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黄瓜(Cucumis sativus L.)酸性α-半乳糖苷酶的离体表达与酶学性质研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
引言第12-13页
1 文献综述第13-23页
 第一部分 高等植物中α-半乳糖苷酶的不同形式及其酶学性质第13-17页
   ·高等植物中α-半乳糖苷酶与水苏糖卸出的关系第13-14页
   ·α-半乳糖苷酶在高等植物中的不同形式和分布第14-15页
   ·α-半乳糖苷酶在高等植物中的酶学性质第15-16页
   ·研究展望第16-17页
 第二部分 昆虫杆状病毒表达载体系统及其应用研究进展第17-23页
2 黄瓜酸性α-半乳糖苷酶昆虫杆状病毒表达载体的构建第23-35页
   ·材料、试剂与方法第23-28页
     ·材料第23页
     ·试剂、载体第23页
     ·方法第23-28页
   ·结果与分析第28-35页
     ·黄瓜幼叶总RNA 的提取第28-29页
     ·RT-PCR反应扩增2种黄瓜酸性α-半乳糖苷酶编码区第29页
     ·巢式PCR 验证回收的目的片段第29-30页
     ·重组质粒的酶切验证分析第30-31页
     ·重组质粒的PCR 验证分析第31-32页
     ·序列测定结果与分析第32-35页
3 黄瓜酸性α-半乳糖苷酶的离体表达第35-42页
   ·试剂和技术路线第35-36页
     ·试剂第35页
     ·技术路线第35-36页
   ·实验方法第36-38页
     ·昆虫Sf9 细胞系培养第36页
     ·表达载体的准备第36页
     ·重组质粒的提取第36页
     ·共转染第36-37页
     ·扩增病毒产生高滴度病毒储液第37页
     ·接种病毒,表达重组蛋白第37页
     ·目的蛋白的收获第37-38页
     ·目的蛋白的活性检测第38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·昆虫sf9 细胞系培养第38-39页
     ·表达载体的准备第39页
     ·共转染第39-40页
     ·目的蛋白的表达及活性检测第40-42页
4 黄瓜酸性α-半乳糖苷酶的酶学性质研究第42-50页
   ·试剂和方法第42-43页
     ·试剂第42页
     ·方法第42-43页
   ·结果与分析第43-50页
     ·最佳 pH 的确定第43-45页
     ·最适反应温度的确定第45-46页
     ·Km 值和Vm 值的测定第46-48页
     ·D-半乳糖的抑制作用第48-49页
     ·对棉籽糖和水苏糖的催化活性第49-50页
5 结论与讨论第50-52页
参考文献第52-58页
致谢第58-59页
攻读学位期间发表或待发表的学术论文目录第59-60页

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