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n-3PUFA抑制NFκB活化与骨骼肌生长的关系研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略语第14-16页
第一章 文献综述第16-44页
 1 前言第16-17页
 2 促炎细胞因子的主要分类及细胞来源第17-19页
   ·肿瘤坏死因子第17-18页
   ·白细胞介素1第18页
   ·白细胞介素6第18-19页
 3 促炎细胞因子对动物骨骼肌生长的影响第19-20页
 4 促炎细胞因子影响骨骼肌蛋白质分解途径的机制第20-27页
   ·骨骼肌蛋白质的分解代谢第20-23页
   ·MuRF-1和MAFbx基因在骨骼肌蛋白的分解代谢中的作用第23-24页
   ·NF-κB对MuRF1的调控作用第24-25页
   ·促炎细胞因子与NF-κB的活化第25-27页
 5 n-3 PUFA对炎症和免疫功能影响的分子机制第27-39页
   ·n-3PUFA对细胞内脂肪酸代谢产物的影响第27-28页
   ·n-3PUFA对细胞膜磷脂脂肪酸构成的影响第28页
   ·n-3PUFA对酶作用的影响第28-29页
   ·n-3PUFA对细胞膜流动性的作用第29页
   ·n-3PUFA对促炎细胞因子产生的影响第29-32页
   ·n-3PUFA对促炎细胞因子基因表达的影响第32-39页
     ·过氧化物酶体增殖物激活受体第33-36页
     ·核因子κB第36-37页
     ·PPARs/NF-κB信号通路对促炎细胞因子的调控作用第37-39页
 6 亚麻籽日粮对猪组织中n-3PUFA富集量的影响第39-40页
 7 n-3PUFA通过抑制NF-κB的活化影响骨骼肌生长的可能机制第40-43页
 研究目的与意义第43-44页
第二章 猪生长肥育期添加亚麻籽对组织中n-3PUFA富集量和肌肉重的影响第44-57页
 1 前言第44页
 2 材料与方法第44-47页
   ·试验设计与试验日粮第44-46页
   ·试验动物第46页
   ·饲养管理第46页
   ·测定指标及方法第46-47页
     ·胴体和肉质第46页
     ·脂肪酸组成的分析第46-47页
   ·数据处理第47页
 3 试验结果第47-54页
   ·日粮脂肪酸组成第47-48页
   ·添加亚麻籽日粮对生长肥育猪胴体性状、肉质品质的影响第48-49页
   ·添加亚麻籽日粮对生长肥育猪肌肉块重量的影响第49-50页
   ·添加亚麻籽日粮对生长肥育猪脂肪酸组成的影响第50-53页
     ·猪背最长肌脂肪酸组成第50页
     ·猪皮下脂肪脂肪酸组成第50-53页
   ·背最长肌中脂肪酸组成与背最长肌重的关系第53-54页
 4 讨论第54-57页
   ·亚麻籽来源的n-3 PUFA对生长肥育猪脂肪酸组成的影响第54-55页
   ·添加亚麻籽日粮对生长肥育猪肉质品质的影响第55-56页
   ·亚麻籽来源的n-3 PUFA对生长肥育猪肌肉重的影响第56-57页
第三章 猪生长肥育期添加亚麻籽对PPARγ、TNFα基因表达和肌肉块重量的影响第57-69页
 1 前言第57页
 2 材料与方法第57-61页
   ·试验设计与试验日粮第57-58页
   ·试验动物第58页
   ·饲养管理第58页
   ·组织样及血样采集第58页
   ·仪器设备和试剂第58-59页
     ·主要仪器设备第58页
     ·试剂来源第58-59页
     ·试剂配制第59页
   ·测定指标及方法第59-61页
     ·胴体性状第59页
     ·促炎细胞因子基因表达第59-61页
   ·数据处理第61页
 3 结果和分析第61-67页
   ·添加亚麻籽日粮对生长肥育猪肌肉块重量的影响第61页
   ·基因表达第61-64页
     ·日粮中添加亚麻籽对PPARγ表达量的影响第61-63页
     ·日粮中添加亚麻籽对TNFα表达量的影响第63-64页
   ·日粮中添加亚麻籽对血清中TNFα浓度的影响第64-65页
   ·PPARγ和促炎细胞因子表达量的相关分析第65页
   ·PPARγ表达量与血清中促炎细胞因子浓度的相关分析第65页
   ·基因表达和背最长肌肉重的关系第65-67页
 4 讨论第67-69页
第四章 n-3PUFA对C2C12骨骼肌细胞NF-κB活性和MuRF1基因的影响第69-88页
 1 前言第69-70页
 2 材料与方法第70-82页
   ·材料第70页
   ·试剂第70页
   ·主要仪器、设备及器皿第70页
   ·溶液第70-73页
     ·细胞培养用液的配制第70-71页
     ·琼脂糖凝胶电泳缓冲液第71页
     ·抗生素贮存液第71-72页
     ·十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)缓冲液第72页
     ·Western blott缓冲液第72-73页
     ·其它缓冲液第73页
   ·试验用品的清洗与消毒第73-74页
     ·玻璃器皿的清洗和消毒第73页
     ·金属器械的清洗和消毒第73页
     ·橡胶和塑料用品的清洗和消毒第73-74页
   ·细胞的冻存和复苏第74-75页
     ·细胞的冻存第74页
       ·细胞的复苏第74-75页
   ·细胞培养(小鼠C2C12成肌细胞系)第75页
   ·Western blot测定IκBα蛋白表达量第75-77页
     ·单层贴壁细胞总蛋白的提取第75-76页
     ·蛋白质的SDS-PAGE检测第76页
     ·电转第76页
     ·染色第76-77页
     ·封闭第77页
     ·第一抗体和靶蛋白结合第77页
     ·酶标二抗与硝酸纤维素滤膜的温育第77页
     ·加入底物显色第77页
   ·基因表达第77-80页
     ·总RNA的提取第77-78页
     ·总RNA质量检测第78页
     ·总RNA的DNase-Ⅰ处理第78页
     ·总RNA反转录,合成cDNA第一链第78-79页
     ·PPARγ、TNF-α,MuRF1及β-actin基因的定量PCR第79-80页
   ·凝胶阻滞电泳第80-82页
     ·核蛋白的提取第80页
     ·探针的标记与纯化第80-81页
     ·探针的纯化第81页
     ·测定探针的放射活性第81页
     ·凝胶迁移阻滞法测定NF-κB第81-82页
   ·数据处理第82页
 3 结果和分析第82-85页
   ·不同脂肪酸对PPARγ、TNFα和MuRF1基因表达量的影响第82-83页
   ·不同浓度脂肪酸对IκBα蛋白质表达量的影响第83-84页
   ·不同脂肪酸对NF-κB活性的影响第84-85页
 4 讨论第85-88页
第五章 结语第88-93页
 1 结论第88-91页
   ·持续添加亚麻籽日粮对生长肥育猪组织中n-3 PUFA富集量和肌肉块重量的影响第88-89页
   ·持续添加亚麻籽日粮对生长肥育猪组织中PPARγ、TNFα基因表达和肌肉块重量的影响第89-90页
   ·n-3PUFA对C2C12骨骼肌细胞IκBα蛋白和MuRF1基因的影响第90-91页
 2 创新点第91-93页
参考文献第93-113页
附录 在读期间发表的主要研究论文第113-114页
致谢第114页

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