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人类心脏发育候选基因PYGO1的克隆与功能研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
第1章 引文和文献综述第11-29页
   ·心脏早期发育研究简述第11-14页
   ·心脏发育与转录因子第14-19页
     ·GATA第15页
     ·Nkx2.5第15-16页
     ·MEF-2家族第16-17页
     ·HAND家族第17页
     ·BMP家族第17-19页
   ·本实验相关基因的介绍第19-23页
     ·PYGO1基因第19-21页
     ·MYL2基因家族第21-22页
     ·ANKRD1基因家族第22-23页
   ·酵母双杂交技术第23-27页
   ·本文的研究意义第27-29页
第2章 材料和方法第29-47页
   ·材料第29-33页
   ·方法第33-47页
     ·总RNA的抽提第33-34页
     ·人类胚胎心脏PCR cDNA文库的构建第34页
     ·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框第34-36页
     ·PCR产物的纯化回收第36-37页
     ·PCR产物与T-载体的连接第37页
     ·转化(热休克法)第37-38页
     ·质粒的小量制备第38-39页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第39页
     ·测序第39页
     ·PYGO1基因重组载体的构建第39-40页
     ·酵母双杂交技术第40-41页
     ·常规细胞培养及转染第41-42页
     ·基因的转录活性分析第42-43页
     ·哺乳动物细胞双杂交技术第43-44页
     ·亚细胞共定位观察第44页
     ·免疫共沉淀第44-47页
第3章 人类基因PYGO1的克隆、序列分析及其功能研究第47-65页
   ·PYGO1基因ORF的克隆和序列分析第47-50页
   ·PYGO1基因ORF的表达载体的构建第50-55页
   ·PYGO1基因的转录活性分析第55-57页
   ·酵母双杂交第57-59页
   ·PYGO1蛋白与MYL2蛋白的相互作用研究第59-62页
     ·PYGO1蛋白与MYL2蛋白哺乳动物细胞双杂交分析第59-60页
     ·PYGO1蛋白与MYL2蛋白亚细胞共定位分析第60-61页
     ·PYGO1蛋白与MYL2蛋白免疫共沉淀分析第61-62页
   ·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白的相互作用研究第62-65页
     ·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白哺乳动物细胞双杂交分析第62-63页
     ·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白亚细胞共定位分析第63-64页
     ·PYGO1蛋白与ANKRD1蛋白免疫共沉淀分析第64-65页
总结第65-66页
讨论第66-69页
参考文献第69-77页
发表论文第77-79页
致谢第79-81页

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