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小麦—中间偃麦草抗黄矮病易位系的细胞与分子水平鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
1 引言第9-22页
   ·小麦黄矮病病毒株系的概述第10-11页
   ·小麦黄矮病抗性基因的研究第11-13页
   ·小麦易位系鉴定的方法第13-20页
     ·形态标记第14页
     ·细胞学标记鉴定第14-15页
       ·染色体核型分析(Chromosome Karyotype Analysiszz)第14页
       ·染色体分带第14-15页
     ·生化标记第15-16页
       ·同工酶标记第15页
       ·贮藏蛋白标记第15-16页
     ·分子标记第16-20页
       ·限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)第16-17页
       ·原位杂交(in situ hybridization,ISH)第17-18页
       ·随机扩增多态性(Random Amplified Polymorphism DNA,RAPD)第18-19页
       ·简单序列重复标记(Simple sequence repeat,SSR)第19-20页
       ·序标位点(Sequence tagged sites, STS)第20页
   ·本项目的研究内容、技术路线以及立论依据第20-22页
     ·研究内容:第20-21页
       ·抗性鉴定第20页
       ·细胞学鉴定第20页
         ·根尖染色体计数第20页
         ·基因组原位杂交(GISH)第20页
       ·分子标记筛选第20-21页
     ·本研究的技术路线第21页
     ·本研究的特色和创新之处及立论依据第21-22页
2 材料与方法第22-35页
   ·实验材料第22页
   ·实验方法第22-35页
     ·基因组原位杂交第22-27页
       ·基因组DNA的提取第22-23页
       ·生物素标记探针第23-24页
       ·染色体标本的制备第24-25页
         ·根尖的固定第24页
         ·玻片的处理第24页
         ·染色体标本的制备第24-25页
       ·制片的预处理第25页
       ·原位杂交第25-27页
       ·SSR实验程序第27-29页
       ·SSR-PCR反应体系以及反应条件第27页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第27-29页
     ·RFLP探针序列转化STS标记以及扩增第29-30页
     ·EST序列转化STS标记第30-31页
     ·特异条带的回收与克隆第31-35页
       ·聚丙烯酰胺凝胶特异条带的回收:第31页
       ·特异条带二次扩增第31页
       ·目的条带回收:第31-32页
       ·特异条带的连接:第32页
       ·转化与克隆第32-33页
       ·菌落PCR鉴定第33页
       ·菌液的保存:第33-34页
       ·质粒的提取第34页
       ·质粒的酶切鉴定第34-35页
3 实验结果第35-47页
   ·基因组原位杂交的结果第35-37页
   ·SSR扩增结果分析第37-41页
     ·2A染色体上引物扩增结果第37-38页
     ·2B染色体上引物扩增结果第38-39页
     ·2D染色体上引物扩增结果:第39-41页
   ·RFLP探针转化STS标记的扩增结果第41-42页
   ·EST序列转化STS标记的扩增结果第42-43页
   ·RFLP探针Psr126转化STS-126引物扩增的特异条带序列分析第43-47页
4 结论第47-48页
5 讨论第48-50页
   ·关于基因组原位杂交的假信号的探讨第48-49页
   ·关于SSR扩增结果的相关讨论:第49页
   ·RFLP转化STS标记的探讨第49-50页
   ·EST转化STS标记效率的探讨第50页
参考文献第50-59页
致谢第59页

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