提要 | 第1-7页 |
英文缩写词表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一篇 文献回顾 | 第11-27页 |
第一章 抗菌肽国内外研究进展 | 第11-15页 |
一、概述 | 第11-13页 |
二、抗菌肽的分类 | 第13页 |
三、抗菌肽的主要生物学活性 | 第13-15页 |
第二章 HCAP-18/LL-37 国内外研究进展 | 第15-27页 |
一、Cathelicidins家族 | 第15-18页 |
二、hCAP-18/LL-37 的发现和基因结构 | 第18-19页 |
三、hCAP-18/LL-37 的生物合成和组织表达 | 第19-21页 |
四、hCAP-18/LL-37 与天然免疫的关系 | 第21-24页 |
五、hCAP-18/LL-37 与获得性免疫的关系 | 第24-25页 |
六、hCAP-18/LL-37 的其它生物学活性 | 第25-26页 |
七、本课题研究思路 | 第26-27页 |
第二篇 实验研究 | 第27-86页 |
第一章 HCAP-18/LL-37 基因克隆、真核表达载体构建与表达 | 第27-65页 |
第一节 材料与方法 | 第27-46页 |
一、菌株、质粒及细胞株 | 第27页 |
二、主要试剂及工具酶 | 第27-28页 |
三、主要仪器 | 第28-29页 |
四、主要方法 | 第29-46页 |
(一) 试剂配制 | 第29-32页 |
(二) 实验方法 | 第32-46页 |
1. hCAP-18/LL-37 基因在不同细胞中表达情况的检测 | 第32-35页 |
2. hCAP-18/LL-37 的基因克隆 | 第35-36页 |
3. hCAP-18/LL-37 基因重组真核表达载体的构建 | 第36-40页 |
4. hCAP-18/LL-37 基因重组真核表达载体的转染及表达检测 | 第40-44页 |
5. 稳定转染hCAP-18/LL-37 基因的Hela细胞系的建立 | 第44-46页 |
第二节 结果 | 第46-61页 |
一、hCAP-18/LL-37 基因表达检测 | 第46-47页 |
二、hCAP-18/LL-37 基因克隆 | 第47-48页 |
三、hCAP-18/LL-37 基因TA克隆重组子的鉴定 | 第48-49页 |
四、hCAP-18/LL-37 真核表达重组质粒的酶切鉴定 | 第49-50页 |
五、序列分析 | 第50-53页 |
六、hCAP-18/LL-37 重组质粒测序结果图谱 | 第53-54页 |
七、RT-PCR检测瞬时转染Hela细胞及HEK293 细胞中的表达 | 第54-55页 |
八、Western blot鉴定瞬时转染Hela及HEK293 细胞中的表达 | 第55-56页 |
九、Western blot鉴定瞬时转染Hela及HEK293 培养上清中的表达 | 第56-57页 |
十、稳定转染Hela细胞筛选单克隆照片 | 第57-58页 |
十一、RT-PCR检测稳定转染Hela细胞株中的表达 | 第58-59页 |
十二、Western blot 鉴定稳定转染Hela细胞中的表达 | 第59-60页 |
十三、Western blot 鉴定稳定转染Hela细胞培养上清中的表达 | 第60-61页 |
第三节 讨论 | 第61-65页 |
第二章 HCAP-18/LL-37 对树突状细胞分化成熟的影响 | 第65-86页 |
第一节 材料与方法 | 第65-70页 |
一、主要试剂 | 第65页 |
二、主要仪器 | 第65-66页 |
三、主要方法 | 第66-70页 |
(一) 试剂配制 | 第66页 |
(二) 实验方法 | 第66-70页 |
1. 树突状细胞的分离培养 | 第66-67页 |
2. 流式细胞仪检测DC细胞表面标志物 | 第67-68页 |
3. 流式细胞仪检测DC细胞周期与凋亡 | 第68页 |
4. 同种混合淋巴细胞反应(MLR) | 第68页 |
5. hCAP-18/LL-37 刺激人外周血淋巴细胞增殖转化的能力 | 第68-69页 |
6. 统计学分析 | 第69-70页 |
第二节 结果 | 第70-83页 |
一、DC的形态学观察 | 第70-72页 |
二、流式细胞仪DC细胞表面标志物的检测 | 第72-77页 |
三、流式细胞仪DC细胞周期与凋亡的检测 | 第77-80页 |
四、同种混合淋巴细胞反应(MLR) | 第80-81页 |
五、hCAP-18/LL-37 刺激人外周血淋巴细胞增殖转化的能力 | 第81-83页 |
第三节 讨论 | 第83-86页 |
结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-95页 |
攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第95-96页 |
中文摘要 | 第96-102页 |
Abstract | 第102-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
个人简历 | 第110页 |