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山东省禽源大肠杆菌氨基糖苷类药物耐药性检测及耐药质粒分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
1 前言第12-30页
 1 大肠杆菌病原特性第12-15页
   ·大肠杆菌的抗原特性第12-13页
   ·禽大肠杆菌的致病性第13-15页
 2 细菌的耐药性第15-30页
   ·氨基糖苷类药物的作用机制第15-16页
   ·细菌对氨基糖苷类的耐药机理第16-19页
     ·氨基糖苷类修饰酶第16-19页
     ·细胞膜通透性的改变第19页
     ·主动外排机制第19页
   ·由质粒介导的耐药性第19-30页
     ·16S rRNA 甲基化酶的发现第19-20页
     ·16S rRNA 甲基化酶的分布第20-21页
     ·16S rRNA 甲基化酶的亲缘关系第21-22页
     ·16S rRNA 甲基化酶的作用及转移机制第22-23页
     ·质粒介导的产超广谱β-内酰胺酶第23-30页
2 材料及方法第30-42页
   ·大肠杆菌氨基糖苷类耐药表型及基因型分析第30-34页
     ·试验菌株和药敏质控菌株第30页
     ·供试药物及培养基第30页
     ·分子生物学试剂第30页
     ·电泳缓冲液第30页
     ·琼脂糖凝胶的配制第30页
     ·实验仪器设备第30页
     ·普通药敏纸片试验第30-31页
     ·体外最低抑菌浓度(MIC)测定第31页
     ·引物的设计及合成第31-32页
     ·三重PCR 检测氨基糖苷类钝化酶基因第32-33页
     ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳第33页
     ·PCR 检测16S 甲基化酶基因第33页
     ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳第33-34页
   ·氨基糖苷类耐药质粒的鉴定及其携带率的检测第34-37页
     ·试验菌株与受体菌第34页
     ·供试药物及培养基第34页
     ·耐药质粒提取第34-35页
     ·耐药质粒的转化第35-36页
     ·耐药质粒的鉴定第36页
     ·质粒的测序分析第36页
     ·引物的设计及合成第36-37页
     ·三重PCR 扩增体系的建立及条件的优化第37页
     ·检测pXZ 携带率第37页
     ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳第37页
   ·CTX-M-9 组编码基因DNA 序列测定与及基因型的确定第37-42页
     ·供试菌株第37页
     ·分子生物学试剂第37页
     ·实验仪器设备第37-38页
     ·引物的设计和合成第38页
     ·PCR 反应第38页
     ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳第38-39页
     ·PCR 产物的回收第39-40页
     ·回收目的片段的连接及转化第40-41页
     ·重组质粒DNA 的提取第41-42页
     ·重组质粒的酶切鉴定第42页
     ·阳性克隆序列测定及基因型分型第42页
3 结果第42-54页
   ·大肠杆菌氨基糖苷类耐药表型及基因型分析第42-47页
     ·普通药敏纸片试验结果第42-43页
     ·体外最低抑菌浓度(MIC)测定第43-44页
     ·菌株PCR 扩增氨基糖苷类钝化酶和16S 甲基化酶基因结果第44-46页
     ·耐药表型与6 种耐药基因符合率结果第46-47页
   ·氨基糖苷类耐药质粒的鉴定及其携带率的检测第47-53页
     ·耐药质粒的酶切鉴定结果第47-48页
     ·质粒的耐药性传递鉴定结果第48-50页
     ·质粒pXZ 序列分析结果第50-51页
     ·三重PCR 扩增体系的建立及条件优化结果第51-52页
     ·pXZ 携带率检测结果第52-53页
   ·CTX-M-9 组编码基因DNA 序列测定与及基因型的确定第53-54页
     ·PCR 结果第53页
     ·重组质粒鉴定结果第53页
     ·CTX-M-9 组测序结果分析第53-54页
4 讨论第54-58页
   ·大肠杆菌氨基糖苷类耐药表型及基因型分析第54-55页
   ·氨基糖苷类耐药质粒的鉴定及其携带率的检测第55-57页
   ·CTX-M-9 组编码基因DNA 序列测定与及基因型的确定第57-58页
5 结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
攻读硕士期间发表论文情况第68-69页
硕士学位论文内容简介及自评第69页

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