| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 研究报告:普通变形杆菌TWN-3株基因文库构建及免疫印迹筛选 | 第12-63页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一章 普通变形杆菌TWN-3株基因文库构建 | 第15-37页 |
| 1、材料与方法 | 第15-31页 |
| ·、实验材料 | 第15-23页 |
| ·、菌株和质粒 | 第15-16页 |
| ·、培养基 | 第16-17页 |
| ·、相关酶类与抗生素 | 第17-18页 |
| ·、试剂及其配制 | 第18-23页 |
| ·、相关实验仪器与耗材 | 第23页 |
| ·、实验方法 | 第23-31页 |
| ·、普通变形杆菌TWN-3株复壮与扩大培养 | 第23-24页 |
| ·、普通变形杆菌TWN-3株总DNA提取 | 第24-25页 |
| ·、普通变形杆菌TWN-3株总DNA不完全酶切 | 第25-26页 |
| ·、pUC18质粒提取 | 第26-27页 |
| ·、pUC18质粒酶切 | 第27-28页 |
| ·、pUC18质粒酶切产物去磷酸化 | 第28页 |
| ·、重组质粒构建 | 第28-29页 |
| ·、感受态细胞制备 | 第29-30页 |
| ·、转化及筛选 | 第30页 |
| ·、文库保存 | 第30-31页 |
| 2、结果与分析 | 第31-36页 |
| ·、普通变形杆菌TWN-3株复壮与扩大培养 | 第31-32页 |
| ·、普通变形杆菌TWN-3株总DNA的提取结果 | 第32页 |
| ·、总DNA不完全酶切 | 第32-33页 |
| ·、pUC18质粒提取结果 | 第33-34页 |
| ·、pUC18质粒酶切结果 | 第34页 |
| ·、重组质粒转化感受态细胞结果 | 第34-35页 |
| ·、重组子酶切验证结果 | 第35-36页 |
| ·、文库保存结果 | 第36页 |
| 3、讨论 | 第36-37页 |
| 第二章 普通变形杆菌TWN-3株多克隆抗体制备 | 第37-47页 |
| 1、材料与方法 | 第37-44页 |
| ·、实验材料 | 第37-41页 |
| ·、实验菌株与动物 | 第37页 |
| ·、培养基 | 第37-38页 |
| ·、试剂及其配制 | 第38-40页 |
| ·、相关实验仪器与耗材 | 第40-41页 |
| ·、实验方法 | 第41-44页 |
| ·、普通变形杆菌TWN-3株复壮与扩大培养 | 第41页 |
| ·、TWN-3菌悬液制备 | 第41页 |
| ·、疫苗制备 | 第41-42页 |
| ·、兔子的免疫方式与免疫周期 | 第42页 |
| ·、兔血的采集与血清的分离 | 第42页 |
| ·、抗体的测定 | 第42-44页 |
| ·、血清的保存 | 第44页 |
| 2、结果与分析 | 第44-45页 |
| ·、血清抗体测定结果 | 第44-45页 |
| 3、讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 普通变形杆菌TWN-3株免疫印迹筛选 | 第47-61页 |
| 1、材料与方法 | 第47-58页 |
| ·、实验材料 | 第47-54页 |
| ·、菌株和质粒 | 第47页 |
| ·、培养基 | 第47-48页 |
| ·、相关酶类与抗生素 | 第48页 |
| ·、试剂及其配制 | 第48-53页 |
| ·、相关实验仪器与耗材 | 第53-54页 |
| ·、实验方法 | 第54-58页 |
| ·、与大肠杆菌裂解液共同温浴以除去抗血清中交叉反应性抗体 | 第54页 |
| ·、主板与膜的制备 | 第54-55页 |
| ·、复印膜的制备 | 第55页 |
| ·、复印膜的处理 | 第55-56页 |
| ·、表达融合蛋白克隆的检测 | 第56页 |
| ·、阳性克隆的鉴定 | 第56-58页 |
| 2、结果与分析 | 第58-59页 |
| ·、免疫筛选结果 | 第58-59页 |
| ·、质粒验证结果 | 第59页 |
| 3、讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 文献综述:鱼用疫苗研究与应用 | 第63-81页 |
| 前言 | 第63页 |
| 1、疫苗概况 | 第63-64页 |
| 2、鱼用灭活疫苗的研究与应用 | 第64页 |
| 3、鱼用减毒疫苗的研究与应用 | 第64-65页 |
| 4、鱼用亚单位疫苗的研究与应用 | 第65页 |
| 5、鱼用基因工程苗的研究与应用 | 第65-67页 |
| ·、基因工程疫苗的特点 | 第65-66页 |
| ·、基因工程亚单位苗 | 第66-67页 |
| ·、基因缺失活疫苗或突变苗 | 第67页 |
| ·、活载体疫苗 | 第67页 |
| 6、鱼用DNA疫苗的研究与应用 | 第67-75页 |
| ·、DNA疫苗的特点 | 第67-68页 |
| ·、表达质粒的设计与改进 | 第68-70页 |
| ·表达质粒的设计 | 第68-70页 |
| ·、表达质粒的改进 | 第70页 |
| ·、目的基因的表达 | 第70-72页 |
| ·、表达的时间与效果 | 第70-71页 |
| ·、表达的位点 | 第71-72页 |
| ·、鱼类DNA疫苗的接种方式 | 第72页 |
| ·、DNA疫苗的免疫应答 | 第72-74页 |
| ·、体液免疫应答 | 第72-73页 |
| ·、细胞免疫应答 | 第73-74页 |
| ·、免疫效果评估 | 第74页 |
| ·、DNA疫苗的有效剂量和体积 | 第74-75页 |
| ·、DNA疫苗的生物安全性 | 第75页 |
| 7、鱼用疫苗的发展方向 | 第75-77页 |
| ·、改进接种途径及方法 | 第75-76页 |
| ·、研制多价疫苗 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 在校期间论文发表情况 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |