利用微生物生产胆固醇氧化酶的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| ·胆固醇与人体健康 | 第10-12页 |
| ·胆固醇氧化酶的研究进展 | 第12-17页 |
| ·胆固醇氧化酶的分类 | 第12-13页 |
| ·胆固醇氧化酶降解胆固醇的机理 | 第13页 |
| ·研究现状 | 第13-15页 |
| ·胆固醇氧化酶的应用 | 第15-17页 |
| ·本论文研究的内容 | 第17-18页 |
| 第二章 胆固醇氧化酶高产菌株的选育 | 第18-25页 |
| ·材料与方法 | 第18-21页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-25页 |
| ·选育谱系 | 第21页 |
| ·紫外+LiCl复合诱变致死率曲线 | 第21-22页 |
| ·紫外+LiCl复合诱变试验结果 | 第22页 |
| ·紫外+光敏试剂复合诱变致死率曲线 | 第22-23页 |
| ·紫外+光敏试剂复合诱变结果 | 第23页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第23-24页 |
| ·细胞形态及菌落形态观察 | 第24-25页 |
| 第三章 胆固醇氧化酶发酵工艺条件优化 | 第25-39页 |
| ·材料与方法 | 第25-29页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-39页 |
| ·不同碳源对产酶的影响 | 第29-30页 |
| ·不同氮源对产酶的影响 | 第30页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第30-31页 |
| ·PH值对产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·摇床转速对产酶影响 | 第32-33页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·土豆汁含量对产酶的影响 | 第34页 |
| ·不同装液量对产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·不同接种量对产酶的影响 | 第35-36页 |
| ·发酵培养基的正交试验优化 | 第36-39页 |
| 第四章 酶的分离纯化及部分性质鉴定 | 第39-48页 |
| ·材料与方法 | 第39-42页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·纯化方法 | 第40-42页 |
| ·酶理化性质的鉴定 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE测定蛋白质亚基分子量 | 第42页 |
| ·胆固醇氧化酶的米氏常数Km测定 | 第42页 |
| ·胆固醇氧化酶水解产物分析 | 第42-43页 |
| ·结果讨论 | 第43-48页 |
| ·DEAE离子交换层析结果 | 第43-44页 |
| ·SephadexG—75凝胶层析结果 | 第44-45页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE测定蛋白质亚基分子量 | 第46页 |
| ·胆固醇氧化酶的米氏常数Km测定 | 第46-47页 |
| ·胆固醇氧化酶水解产物分析 | 第47-48页 |
| 第五章 胆固醇氧化酶的固定化 | 第48-60页 |
| ·材料与设备 | 第48页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·固定化材料的选择 | 第48-50页 |
| ·聚乙烯醇最佳包埋条件的研究 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-60页 |
| ·最佳载体的选择 | 第51-52页 |
| ·聚乙烯醇浓度的确定 | 第52-53页 |
| ·硼酸浓度的确定 | 第53页 |
| ·固定化酶的最适反应温度 | 第53-54页 |
| ·固定化酶的热稳定性 | 第54-55页 |
| ·固定化酶的最适pH值 | 第55页 |
| ·固定化酶的pH值稳定性 | 第55-56页 |
| ·米氏常数的测定 | 第56-57页 |
| ·固定化酶的操作稳定性 | 第57页 |
| ·固定化酶的电镜图(SEM) | 第57-59页 |
| ·固定化酶降解牛奶中胆固醇 | 第59-60页 |
| 第六章 总结与展望 | 第60-62页 |
| ·总结 | 第60-61页 |
| ·展望 | 第61-62页 |
| 附录1 Braford检测法测定蛋白质浓度 | 第62-63页 |
| 附录2 SDS-PAGE凝胶电泳方法 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
