英文缩略表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
·绿盲蝽的研究概况 | 第12-14页 |
·绿盲蝽的生物习性 | 第12-13页 |
·绿盲蝽的为害特点 | 第13页 |
·绿盲蝽的防治 | 第13-14页 |
·昆虫的嗅觉行为 | 第14-16页 |
·昆虫触角感受器的研究 | 第14-15页 |
·绿盲蝽的嗅觉感器研究 | 第15-16页 |
·昆虫嗅觉的化学感受研究 | 第16-18页 |
·气味结合蛋白的一般特征 | 第16-17页 |
·气味结合蛋白的作用及功能 | 第17页 |
·昆虫气味结合蛋白研究进展 | 第17-18页 |
·半翅目昆虫的气味结合蛋白研究进展 | 第18页 |
·研究依据及目的和意义 | 第18-20页 |
2 绿盲蝽气味结合蛋白的克隆及表达 | 第20-36页 |
·材料与方法 | 第20页 |
·实验材料 | 第20页 |
·试剂 | 第20页 |
·仪器 | 第20页 |
·克隆与表达绿盲蝽气味结合蛋白OBP1 | 第20-28页 |
·绿盲蝽气味结合蛋白OBP1的克隆 | 第20-25页 |
·样品的准备 | 第20页 |
·绿盲蝽触角RNA的提取 | 第20-21页 |
·反转录合成第一条cDNA链 | 第21页 |
·PCR扩增目的序列 | 第21-22页 |
·目的片段胶回收 | 第22页 |
·DNA与PGEM-T载体连接 | 第22页 |
·转化连接产物 | 第22-23页 |
·提取质粒 | 第23页 |
·菌液PCR检测OBP1 | 第23页 |
·用BamHI、XhoⅠ酶切OBP1 | 第23-24页 |
·用BamHI、XhoⅠ酶切载体PET-30(a) | 第24页 |
·密码子分析 | 第24页 |
·目的片段OBP1与表达载体PET-30(a)连接 | 第24-25页 |
·将连接后的产物转入到感受态细胞DH5α | 第25页 |
·提取表达质粒 | 第25页 |
·将表达质粒转化到Rosetta(DE3)中 | 第25页 |
·绿盲蝽气味结合蛋白OBP1的表达 | 第25-28页 |
·诱导表达OBP1 | 第25-26页 |
·SDS-PAGE电泳检测OBP1的表达情况 | 第26页 |
·包涵体的处理 | 第26页 |
·纯化蛋白 | 第26-27页 |
·Western blot | 第27页 |
·质谱分析 | 第27页 |
·透析 | 第27-28页 |
·超滤 | 第28页 |
·切除His-tag | 第28页 |
·Bradford法测蛋白浓度 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-36页 |
·绿盲蝽气味结合蛋白OBP1的序列分析 | 第28-30页 |
·绿盲蝽触角RNA | 第30页 |
·绿盲蝽气味结合蛋白OBP1的克隆 | 第30-32页 |
·稀有密码子分析结果 | 第32页 |
·绿盲蝽气味结合蛋白OBP1的表达 | 第32-33页 |
·质谱结果 | 第33-34页 |
·Western blot结果 | 第34-35页 |
·切标签 | 第35页 |
·制作蛋白标准曲线图并测定蛋白的浓度 | 第35-36页 |
3 绿盲蝽气味结合蛋白的结合特性分析 | 第36-41页 |
·材料与方法 | 第36页 |
·实验材料 | 第36页 |
·所需试剂 | 第36页 |
·仪器 | 第36页 |
·实验原理 | 第36页 |
·结合实验具体步骤 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-41页 |
·1-NPN和LlucOBP1的结合常数 | 第37页 |
·50种气味分子与LlucOBP1的结合常数 | 第37-41页 |
4 全文结论 | 第41-42页 |
5 讨论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
攻读硕士期间论文发表情况 | 第52页 |