摄取第36-40页
     ·标准曲线的制备第36-37页
     ·C79-13 对环丙沙星的摄取第37页
     ·16×MIC 耐药菌株对环丙沙星的摄取第37-38页
     ·32×MIC 耐药菌株对环丙沙星的摄取第38页
     ·64×MIC 耐药菌株对环丙沙星的摄取第38-39页
     ·128×MIC 耐药菌株对环丙沙星的摄取第39页
     ·256×MIC 耐药菌株对环丙沙星的摄取第39-40页
   ·不同耐药水平鸡沙门氏菌ACRA 基因的测序及其转录水平的检测结果第40-48页
     ·鸡沙门氏菌基因组提取结果第40-41页
     ·鸡沙门氏菌acrA 基因扩增结果第41页
     ·PCR 产物的克隆及阳性克隆的筛选第41页
     ·重组质粒鉴定结果第41-42页
     ·菌株C79-13 和16×MIC、32×MIC、64×MIC、128×MIC、256×MIC 耐药菌株测序结果及分析第42-47页
     ·标准曲线的制备第47-48页
     ·各菌株acrA 基因mRNA 水平定量结果第48页
   ·不同耐药水平鸡沙门氏菌ACRB 基因转录水平的检测结果第48-51页
     ·标准曲线的制备第48-50页
     ·各菌株acrB 基因mRNA 水平定量结果第50-51页
4 讨论第51-56页
   ·沙门氏菌的耐药现状第51页
   ·耐药鸡沙门氏菌的诱导第51-52页
   ·可能存在的耐药机制第52页
   ·不同耐药水平鸡沙门氏菌株对环丙沙星的摄取第52-53页
   ·不同耐药水平鸡沙门氏菌ACRA 基因核苷酸及氨基酸序列分析第53页
   ·竞争性RT-PCR 方法在定量检测中的应用第53-54页
   ·不同耐药水平鸡沙门氏菌ACRAB 基因转录水平的检测第54-55页
   ·细菌耐药机制研究中存在的问题第55-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-63页
附图第63-71页
攻读硕士期间发表和接收的论文第71页

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