| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一部分 前言(文献综述猪繁殖与呼吸综合征病毒) | 第12-22页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征病毒的发现与定名 | 第12页 |
| 2 PRRSV的分类地位及分型 | 第12页 |
| 3 PRRSV的理化及生物学特性 | 第12-15页 |
| ·病毒粒子的形态特征 | 第12-13页 |
| ·PRRSV的理化特性 | 第13页 |
| ·PRRSV的敏感细胞与培养特性 | 第13页 |
| ·PRRSV的基因组 | 第13-14页 |
| ·病毒蛋白和功能 | 第14-15页 |
| 4 PRRS的流行病学特点 | 第15页 |
| 5 PRRS的发病机理 | 第15页 |
| 6 诊断方法 | 第15-17页 |
| ·血清学方法 | 第16页 |
| ·病原检测 | 第16-17页 |
| ·病毒分离 | 第16页 |
| ·病毒抗原检测 | 第16-17页 |
| ·病毒核酸检测 | 第17页 |
| 7 防治 | 第17-18页 |
| ·免疫预防(疫苗) | 第17-18页 |
| ·治疗 | 第18页 |
| 8 PRRSV单克隆抗体研究进展 | 第18-21页 |
| ·单克隆抗体技术概述 | 第18-19页 |
| ·单克隆抗体的优点 | 第18页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第18-19页 |
| ·PRRSV单克隆抗体研究进展 | 第19-21页 |
| ·抗N蛋白单抗 | 第19-20页 |
| ·抗M蛋白的单抗 | 第20页 |
| ·抗GP5蛋白的单抗 | 第20页 |
| ·抗GP4蛋白的单抗 | 第20页 |
| ·抗GP3的单抗 | 第20页 |
| ·其他蛋白的单抗 | 第20-21页 |
| 9 研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 第二部分 猪繁殖与呼吸综合征病毒福建株的分离和初步鉴定 | 第22-28页 |
| 材料与方法 | 第22-24页 |
| 1 材料 | 第22页 |
| ·病料来源 | 第22页 |
| ·病毒、细胞、抗体 | 第22页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-24页 |
| ·细胞培养 | 第22-23页 |
| ·病毒分离 | 第23页 |
| ·病毒鉴定 | 第23-24页 |
| 结果与分析 | 第24-26页 |
| 1 病毒分离 | 第24-25页 |
| 2 病毒TCID_(50)的测定 | 第25页 |
| 3 分离毒对细胞的致病性 | 第25页 |
| 4 中和实验结果 | 第25页 |
| 5 间接免疫荧光实验 | 第25页 |
| 6 RT-PCR结果 | 第25-26页 |
| 讨论 | 第26-28页 |
| 第三部分 PRRSV单克隆抗体的制备和初步应用 | 第28-45页 |
| 1 材料 | 第28-32页 |
| ·病毒、细胞和实验动物 | 第28页 |
| ·试剂与培养基 | 第28页 |
| ·主要溶液、试剂的配制 | 第28-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-38页 |
| ·病毒增殖与纯化 | 第32页 |
| ·PRRSV感染细胞的制备及免疫荧光试验(IFA) | 第32-33页 |
| ·间接ELISA工作流程 | 第33页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第33-35页 |
| ·单抗特性分析 | 第35-36页 |
| ·免疫印迹实验 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE | 第36页 |
| ·Western-blot | 第36页 |
| ·单抗的异硫氰酸荧光素(FITC)标记 | 第36-38页 |
| 结果与分析 | 第38-43页 |
| 1 ELISA筛选方法的建立 | 第38页 |
| 2 杂交瘤细胞株的建立 | 第38-39页 |
| 3 单克隆抗体特性分析 | 第39-42页 |
| ·单抗的Ig亚类 | 第39页 |
| ·单抗的中和活性 | 第39页 |
| ·单抗ELISA和IFA效价 | 第39-40页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第40页 |
| ·抗体识别表位分析 | 第40-41页 |
| ·免疫印迹试验 | 第41-42页 |
| 4 荧光单抗的制备及特性测定 | 第42-43页 |
| ·荧光单抗的制备 | 第42页 |
| ·荧光抗体的特异性测定 | 第42页 |
| ·荧光抗体效价测定 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 1 关于单抗的生物学特性 | 第43页 |
| 2 关于病毒的纯化 | 第43页 |
| 3 Western-blot分析 | 第43页 |
| 4 单抗的荧光标记 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52页 |