| 第一章 绪论 | 第1-53页 |
| ·木质素调控研究进展 | 第18-29页 |
| ·木质素概论 | 第18-19页 |
| ·木质素的生物合成 | 第19-24页 |
| ·木质素单体的生物合成 | 第20-23页 |
| ·木质素单体的聚合 | 第23页 |
| ·木质素单体合成途径的多样性 | 第23-24页 |
| ·木质素生物合成调控的研究进展 | 第24-26页 |
| ·木质素基因工程 | 第26-29页 |
| ·苯丙烷途径的生物调控 | 第27页 |
| ·木质素单体特异合成相关酶的生物调控 | 第27-28页 |
| ·木质素特异合成途径下游酶类的生物调控 | 第28-29页 |
| ·植物基因克隆的方法与策略 | 第29-38页 |
| ·图位克隆技术(map-based cloning or positional cloning) | 第29-30页 |
| ·转座子或T-DNA标签法(transposon or T-DNA tagging method) | 第30-31页 |
| ·同源序列法(homofogy based candidate gene method) | 第31-32页 |
| ·表达序列标签法(expressed sequenee tagging method，EST) | 第32-33页 |
| ·差异表达基因的分离方法(differentially expressed gene cloning methods) | 第33-38页 |
| ·代表性差示分析法(RDA) | 第34-35页 |
| ·抑制性差减杂交PCR法(SSH) | 第35-37页 |
| ·交互差减差异 RNA显示(RSDD) | 第37-38页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)的研究进展 | 第38-43页 |
| ·PAL的存在和分布 | 第39页 |
| ·PAL的酶学性质 | 第39页 |
| ·PAL对植物生理代谢的意义 | 第39-43页 |
| ·在细胞分化和木质化中的作用 | 第39-40页 |
| ·在植物色素形成过程中的作用 | 第40页 |
| ·在植物的根瘤形成过程中的作用 | 第40页 |
| ·PAL在植物抗逆境中的作用 | 第40-42页 |
| ·植物PAL基因的克隆与PAL活性的调控 | 第42-43页 |
| ·RNA干扰研究进展 | 第43-49页 |
| ·RNAi的定义 | 第43页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第43-44页 |
| ·RNAi的特点 | 第44-45页 |
| ·RNAi的结构特征 | 第44-45页 |
| ·RNAi的特异性 | 第45页 |
| ·RNAi的高效性 | 第45页 |
| ·RNAi的可扩散性 | 第45页 |
| ·RNAi的可遗传性 | 第45页 |
| ·产生RNAi的方法 | 第45-47页 |
| ·RNAi技术在植物生物学中的应用 | 第47-49页 |
| ·植物基因功能的研究 | 第47-48页 |
| ·植物品质改良 | 第48页 |
| ·植物转录后基因沉默(RTGS)诱导抗性 | 第48页 |
| ·展望 | 第48-49页 |
| ·柠条 | 第49-50页 |
| ·柠条的生态学特征 | 第49页 |
| ·柠条对环境的适应性 | 第49-50页 |
| ·抗旱性 | 第49页 |
| ·抗热性 | 第49页 |
| ·抗寒性 | 第49页 |
| ·耐盐碱性 | 第49-50页 |
| ·柠条对生态环境的改善功能 | 第50页 |
| ·柠条的经济价值 | 第50页 |
| ·本研究的目的意义和选题依据 | 第50-52页 |
| ·主要研究内容 | 第52-53页 |
| 第二章 柠条锦鸡儿 DNA的提取及 PAL基因引物的设计 | 第53-62页 |
| ·材料和方法 | 第53-58页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-58页 |
| ·材料培养 | 第53页 |
| ·柠条DNA提取 | 第53-54页 |
| ·柠条palDNA的PCR扩增 | 第54-55页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第55页 |
| ·琼脂糖凝胶产物的回收 | 第55页 |
| ·PCR片段的TA克隆 | 第55-56页 |
| ·大肠杆菌Top10感受态细胞的制备 | 第56页 |
| ·转化 | 第56页 |
| ·重组质粒的筛选及鉴定 | 第56-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·柠条DNA提取 | 第58页 |
| ·PAL基因片段的扩增 | 第58-59页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第59页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第59-60页 |
| ·PAL基因片段的序列测定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 第三章 柠条锦鸡儿苯丙氨酸解氨酶的活性测定以及分离纯化 | 第62-76页 |
| ·材料与方法 | 第62-64页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·材料培养 | 第62页 |
| ·培养用营养液 | 第62页 |
| ·实验材料选取 | 第62-63页 |
| ·PAL粗酶活性测定材料 | 第62页 |
| ·PAL纯化材料 | 第62-63页 |
| ·PAL粗酶提取 | 第63页 |
| ·PAL活性和比活测定 | 第63页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第63页 |
| ·PAL酶蛋白纯化 | 第63-64页 |
| ·盐析 | 第63页 |
| ·离子交换层析纯化PAL | 第63-64页 |
| ·分子筛凝聚层析纯化PAL | 第64页 |
| ·PAL全酶分子量测定 | 第64页 |
| ·PAL酶蛋白的电泳 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-74页 |
| ·蛋白质含量标准曲线 | 第64-65页 |
| ·苗期柠条不同阶段、不同器官PAL活性和比活 | 第65-67页 |
| ·柠条PAL的离子交换层析 | 第67-69页 |
| ·柠条 PAL的分子筛层析及全酶分子量测定 | 第69-73页 |
| ·蛋白质分子量标准曲线制作 | 第69-70页 |
| ·柠条PAL的分子筛层析 | 第70-73页 |
| ·纯化 PAL的SDS-PAGE鉴定及 PAL亚基分子量测定 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| 第四章 柠条锦鸡儿发育中苯丙氨酸解氨酶基因表达的研究 | 第76-83页 |
| ·材料与方法 | 第76-79页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·材料培养 | 第76页 |
| ·培养用营养液 | 第76页 |
| ·实验材料选用 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-79页 |
| ·柠条 RNA提取 | 第77页 |
| ·RNA甲醛变性胶电泳检测 | 第77-78页 |
| ·转膜 | 第78页 |
| ·探针标记 | 第78页 |
| ·样品杂交 | 第78页 |
| ·显色 | 第78页 |
| ·杂交信号的灰度分析 | 第78-79页 |
| ·剥离探针 | 第79页 |
| ·18SrRNA杂交 | 第79页 |
| ·结果 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第五章 柠条锦鸡儿苯丙氨酸解氨酶cDNA片段的克隆与序列分析 | 第83-94页 |
| ·材料与方法 | 第83-85页 |
| ·材料 | 第83页 |
| ·RNA提取用样本 | 第83页 |
| ·Pal基因片段克隆用样本 | 第83页 |
| ·试剂 | 第83页 |
| ·材料培养 | 第83页 |
| ·培养用营养液 | 第83页 |
| ·柠条 RNA的提取 | 第83-85页 |
| ·RNA的质量检测和浓度测定 | 第84页 |
| ·RNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第84页 |
| ·逆转录 | 第84页 |
| ·PCR扩增 | 第84-85页 |
| ·琼脂糖凝胶产物的回收 | 第85页 |
| ·pGEM-T Easy Vector克隆 | 第85页 |
| ·大肠杆菌 Top10感受态细胞的制备 | 第85页 |
| ·转化 | 第85页 |
| ·重组质粒的筛选及鉴定 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-92页 |
| ·提取 RNA样品的浓度测定及质量鉴定 | 第85-87页 |
| ·RNA样品的紫外吸收测定 | 第85-86页 |
| ·RNA的电泳检测 | 第86-87页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第87-89页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第87-88页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第88-89页 |
| ·Pal基因片段的序列测定 | 第89-92页 |
| ·Pal基因片段的序列测定 | 第89页 |
| ·pal基因片段的阅读框架分析 | 第89-90页 |
| ·扩增片段的同源性比对 | 第90-92页 |
| ·讨论 | 第92-94页 |
| 第六章 RNAI表达载体构建 | 第94-107页 |
| ·材料与方法 | 第94-102页 |
| ·材料 | 第94页 |
| ·方法 | 第94-100页 |
| ·中间载体pBlueintron的构建 | 第94-96页 |
| ·中间载体pBlulntronpalI的构建 | 第96-97页 |
| ·中间载体pBlueintronpalII的构建 | 第97-99页 |
| ·RNAi载体Pa1RNAiqf的构建 | 第99-100页 |
| ·载体构建流程图 | 第100-102页 |
| ·结果与分析 | 第102-106页 |
| ·中间载体pBlueintron的构建 | 第102-103页 |
| ·中间载体pBlueintronpalI的构建 | 第103-104页 |
| ·中间载体pBlueintronpalII的构建 | 第104-105页 |
| ·RNAi载体paiRNAiq的构建 | 第105-106页 |
| ·讨论 | 第106-107页 |
| 第七章 RNA干扰表达载体的转化、农杆菌侵染及转基因植株检测鉴定 | 第107-118页 |
| ·材料与方法 | 第107-112页 |
| ·材料 | 第107页 |
| ·方法 | 第107-112页 |
| ·农杆菌转化 | 第107-109页 |
| ·转目标基因烟草的PCR筛选 | 第109-110页 |
| ·转基因烟草的Southern杂交鉴定 | 第110-111页 |
| ·Northern杂交鉴定转palRNAiqf基因在转基因烟草中RNAi效果 | 第111-112页 |
| ·结果和分析 | 第112-116页 |
| ·酶切鉴定 | 第112页 |
| ·转基因烟草的PCR鉴定 | 第112-113页 |
| ·转基因烟草的Southern鉴定 | 第113-115页 |
| ·RNA干扰载体功能测定 | 第115-116页 |
| ·讨论 | 第116-118页 |
| 第八章 结论 | 第118-120页 |
| 附录 | 第120-125页 |
| 参考文献 | 第125-144页 |
| 致谢 | 第144-146页 |
| 作者简历 | 第146页 |
