中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
英文缩写说明 | 第13-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-30页 |
(一) 小麦铝诱导基因(Wali)的研究进展 | 第14-20页 |
1 Wali 的分类及其结构特点 | 第14-18页 |
·wali1 编码的类金属硫蛋白 | 第14-15页 |
·富含半胱氨酸的wali2 基因 | 第15-16页 |
·蛋白酶抑制剂基因wali3,wali5 和wali6 | 第16-17页 |
·苯丙氨酸解氨酶基因wali4 | 第17页 |
·未知功能蛋白Wali7 | 第17-18页 |
2 Wali 的生物学功能 | 第18-20页 |
·清除自由基 | 第18-19页 |
·抑制蛋白质分解 | 第19-20页 |
·抗害虫和病原体的侵染 | 第20页 |
(二) 植物蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的研究进展 | 第20-28页 |
1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶分类及其结构特点 | 第21-24页 |
·钙依赖蛋白激酶(CDPK)亚家族 | 第21页 |
·SNF1 相关蛋白激酶(SnRK)亚家族 | 第21-22页 |
·类受体激酶(RLKs)亚家族 | 第22-23页 |
·MAPK,MAPKK 和MAPKKK 亚家族 | 第23页 |
·细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)家族 | 第23页 |
·酪蛋白激酶Ⅰ(CK1)和酪蛋白激酶Ⅱ(CK2)亚家族 | 第23-24页 |
·GSK3/SHAGGY 亚家族 | 第24页 |
·其他亚家族 | 第24页 |
2 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的生物学功能 | 第24-28页 |
·参与信号传导 | 第24-25页 |
·参与细胞周期进程 | 第25-26页 |
·参与胁迫应答反应 | 第26页 |
·调节生长发育 | 第26-28页 |
(三) 实验目的和意义 | 第28-30页 |
第二部分 实验论文 | 第30-69页 |
一、实验材料和实验方法 | 第30-50页 |
1 实验材料 | 第30-36页 |
·植物材料 | 第30页 |
·菌株和质粒 | 第30-31页 |
·酶、试剂和培养基 | 第31-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·引物序列 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-50页 |
·基本分子生物学实验 | 第36-38页 |
·质粒的提取(Trans:EasyPure Plasmid MiniPrep kit) | 第36-37页 |
·从胶中回收目的片段(TIANgel Midi Purification kit) | 第37-38页 |
·连接反应 | 第38页 |
·大肠杆菌DH5α转化 | 第38页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因的cDNA 克隆及序列分析 | 第38-40页 |
·Trizol 法提取山融3 号小麦RNA | 第38-39页 |
·TaUES 基因的cDNA 克隆 | 第39-40页 |
·TaSTK 基因的cDNA 克隆 | 第40页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因序列分析 | 第40页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因的基因组克隆 | 第40-41页 |
·TaUES 基因的基因组克隆 | 第40-41页 |
·TaSTK 的基因组克隆 | 第41页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析 | 第41-43页 |
·总RNA 的提取及cDNA 的获得 | 第41页 |
·扩增条件和循环数的摸索 | 第41-42页 |
·内参的扩增 | 第42页 |
·TaUES 基因的扩增 | 第42-43页 |
·TaSTK 基因的扩增 | 第43页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因亚细胞定位分析 | 第43-46页 |
·TaUES 基因和TaSTK 亚细胞定位载体的构建 | 第43-44页 |
·洋葱表皮基因枪瞬时转化 | 第44-45页 |
·共聚焦显微镜观察 | 第45-46页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因功能分析 | 第46-50页 |
·TaUES 基因和TaSTK 基因过量表达载体的构建 | 第46页 |
·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第46-47页 |
·农杆菌菌液PCR 鉴定阳性克隆 | 第47-48页 |
·农杆菌介导的烟草转化及转基因植株的检测 | 第48-50页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第50页 |
二、结果与分析 | 第50-67页 |
1 TaUES 基因和TaSTK 基因的cDNA 克隆及初步序列分析 | 第50-52页 |
·TaUES 基因的cDNA 克隆及初步序列分析 | 第50-51页 |
·TaUES 基因的cDNA 克隆 | 第50-51页 |
·TaUES 基因的初步序列分析 | 第51页 |
·TaSTK 基因的cDNA 克隆及序列分析 | 第51-52页 |
·TaSTK 基因的cDNA 克隆 | 第51-52页 |
·TaSTK 基因的初步序列分析 | 第52页 |
2 TaUES 基因和TaSTK 基因的基因组克隆 | 第52-54页 |
·TaUES 基因的基因组克隆 | 第52-53页 |
·TaSTK 基因的基因组克隆 | 第53-54页 |
3 TaUES 基因和TaSTK 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析 | 第54-56页 |
·TaUES 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析 | 第54-55页 |
·TaSTK 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析 | 第55-56页 |
4 TaUES 基因和TaSTK 基因亚细胞定位 | 第56-61页 |
·TaUES 基因亚细胞定位 | 第56-59页 |
·构建TaUES 基因亚细胞定位载体 | 第56-57页 |
·酶切验证TaUES 基因亚细胞定位载体 | 第57-58页 |
·洋葱表皮中瞬时表达TaUES 基因亚细胞定位载体 | 第58-59页 |
·TaSTK 基因亚细胞定位 | 第59-61页 |
·构建TaSTK 基因亚细胞定位载体 | 第59-60页 |
·TaSTK 基因亚细胞定位载体酶切验证 | 第60-61页 |
5 TaUES 基因和TaSTK 基因功能分析 | 第61-67页 |
·TaUES 基因功能分析 | 第61-64页 |
·TaUES 基因过量表达载体的构建及验证 | 第61-62页 |
·农杆菌菌落PCR | 第62-63页 |
·农杆菌介导的烟草转化 | 第63-64页 |
·转基因烟草的PCR 检测 | 第64页 |
·TaSTK 基因功能分析 | 第64-67页 |
·TaSTK 基因过量表达载体的构建及验证 | 第64-65页 |
·农杆菌菌落PCR | 第65-66页 |
·农杆菌介导的烟草转化 | 第66页 |
·转基因烟草的PCR 分析 | 第66-67页 |
三、小结与讨论 | 第67-69页 |
参考文献(REFERENCES) | 第69-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
硕士期间发表的论文 | 第78页 |