| 中文摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-7页 |
| 缩略语表 | 第7-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-23页 |
| ·细菌群体感应系统 | 第8-16页 |
| ·细菌群体感应系统的发现 | 第8-9页 |
| ·几种不同的QS 系统 | 第9-15页 |
| ·副干酪乳杆菌的群体感应系统 | 第15-16页 |
| ·基因敲除技术概述 | 第16-18页 |
| ·乳酸菌遗传转化体系研究进展 | 第18-21页 |
| ·用于转化的乳酸菌种类 | 第18-19页 |
| ·乳酸菌的转化方法 | 第19-20页 |
| ·乳酸菌电转化的影响因素 | 第20-21页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·本研究的主要技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-42页 |
| ·实验材料 | 第23-31页 |
| ·供试菌种和质粒 | 第23-25页 |
| ·扩增引物 | 第25-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·主要分子生物学及生化试剂 | 第27-28页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第28-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-42页 |
| ·pUC18-prcK-550-tet 自杀质粒载体的构建 | 第31-39页 |
| ·副干酪乳杆菌电转化条件的研究 | 第39-42页 |
| 第3章 结果与分析 | 第42-63页 |
| ·PUC18-PRCK-550-TET 自杀质粒载体的构建 | 第42-59页 |
| ·副干酪乳杆菌HD1.7 基因组DNA 的提取 | 第42页 |
| ·prcK 基因片段(prcK-280)的扩增 | 第42-43页 |
| ·重组质粒pMD18-T-prcK-280 的筛选和鉴定 | 第43-46页 |
| ·prcK 基因片段(prcK-480)的扩增 | 第46页 |
| ·重组质粒pMD18-T-prcK-480 的筛选和鉴定 | 第46-48页 |
| ·prcK 基因片段（prcK-550）的扩增 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pMD18-T-prcK-550 的筛选和鉴定 | 第49-51页 |
| ·四环素抗性基因（tet）的扩增 | 第51页 |
| ·重组质粒pMD18-T-tet 的筛选和鉴定 | 第51-54页 |
| ·构建重组质粒pUC18-prcK-550 | 第54-56页 |
| ·构建基因敲除载体pUC18-prcK-550-tet | 第56-59页 |
| ·副干酪乳杆菌电转化条件的研究 | 第59-63页 |
| ·副干酪乳杆菌抗生素筛选浓度的确定 | 第59-60页 |
| ·影响副干酪乳杆菌电转化的因素 | 第60-63页 |
| 第4章 讨论 | 第63-69页 |
| ·克隆PRCK 基因片段（PRCK-550）的引物设计 | 第63-64页 |
| ·PRCK 基因敲除载体的构建 | 第64-65页 |
| ·酶切位点的设计 | 第65-66页 |
| ·副干酪乳杆菌的电转化条件 | 第66-68页 |
| ·工作设想 | 第68-69页 |
| 第5章 结论 | 第69-70页 |
| ·副干酪乳杆菌群体效应组氨酸蛋白激酶基因片段（PRCK-550）的克隆 | 第69页 |
| ·副干酪乳杆菌HD1.7PRCK 基因敲除载体的构建 | 第69页 |
| ·副干酪乳杆菌 HD1.7 电转化条件的初步确立 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
