摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
1.前言 | 第13-34页 |
·植物耐盐耐旱机理及基因工程研究进展 | 第13-22页 |
·植物耐盐耐旱机理 | 第13-19页 |
·渗透胁迫 | 第13-16页 |
·活性氧清除机制 | 第16页 |
·抗脱水蛋白质和多胺 | 第16页 |
·信号转导和钙信号 | 第16-17页 |
·离子区域化和外排机制 | 第17-18页 |
·基因表达的转录调控 | 第18-19页 |
·植物抗逆基因工程所采用的策略 | 第19-22页 |
·导入渗透调节物质合成酶基因 | 第21页 |
·导入胁迫诱导蛋白的基因 | 第21-22页 |
·导入活性氧清除酶类的基因 | 第22页 |
·导入编码转录因子的基因 | 第22页 |
·玉米耐盐耐旱基因工程研究进展 | 第22-25页 |
·玉米遗传转化技术的现状 | 第22-23页 |
·干旱和盐胁迫对玉米生长发育的影响 | 第23-24页 |
·玉米耐盐耐旱基因工程研究进展 | 第24-25页 |
·转录因子 | 第25-33页 |
·与逆境抗性相关的顺式作用元件和转录因子 | 第26-28页 |
·CBF/DREB基因的克隆 | 第28-30页 |
·CBF/DREB基因在植物基因工程中的应用及存在的问题 | 第30-33页 |
·本工作目的和意义 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-43页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·植物材料 | 第34页 |
·农杆菌菌株和质粒 | 第34页 |
·药品、试剂和溶液 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-43页 |
·转基因植株的分子生物学检测 | 第35-40页 |
·PCR检测 | 第35-36页 |
CTAB法微量提取玉米叶片DNA | 第35-36页 |
·Southern杂交检测 | 第36-38页 |
·实时荧光定量PCR | 第38-40页 |
·Trizol试剂盒提取RNA及电泳 | 第38-39页 |
·反转录体系 | 第39页 |
·Real-time RT-PCR | 第39-40页 |
·转基因植株的耐旱性分析 | 第40-42页 |
·材料的准备 | 第40页 |
·耐旱胁迫处理 | 第40页 |
·生理指标测定 | 第40-42页 |
·叶片相对含水量 | 第40-41页 |
·离子渗漏 | 第41页 |
·丙二醛含量 | 第41页 |
·可溶性总糖测定 | 第41-42页 |
·脯氨酸含量 | 第42页 |
·雄穗发育和花粉活力观察 | 第42页 |
·苗期耐盐性检测和生物量测定 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-58页 |
·转基因植株的PCR检测及SOUTHERN杂交验证 | 第43-44页 |
·转基因植株RT-PCR分析 | 第44-47页 |
·转基因植株的耐旱性分析 | 第47-55页 |
·植株生理指标测定 | 第47-52页 |
·叶片相对含水量差异 | 第47-48页 |
·离子渗漏率变化 | 第48-49页 |
·丙二醛含量变化 | 第49-50页 |
·可溶性糖含量变化 | 第50页 |
·脯氨酸含量变化 | 第50-52页 |
·植株生长发育的观察 | 第52-55页 |
·转基因植株苗期耐盐性及耐旱性测定 | 第55-58页 |
·苗期耐盐性检测 | 第55-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
·外源基因表达的分子检测 | 第58-59页 |
·转TsCBF1基因对玉米植株耐旱性及耐盐性的影响 | 第59页 |
·表达TsDREB1A基因的玉米植株生长发育正常 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第69页 |