摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
文献综述 | 第12-21页 |
第一章 Sirt 家族概述 | 第12-15页 |
·Sirt 家族的发现与分类 | 第12页 |
·Sirt 蛋白的结构特点 | 第12-13页 |
·Sirt 家族成员的定位与表达 | 第13-14页 |
·Sirt 蛋白的生物学功能 | 第14-15页 |
第二章 Sirt1 在脂肪细胞和成肌细胞中的作用 | 第15-21页 |
·Sirt1 在脂肪细胞中的作用 | 第15-19页 |
·前体脂肪细胞的分化过程 | 第15-16页 |
·转录因子调控脂肪细胞分化 | 第16-17页 |
·Sirt1 与脂肪细胞转录因子 | 第17-18页 |
·Sirt1 与Fox01 转录因子 | 第18-19页 |
·Sirt1 在成肌细胞中的作用 | 第19-21页 |
实验研究 | 第21-50页 |
前言 | 第21-22页 |
第三章 猪Sirt1 基因部分cDNA 的克隆 | 第22-27页 |
·材料与方法 | 第22-24页 |
·实验动物 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·总RNA 提取(TRIzol 法) | 第22-23页 |
·反转录 | 第23页 |
·PCR 扩增 | 第23-24页 |
·结果与分析 | 第24-26页 |
·猪大脑组织总RNA 的提取 | 第24页 |
·Ta 和MgC12 浓度对Sirt1 引物扩增效率的影响 | 第24-25页 |
·猪Sirt1 部分cDNA 序列的扩增 | 第25页 |
·猪Sirt1 cDNA 序列的同源性比对 | 第25-26页 |
·猪Sirt1 序列的结构分析 | 第26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
第四章 猪Sirt1 的组织表达差异 | 第27-35页 |
·材料与方法 | 第27-29页 |
·实验动物 | 第27页 |
·试剂和仪器 | 第27页 |
·总RNA 提取 | 第27页 |
·反转录 | 第27-28页 |
·PCR 扩增 | 第28页 |
·数据分析 | 第28-29页 |
·结果与分析 | 第29-33页 |
·猪的脂肪、脾、骨骼肌等组织总RNA 的提取 | 第29页 |
·反应循环次数的确定 | 第29-30页 |
·引物对之间的竞争反应 | 第30页 |
·Sirt1 在幼龄猪中的组织表达 | 第30-31页 |
·Sirt1 在成年猪中的组织表达 | 第31-32页 |
·Sirt1 在幼龄猪与成年猪各组织间的表达差异 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第五章 激活Sirt1 对猪前体脂肪细胞增殖与分化的作用 | 第35-44页 |
·材料与方法 | 第35-37页 |
·实验动物 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·猪前体脂肪细胞的原代培养 | 第35-36页 |
·MTT 法检测猪前体脂肪细胞的增殖活性 | 第36页 |
·油红O 染色及提取法检测猪脂肪细胞的分化 | 第36页 |
·猪脂肪细胞总RNA 的提取 | 第36页 |
·RT-PCR 检测Sirt1 的表达时序及Fox01 和脂肪细胞标志基因的表达变化 | 第36-37页 |
·统计学分析 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-42页 |
·RES 对猪前体脂肪细胞增殖的影响 | 第37-38页 |
·RES 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第38-40页 |
·猪脂肪细胞分化中Sirt1 的表达时序 | 第40-41页 |
·Sirt1、Fox01 及脂肪细胞标志基因mRNA 的表达变化 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
第六章 抑制Sirt1 对猪前体脂肪细胞增殖与分化的作用 | 第44-50页 |
·材料与方法 | 第44-45页 |
·实验动物 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·猪前体脂肪细胞的原代培养 | 第44页 |
·MTT 法检测猪前体脂肪细胞的增殖活性 | 第44-45页 |
·油红O 染色及提取法检测猪脂肪细胞的分化 | 第45页 |
·猪脂肪细胞总RNA 的提取 | 第45页 |
·RT-PCR 检测Sirt1、Fox01、PPARγ2、C/EBPα、aP2 和LPLmRNA 的表达变化 | 第45页 |
·统计学分析 | 第45页 |
·结果 | 第45-48页 |
·NAM 对猪前体脂肪细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
·NAM 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第46-47页 |
·Sirt1、Fox01 和脂肪细胞标志基因mRNA 的表达变化 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
结论 | 第50-51页 |
进一步研究内容 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-60页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |