中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
第1章 引文和文献综述 | 第11-29页 |
·心脏早期发育研究简述 | 第11-14页 |
·心脏发育与转录因子 | 第14-19页 |
·GATA | 第15页 |
·Nkx2.5 | 第15-16页 |
·MEF-2家族 | 第16-17页 |
·HAND家族 | 第17页 |
·BMP家族 | 第17-19页 |
·本实验相关基因的介绍 | 第19-23页 |
·PYGO1基因 | 第19-21页 |
·MYL2基因家族 | 第21-22页 |
·ANKRD1基因家族 | 第22-23页 |
·酵母双杂交技术 | 第23-27页 |
·本文的研究意义 | 第27-29页 |
第2章 材料和方法 | 第29-47页 |
·材料 | 第29-33页 |
·方法 | 第33-47页 |
·总RNA的抽提 | 第33-34页 |
·人类胚胎心脏PCR cDNA文库的构建 | 第34页 |
·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框 | 第34-36页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第36-37页 |
·PCR产物与T-载体的连接 | 第37页 |
·转化(热休克法) | 第37-38页 |
·质粒的小量制备 | 第38-39页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第39页 |
·测序 | 第39页 |
·PYGO1基因重组载体的构建 | 第39-40页 |
·酵母双杂交技术 | 第40-41页 |
·常规细胞培养及转染 | 第41-42页 |
·基因的转录活性分析 | 第42-43页 |
·哺乳动物细胞双杂交技术 | 第43-44页 |
·亚细胞共定位观察 | 第44页 |
·免疫共沉淀 | 第44-47页 |
第3章 人类基因PYGO1的克隆、序列分析及其功能研究 | 第47-65页 |
·PYGO1基因ORF的克隆和序列分析 | 第47-50页 |
·PYGO1基因ORF的表达载体的构建 | 第50-55页 |
·PYGO1基因的转录活性分析 | 第55-57页 |
·酵母双杂交 | 第57-59页 |
·PYGO1蛋白与MYL2蛋白的相互作用研究 | 第59-62页 |
·PYGO1蛋白与MYL2蛋白哺乳动物细胞双杂交分析 | 第59-60页 |
·PYGO1蛋白与MYL2蛋白亚细胞共定位分析 | 第60-61页 |
·PYGO1蛋白与MYL2蛋白免疫共沉淀分析 | 第61-62页 |
·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白的相互作用研究 | 第62-65页 |
·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白哺乳动物细胞双杂交分析 | 第62-63页 |
·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白亚细胞共定位分析 | 第63-64页 |
·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白免疫共沉淀分析 | 第64-65页 |
总结 | 第65-66页 |
讨论 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
发表论文 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-81页 |