| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-24页 |
| 1 脊髓灰质炎病毒及其复制机理模式及复制相关蛋白的研究 | 第9-15页 |
| ·脊髓灰质炎病毒简介 | 第9-10页 |
| ·脊髓灰质炎病毒的复制模式 | 第10-11页 |
| ·病毒复制复合体与病毒复制相关蛋白的研究 | 第11-15页 |
| ·病毒复制复合体的形成 | 第12页 |
| ·病毒复制相关蛋白的研究 | 第12-15页 |
| ·病毒基因组P3区域的重要蛋白性质 | 第13-15页 |
| 2 蛋白质相互作用研究进展 | 第15-23页 |
| ·酵母和细菌双杂交系统 | 第15-16页 |
| ·免疫共沉淀分析技术 | 第16-17页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第17-18页 |
| ·串联亲和纯化 | 第18页 |
| ·质谱技术 | 第18-19页 |
| ·蛋白质芯片技术 | 第19页 |
| ·表面等离子共振技术 | 第19-20页 |
| ·基于生物信息学的分析法 | 第20-21页 |
| ·FRET方法 | 第21-23页 |
| 3 本研究的主要目的及研究内容 | 第23-24页 |
| 第2章 活细胞内脊髓灰质炎病毒复制复合体蛋白相互作用研究 | 第24-47页 |
| 1 材料 | 第25-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第25-26页 |
| ·病毒株和细胞株 | 第26页 |
| ·主要试剂及来源 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·培养液及配方 | 第27页 |
| ·主要溶液与缓冲液 | 第27-28页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第27页 |
| ·蛋白质纯化所用缓冲液 | 第27页 |
| ·Tricine-SDS PAGE电泳所用溶液 | 第27-28页 |
| ·Western blot所用溶液 | 第28页 |
| ·细胞培养所用溶液 | 第28页 |
| ·分子量标准 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-34页 |
| ·细胞培养和病毒的增殖 | 第29页 |
| ·病毒浓缩和RNA的提取 | 第29页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第29页 |
| ·质粒和克隆 | 第29-32页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR反应体系 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白质粒构建示意图 | 第31-32页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第32页 |
| ·重组质粒的筛选、验证 | 第32-33页 |
| ·Western blot检测流程 | 第33页 |
| ·活细胞成像及FRET分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·3AB、VPg、3D和ECFP、EYFP基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的验证 | 第35-38页 |
| ·3AB和VPg在活细胞内的相互作用成像 | 第38-39页 |
| ·VPg和3D在活细胞内的相互作用成像 | 第39-40页 |
| ·3AB和3D在活细胞内的相互作用成像 | 第40-41页 |
| ·病毒侵染对3AB-3D,3D-Vpg和3AB-VPg三组蛋白相互作用的影响 | 第41-43页 |
| ·对照样品的FRET分析 | 第43-46页 |
| ·阳性对照的FRET分析 | 第43-44页 |
| ·阴性对照的FRET分析 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 第3章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 发表和待发表的文章 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
