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小麦耐逆基因TaUES和TaSTK的克隆与表达分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
英文缩写说明第13-14页
第一部分 文献综述第14-30页
 (一) 小麦铝诱导基因(Wali)的研究进展第14-20页
  1 Wali 的分类及其结构特点第14-18页
   ·wali1 编码的类金属硫蛋白第14-15页
   ·富含半胱氨酸的wali2 基因第15-16页
   ·蛋白酶抑制剂基因wali3,wali5 和wali6第16-17页
   ·苯丙氨酸解氨酶基因wali4第17页
   ·未知功能蛋白Wali7第17-18页
  2 Wali 的生物学功能第18-20页
   ·清除自由基第18-19页
   ·抑制蛋白质分解第19-20页
   ·抗害虫和病原体的侵染第20页
 (二) 植物蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的研究进展第20-28页
  1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶分类及其结构特点第21-24页
   ·钙依赖蛋白激酶(CDPK)亚家族第21页
   ·SNF1 相关蛋白激酶(SnRK)亚家族第21-22页
   ·类受体激酶(RLKs)亚家族第22-23页
   ·MAPK,MAPKK 和MAPKKK 亚家族第23页
   ·细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)家族第23页
   ·酪蛋白激酶Ⅰ(CK1)和酪蛋白激酶Ⅱ(CK2)亚家族第23-24页
   ·GSK3/SHAGGY 亚家族第24页
   ·其他亚家族第24页
  2 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的生物学功能第24-28页
   ·参与信号传导第24-25页
   ·参与细胞周期进程第25-26页
   ·参与胁迫应答反应第26页
   ·调节生长发育第26-28页
 (三) 实验目的和意义第28-30页
第二部分 实验论文第30-69页
 一、实验材料和实验方法第30-50页
  1 实验材料第30-36页
   ·植物材料第30页
   ·菌株和质粒第30-31页
   ·酶、试剂和培养基第31-35页
   ·主要仪器设备第35页
   ·引物序列第35-36页
  2 实验方法第36-50页
   ·基本分子生物学实验第36-38页
     ·质粒的提取(Trans:EasyPure Plasmid MiniPrep kit)第36-37页
     ·从胶中回收目的片段(TIANgel Midi Purification kit)第37-38页
     ·连接反应第38页
     ·大肠杆菌DH5α转化第38页
   ·TaUES 基因和TaSTK 基因的cDNA 克隆及序列分析第38-40页
     ·Trizol 法提取山融3 号小麦RNA第38-39页
     ·TaUES 基因的cDNA 克隆第39-40页
     ·TaSTK 基因的cDNA 克隆第40页
     ·TaUES 基因和TaSTK 基因序列分析第40页
   ·TaUES 基因和TaSTK 基因的基因组克隆第40-41页
     ·TaUES 基因的基因组克隆第40-41页
     ·TaSTK 的基因组克隆第41页
   ·TaUES 基因和TaSTK 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析第41-43页
     ·总RNA 的提取及cDNA 的获得第41页
     ·扩增条件和循环数的摸索第41-42页
     ·内参的扩增第42页
     ·TaUES 基因的扩增第42-43页
     ·TaSTK 基因的扩增第43页
   ·TaUES 基因和TaSTK 基因亚细胞定位分析第43-46页
     ·TaUES 基因和TaSTK 亚细胞定位载体的构建第43-44页
     ·洋葱表皮基因枪瞬时转化第44-45页
     ·共聚焦显微镜观察第45-46页
   ·TaUES 基因和TaSTK 基因功能分析第46-50页
     ·TaUES 基因和TaSTK 基因过量表达载体的构建第46页
     ·农杆菌感受态细胞的制备与转化第46-47页
     ·农杆菌菌液PCR 鉴定阳性克隆第47-48页
     ·农杆菌介导的烟草转化及转基因植株的检测第48-50页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第50页
 二、结果与分析第50-67页
  1 TaUES 基因和TaSTK 基因的cDNA 克隆及初步序列分析第50-52页
   ·TaUES 基因的cDNA 克隆及初步序列分析第50-51页
     ·TaUES 基因的cDNA 克隆第50-51页
     ·TaUES 基因的初步序列分析第51页
   ·TaSTK 基因的cDNA 克隆及序列分析第51-52页
     ·TaSTK 基因的cDNA 克隆第51-52页
     ·TaSTK 基因的初步序列分析第52页
  2 TaUES 基因和TaSTK 基因的基因组克隆第52-54页
   ·TaUES 基因的基因组克隆第52-53页
   ·TaSTK 基因的基因组克隆第53-54页
  3 TaUES 基因和TaSTK 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析第54-56页
   ·TaUES 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析第54-55页
   ·TaSTK 基因在干旱和盐胁迫下的表达分析第55-56页
  4 TaUES 基因和TaSTK 基因亚细胞定位第56-61页
   ·TaUES 基因亚细胞定位第56-59页
     ·构建TaUES 基因亚细胞定位载体第56-57页
     ·酶切验证TaUES 基因亚细胞定位载体第57-58页
     ·洋葱表皮中瞬时表达TaUES 基因亚细胞定位载体第58-59页
   ·TaSTK 基因亚细胞定位第59-61页
     ·构建TaSTK 基因亚细胞定位载体第59-60页
     ·TaSTK 基因亚细胞定位载体酶切验证第60-61页
  5 TaUES 基因和TaSTK 基因功能分析第61-67页
   ·TaUES 基因功能分析第61-64页
     ·TaUES 基因过量表达载体的构建及验证第61-62页
     ·农杆菌菌落PCR第62-63页
     ·农杆菌介导的烟草转化第63-64页
     ·转基因烟草的PCR 检测第64页
   ·TaSTK 基因功能分析第64-67页
     ·TaSTK 基因过量表达载体的构建及验证第64-65页
     ·农杆菌菌落PCR第65-66页
     ·农杆菌介导的烟草转化第66页
     ·转基因烟草的PCR 分析第66-67页
 三、小结与讨论第67-69页
参考文献(REFERENCES)第69-77页
致谢第77-78页
硕士期间发表的论文第78页

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