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假单胞菌的快速检测及其与表面活性剂的作用机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
第1章 绪论第14-36页
   ·引言第14-15页
   ·整细胞生物催化第15-16页
     ·整细胞生物催化的优点及其应用第15-16页
     ·整细胞生物催化的过程控制第16页
   ·假单胞菌的总体特性及其应用第16-21页
     ·假单胞菌的特性第16-20页
     ·假单胞菌在整细胞生物催化中的应用第20-21页
   ·假单胞菌与表面活性剂的相互作用第21-27页
     ·表面活性剂在整细胞生物催化中的应用第21-22页
     ·人工休止细胞第22-24页
     ·微生物细胞的表征手段第24-27页
       ·常用的表征手段第24页
       ·生物发光和荧光技术第24-27页
   ·饮用水中假单胞菌的检测第27-32页
     ·微生物及混合菌群的分析方法第28-29页
     ·荧光原位杂交技术第29-31页
     ·免疫检测方法第31-32页
   ·论文实验体系及研究框架第32-36页
     ·实验体系第33-34页
       ·饮用水及其过滤器生物膜第33页
       ·季铵盐阳离子表面活性剂与恶臭假单胞菌第33-34页
     ·论文框架和研究内容第34-36页
第2章 饮用水及其过滤器中的细菌检测第36-51页
   ·引言第36-37页
   ·实验部分第37-40页
     ·实验装置第37-38页
     ·水质参数的检测方法第38页
     ·总菌数的平板计数第38-39页
     ·用API 试剂条鉴定菌种第39页
     ·用扫描电镜观察过滤器中的生物膜第39页
     ·细菌的显微镜直接计数第39页
     ·FISH第39-40页
     ·DVC-FISH第40页
     ·过滤器温度对出水中总菌数的影响第40页
   ·结果与讨论第40-50页
     ·过滤器对饮用水的净化作用第40-41页
     ·用扫描电镜观察过滤器中的生物膜第41-43页
     ·API 的鉴定结果第43-46页
     ·用FISH 确认API 的鉴定结果第46-47页
     ·DVC-FISH第47-50页
   ·小结第50-51页
第3章 KINEXA 检测病原菌第51-64页
   ·引言第51-52页
   ·实验部分第52-56页
     ·菌株及其培养条件第52页
     ·抗体和其它试剂第52页
     ·细菌的光学密度检测第52页
     ·细菌的显微镜直接计数第52页
     ·细菌样品的制备第52-53页
     ·KINEXA 的检测第53-55页
       ·PMMA 微米小球的制备第54页
       ·检测的具体参数第54-55页
       ·交叉反应评价第55页
       ·混合菌中的定量检测第55页
     ·ELISA 的检测第55-56页
   ·结果与讨论第56-62页
     ·两株病原菌的KINEXA 免疫检测曲线第56-59页
     ·每个菌体结合抗体量的平均值第59-60页
     ·ELISA 的检测结果第60-61页
     ·抗体对两株病原菌的交叉反应第61-62页
     ·混合菌中的定量检测第62页
   ·小结第62-64页
第4章 DTAB 对恶臭假单胞菌MT-2 整细胞生理特性的影响第64-84页
   ·引言第64-65页
   ·实验部分第65-69页
     ·菌种来源第65页
     ·实验所用的主要试剂第65页
     ·菌体的培养条件第65-66页
     ·细菌的光学密度检测第66页
     ·DTAB 处理细胞的方法第66-67页
     ·用环境扫描电镜观察菌体形态第67页
     ·细菌的显微镜直接计数第67页
     ·细胞耗氧速率的检测第67页
     ·细胞膜电位的测量第67-68页
     ·胞外蛋白量的检测第68页
     ·用原子力显微镜观察细胞表面第68页
     ·细胞可培养能力的测定第68页
     ·处理细胞生存能力的长时间恢复试验第68-69页
   ·结果与讨论第69-83页
     ·DTAB 对细胞形态的影响第69-76页
     ·DTAB 对细胞增殖的影响第76-78页
     ·DTAB 对细胞呼吸活性的影响第78-79页
     ·DTAB 对细胞膜通透性的影响第79-80页
     ·DTAB 对细胞膜电位的影响第80-81页
     ·DTAB 对细胞可培养能力的影响第81-82页
     ·DTAB 处理后细胞生存能力的长时间恢复试验第82-83页
   ·小结第83-84页
第5章 DTAB 对整细胞邻苯二酚2,3-双加氧酶及苯甲酸代谢途径的影响第84-99页
   ·引言第84-85页
   ·实验部分第85-87页
     ·实验所用的主要试剂第85页
     ·苯甲酸培养基及菌体培养条件第85页
     ·细胞悬液的制备第85页
     ·整细胞C230 酶活的测定第85-86页
     ·整细胞C230 的最适温度及温度稳定性第86页
     ·整细胞C230 的最适PH 及PH 稳定性第86页
     ·邻苯二酚的定量第86页
     ·苯甲酸钠的定量第86-87页
     ·DTAB 作用时间对整细胞C230 酶活的影响第87页
     ·DTAB 浓度对整细胞C230 酶活的影响第87页
     ·破碎细胞上清液中C230 酶活受DTAB 浓度的影响第87页
     ·DTAB 对恶臭假单胞菌MT-2 整细胞代谢苯甲酸的影响第87页
   ·结果与讨论第87-98页
     ·BA 培养基的确定及其优化第87-89页
     ·整细胞条件下温度对C230 酶活及其稳定性的影响第89页
     ·整细胞条件下PH 值对C230 酶活及其稳定性的影响第89-90页
     ·DTAB 作用时间对整细胞C230 酶活的影响第90-91页
     ·整细胞或破碎细胞条件下DTAB 浓度对C230 的酶活影响第91-92页
     ·邻苯二酚的定量第92-93页
     ·苯甲酸钠的定量第93-96页
     ·恶臭假单胞菌MT-2 生长过程中苯甲酸及邻苯二酚的含量变化第96页
     ·DTAB 对整细胞代谢苯甲酸的影响第96-98页
   ·小结第98-99页
第6章 用LUX-CFP 表征DTAB 对整细胞及胞内蛋白的影响并构建作用过程模型第99-120页
   ·引言第99-100页
   ·实验部分第100-102页
     ·菌种来源及其构建第100页
     ·PCOMCFP 质粒构建第100-101页
     ·实验所用的主要试剂第101页
     ·菌体的培养条件第101页
     ·DTAB 处理细胞的方法第101页
     ·细菌的显微镜直接计数第101-102页
     ·LUX 发光量的检测第102页
     ·CFP 荧光量的检测第102页
   ·结果与讨论第102-119页
     ·P. PUTIDA BLU-CFP 的生长曲线及其LUX 发光量、CFP 荧光量的变化第102-104页
     ·DTAB 对LUX 的影响第104-112页
       ·检测LUX 发光时培养基的背景值第104-105页
       ·PH、培养基对LUX 的影响第105-108页
       ·LUX 在P. PUTDIA BLU-CFP 的表达位置第108页
       ·DTAB 对LUX 的影响第108-110页
       ·LUX 第二个峰值与细胞代谢活性的关系第110-111页
       ·DTAB 长时间作用细胞时LUX 的发光量变化第111-112页
     ·DTAB 对CFP 的影响第112-116页
       ·胞外CFP 荧光量随DTAB 的变化第112-113页
       ·DTAB 对胞内CFP 荧光量的影响第113-114页
       ·整细胞条件下DTAB 对CFP 荧光量的影响第114-115页
       ·破碎后细胞上清液中CFP 荧光量受DTAB 的影响第115-116页
     ·DTAB 对恶臭假单胞菌整细胞及其胞内蛋白的作用过程模型第116-119页
   ·小结第119-120页
第7章 不同疏水端链长的季铵盐表面活性剂对整细胞及胞内蛋白的影响第120-130页
   ·引言第120-121页
   ·实验部分第121-122页
     ·实验所用的主要试剂第121页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对细胞增殖的影响第121页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对LUX 的影响第121页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对CFP 的影响第121页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对C230 的影响第121-122页
   ·结果与讨论第122-129页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对细胞增长的影响第122-125页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对LUX 的影响第125页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对CFP 的影响第125-127页
     ·不同季铵盐阳离子表面活性剂对C230 的影响第127-129页
   ·小结第129-130页
第8章 结论第130-133页
参考文献第133-144页
致谢第144-145页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第145-146页

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