中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
1 前言 | 第6-30页 |
·人表皮生长因子(hEGF)及其受体研究进展 | 第6-19页 |
·毕赤氏酵母P.pastoris表达系统研究进展 | 第19-29页 |
·实验技术路线 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-43页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-43页 |
3 结果与分析 | 第43-49页 |
·套叠PCR连接hegf基因片段 | 第43页 |
·克隆载体的构建及鉴定 | 第43-44页 |
·表达载体的构建及鉴定 | 第44-45页 |
·重组质粒线性化结果 | 第45页 |
·酵母的转化和重组酵母的PCR鉴定 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE电泳检测和筛选 | 第46-47页 |
·Western blot 分析 | 第47页 |
·阳离子交换柱层析 | 第47-48页 |
·生物活性检测 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-54页 |
·hEGF的应用前景 | 第49页 |
·利用套叠PCR合成基因 | 第49-50页 |
·利用同裂酶技术构建多拷贝表达载体 | 第50-51页 |
·选择合适的表达系统 | 第51-52页 |
·转化的影响 | 第52页 |
·关于小分子多肽的SDS-PAGE电泳及其染色方法 | 第52-53页 |
·本研究今后的主要研究任务 | 第53-54页 |
5、结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附图 | 第61-68页 |
致谢 | 第68页 |