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Sirt1在猪脂肪细胞增殖分化过程中的调控作用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-21页
 第一章 Sirt 家族概述第12-15页
   ·Sirt 家族的发现与分类第12页
   ·Sirt 蛋白的结构特点第12-13页
   ·Sirt 家族成员的定位与表达第13-14页
   ·Sirt 蛋白的生物学功能第14-15页
 第二章 Sirt1 在脂肪细胞和成肌细胞中的作用第15-21页
   ·Sirt1 在脂肪细胞中的作用第15-19页
     ·前体脂肪细胞的分化过程第15-16页
     ·转录因子调控脂肪细胞分化第16-17页
     ·Sirt1 与脂肪细胞转录因子第17-18页
     ·Sirt1 与Fox01 转录因子第18-19页
   ·Sirt1 在成肌细胞中的作用第19-21页
实验研究第21-50页
 前言第21-22页
 第三章 猪Sirt1 基因部分cDNA 的克隆第22-27页
   ·材料与方法第22-24页
     ·实验动物第22页
     ·主要试剂第22页
     ·总RNA 提取(TRIzol 法)第22-23页
     ·反转录第23页
     ·PCR 扩增第23-24页
   ·结果与分析第24-26页
     ·猪大脑组织总RNA 的提取第24页
     ·Ta 和MgC12 浓度对Sirt1 引物扩增效率的影响第24-25页
     ·猪Sirt1 部分cDNA 序列的扩增第25页
     ·猪Sirt1 cDNA 序列的同源性比对第25-26页
     ·猪Sirt1 序列的结构分析第26页
   ·讨论第26-27页
 第四章 猪Sirt1 的组织表达差异第27-35页
   ·材料与方法第27-29页
     ·实验动物第27页
     ·试剂和仪器第27页
     ·总RNA 提取第27页
     ·反转录第27-28页
     ·PCR 扩增第28页
     ·数据分析第28-29页
   ·结果与分析第29-33页
     ·猪的脂肪、脾、骨骼肌等组织总RNA 的提取第29页
     ·反应循环次数的确定第29-30页
     ·引物对之间的竞争反应第30页
     ·Sirt1 在幼龄猪中的组织表达第30-31页
     ·Sirt1 在成年猪中的组织表达第31-32页
     ·Sirt1 在幼龄猪与成年猪各组织间的表达差异第32-33页
   ·讨论第33-35页
 第五章 激活Sirt1 对猪前体脂肪细胞增殖与分化的作用第35-44页
   ·材料与方法第35-37页
     ·实验动物第35页
     ·主要试剂第35页
     ·猪前体脂肪细胞的原代培养第35-36页
     ·MTT 法检测猪前体脂肪细胞的增殖活性第36页
     ·油红O 染色及提取法检测猪脂肪细胞的分化第36页
     ·猪脂肪细胞总RNA 的提取第36页
     ·RT-PCR 检测Sirt1 的表达时序及Fox01 和脂肪细胞标志基因的表达变化第36-37页
     ·统计学分析第37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·RES 对猪前体脂肪细胞增殖的影响第37-38页
     ·RES 对猪前体脂肪细胞分化的影响第38-40页
     ·猪脂肪细胞分化中Sirt1 的表达时序第40-41页
     ·Sirt1、Fox01 及脂肪细胞标志基因mRNA 的表达变化第41-42页
   ·讨论第42-44页
 第六章 抑制Sirt1 对猪前体脂肪细胞增殖与分化的作用第44-50页
   ·材料与方法第44-45页
     ·实验动物第44页
     ·主要试剂第44页
     ·猪前体脂肪细胞的原代培养第44页
     ·MTT 法检测猪前体脂肪细胞的增殖活性第44-45页
     ·油红O 染色及提取法检测猪脂肪细胞的分化第45页
     ·猪脂肪细胞总RNA 的提取第45页
     ·RT-PCR 检测Sirt1、Fox01、PPARγ2、C/EBPα、aP2 和LPLmRNA 的表达变化第45页
     ·统计学分析第45页
   ·结果第45-48页
     ·NAM 对猪前体脂肪细胞增殖的影响第45-46页
     ·NAM 对猪前体脂肪细胞分化的影响第46-47页
     ·Sirt1、Fox01 和脂肪细胞标志基因mRNA 的表达变化第47-48页
   ·讨论第48-50页
结论第50-51页
进一步研究内容第51-52页
参考文献第52-58页
附录第58-60页
缩略词表(Abbreviation)第60-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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