中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-30页 |
1 大肠杆菌病原特性 | 第12-15页 |
·大肠杆菌的抗原特性 | 第12-13页 |
·禽大肠杆菌的致病性 | 第13-15页 |
2 细菌的耐药性 | 第15-30页 |
·氨基糖苷类药物的作用机制 | 第15-16页 |
·细菌对氨基糖苷类的耐药机理 | 第16-19页 |
·氨基糖苷类修饰酶 | 第16-19页 |
·细胞膜通透性的改变 | 第19页 |
·主动外排机制 | 第19页 |
·由质粒介导的耐药性 | 第19-30页 |
·16S rRNA 甲基化酶的发现 | 第19-20页 |
·16S rRNA 甲基化酶的分布 | 第20-21页 |
·16S rRNA 甲基化酶的亲缘关系 | 第21-22页 |
·16S rRNA 甲基化酶的作用及转移机制 | 第22-23页 |
·质粒介导的产超广谱β-内酰胺酶 | 第23-30页 |
2 材料及方法 | 第30-42页 |
·大肠杆菌氨基糖苷类耐药表型及基因型分析 | 第30-34页 |
·试验菌株和药敏质控菌株 | 第30页 |
·供试药物及培养基 | 第30页 |
·分子生物学试剂 | 第30页 |
·电泳缓冲液 | 第30页 |
·琼脂糖凝胶的配制 | 第30页 |
·实验仪器设备 | 第30页 |
·普通药敏纸片试验 | 第30-31页 |
·体外最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第31页 |
·引物的设计及合成 | 第31-32页 |
·三重PCR 检测氨基糖苷类钝化酶基因 | 第32-33页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
·PCR 检测16S 甲基化酶基因 | 第33页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
·氨基糖苷类耐药质粒的鉴定及其携带率的检测 | 第34-37页 |
·试验菌株与受体菌 | 第34页 |
·供试药物及培养基 | 第34页 |
·耐药质粒提取 | 第34-35页 |
·耐药质粒的转化 | 第35-36页 |
·耐药质粒的鉴定 | 第36页 |
·质粒的测序分析 | 第36页 |
·引物的设计及合成 | 第36-37页 |
·三重PCR 扩增体系的建立及条件的优化 | 第37页 |
·检测pXZ 携带率 | 第37页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
·CTX-M-9 组编码基因DNA 序列测定与及基因型的确定 | 第37-42页 |
·供试菌株 | 第37页 |
·分子生物学试剂 | 第37页 |
·实验仪器设备 | 第37-38页 |
·引物的设计和合成 | 第38页 |
·PCR 反应 | 第38页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第38-39页 |
·PCR 产物的回收 | 第39-40页 |
·回收目的片段的连接及转化 | 第40-41页 |
·重组质粒DNA 的提取 | 第41-42页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
·阳性克隆序列测定及基因型分型 | 第42页 |
3 结果 | 第42-54页 |
·大肠杆菌氨基糖苷类耐药表型及基因型分析 | 第42-47页 |
·普通药敏纸片试验结果 | 第42-43页 |
·体外最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第43-44页 |
·菌株PCR 扩增氨基糖苷类钝化酶和16S 甲基化酶基因结果 | 第44-46页 |
·耐药表型与6 种耐药基因符合率结果 | 第46-47页 |
·氨基糖苷类耐药质粒的鉴定及其携带率的检测 | 第47-53页 |
·耐药质粒的酶切鉴定结果 | 第47-48页 |
·质粒的耐药性传递鉴定结果 | 第48-50页 |
·质粒pXZ 序列分析结果 | 第50-51页 |
·三重PCR 扩增体系的建立及条件优化结果 | 第51-52页 |
·pXZ 携带率检测结果 | 第52-53页 |
·CTX-M-9 组编码基因DNA 序列测定与及基因型的确定 | 第53-54页 |
·PCR 结果 | 第53页 |
·重组质粒鉴定结果 | 第53页 |
·CTX-M-9 组测序结果分析 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-58页 |
·大肠杆菌氨基糖苷类耐药表型及基因型分析 | 第54-55页 |
·氨基糖苷类耐药质粒的鉴定及其携带率的检测 | 第55-57页 |
·CTX-M-9 组编码基因DNA 序列测定与及基因型的确定 | 第57-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第68-69页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第69页 |