| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-14页 |
| 1 绪论 | 第14-53页 |
| ·导言 | 第14页 |
| ·多肽研究历史上的重要事件 | 第14-23页 |
| ·胃肠内分泌学发展简史 | 第14-16页 |
| ·胰岛素和胰岛素样生长因子的研究历史 | 第16-17页 |
| ·肠促胰岛素的研究历史 | 第17-20页 |
| ·植物多肽激素的研究 | 第20-22页 |
| ·另外一些重要多肽的研究历史 | 第22-23页 |
| ·新多肽的发现 | 第23-30页 |
| ·多肽生物活性与发现新肽的一般方法 | 第23-26页 |
| ·从人体内分离多肽物质 | 第26-27页 |
| ·从动物体内分离多肽物质 | 第27-28页 |
| ·从植物体内分离多肽物质 | 第28-29页 |
| ·从微生物体内分离多肽物质 | 第29页 |
| ·分子水平研究 | 第29-30页 |
| ·多肽的研究主要技术 | 第30-32页 |
| ·分离纯化技术 | 第30页 |
| ·序列组成和结构分析技术 | 第30-31页 |
| ·蛋白质组功能模式研究技术 | 第31-32页 |
| ·多肽的应用 | 第32-39页 |
| ·生物医药上的应用 | 第33-36页 |
| ·在食品工业中的应用 | 第36-37页 |
| ·在科学研究中的应用 | 第37-39页 |
| ·PA1b 及相关研究 | 第39-47页 |
| ·PA1b 的发现及分布 | 第39-40页 |
| ·碱性7S 球蛋白（Bg 蛋白）的研究 | 第40-42页 |
| ·PA1b、豆类胰岛素和Bg 蛋白的关系 | 第42-44页 |
| ·PA1b、豆类胰岛素的生理功能 | 第44-47页 |
| ·本研究的意义 | 第47-51页 |
| ·动物中是否存在PA1b | 第47-48页 |
| ·PA1b 调节糖代谢的机制 | 第48-51页 |
| ·本研究解决的问题 | 第51-53页 |
| ·制备抗体建立了免疫学的研究技术平台 | 第51-52页 |
| ·PA1b 在动植中的分布研究 | 第52页 |
| ·进行PA1b 调节血糖代谢机理的初步研究 | 第52-53页 |
| 2 多克隆抗体的制备与纯化 | 第53-59页 |
| ·原理 | 第53-54页 |
| ·主要材料、试剂及设备 | 第54-55页 |
| ·主要操作方法 | 第55-57页 |
| ·免疫原和包被抗原的制备 | 第55页 |
| ·动物免疫 | 第55-56页 |
| ·测定血清效价 | 第56页 |
| ·血清采集和多克隆抗体的纯化 | 第56-57页 |
| ·实验结果与讨论 | 第57-59页 |
| 3 单克隆抗体的制备与鉴定 | 第59-83页 |
| ·基本原理 | 第59-61页 |
| ·材料 | 第61-63页 |
| ·生物材料 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61-62页 |
| ·溶液系统 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-74页 |
| ·PA1b 的纯化与鉴定 | 第63-65页 |
| ·PA1b－BTG 的制备 | 第65页 |
| ·PA1b－HSA 的制备 | 第65页 |
| ·免疫动物和效价检测 | 第65-67页 |
| ·细胞融合 | 第67-69页 |
| ·选择性培养 | 第69页 |
| ·杂交瘤细胞，瘤细胞染色体鉴别 | 第69-70页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第70页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆 | 第70页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第70页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第70-71页 |
| ·纯化MAb 的SDS－PAGE | 第71-72页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第72页 |
| ·单克隆株细胞上清和腹水抗体分泌稳定性的研究 | 第72页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第72-73页 |
| ·竟争抑制ELISA 的建立及应用 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-81页 |
| ·PA1b 的制备及纯化 | 第74-75页 |
| ·抗原的制备 | 第75页 |
| ·免疫动物血清效价的测定 | 第75-76页 |
| ·融合结果 | 第76-77页 |
| ·杂交瘤细胞、瘤细胞染色体 | 第77-78页 |
| ·MAb 的特性鉴定 | 第78-79页 |
| ·单克隆细胞株分泌抗体稳定性的研究 | 第79-80页 |
| ·PA1b ELISA 检测方法的建立和竟争抑制ELISA 的应用 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 4 PA1b 的分布研究 | 第83-96页 |
| ·导言 | 第83页 |
| ·材料 | 第83-85页 |
| ·主要仪器 | 第83页 |
| ·主要试剂 | 第83-84页 |
| ·主要溶液 | 第84-85页 |
| ·方法 | 第85-87页 |
| ·用竞争抑制 ELISA 分别测定多种植物和小鼠多种组织提取液中PA1b 的量 | 第85页 |
| ·豌豆种子发芽过程中PA1b 含量的变化 | 第85页 |
| ·免疫组织化学研究小鼠各组织中PA1b 的分布 | 第85-86页 |
| ·用western-blot 方法研究小鼠多种组织是否存在PA1b | 第86-87页 |
| ·结果 | 第87-93页 |
| ·ELISA 检测结果 | 第87-89页 |
| ·western-blot | 第89页 |
| ·免疫组织化学 | 第89-93页 |
| ·讨论 | 第93-96页 |
| 5 PA1b 相互作用蛋白的研究 | 第96-118页 |
| ·实验原理 | 第96-99页 |
| ·材料 | 第99-101页 |
| ·试剂材料 | 第99-100页 |
| ·主要仪器 | 第100页 |
| ·主要溶液 | 第100-101页 |
| ·方法 | 第101-105页 |
| ·将PA1b 固定于传感器芯片上 | 第101页 |
| ·生物分子膜制备条件筛选 | 第101-102页 |
| ·3%BSA 封闭效果的检测 | 第102页 |
| ·膜总蛋白的制备 | 第102页 |
| ·PA1b 与膜蛋白的结合反应 | 第102页 |
| ·亲和柱的制备 | 第102-103页 |
| ·亲和层析用膜蛋白的提取 | 第103页 |
| ·膜结合蛋白的结合、洗脱、收集及透析 | 第103页 |
| ·亲和柱的再生 | 第103-104页 |
| ·ELISA 检测洗脱峰的结合特性 | 第104-105页 |
| ·膜结合蛋白的鉴定 | 第105页 |
| ·结果 | 第105-115页 |
| ·原子力显微镜(AFM)检测PA1b 固定于SPR 传感器芯片上的效果 | 第105-106页 |
| ·BSA 封闭实验结果 | 第106-107页 |
| ·SPR 传感器应用于不同组织PA1b 膜配体的筛选 | 第107-108页 |
| ·亲合柱的制备 | 第108页 |
| ·膜蛋白的提取 | 第108-109页 |
| ·亲合层析 | 第109-110页 |
| ·ELISA 检测洗脱峰的结合特性 | 第110页 |
| ·膜结合蛋白的初步鉴定 | 第110-112页 |
| ·膜结合蛋白的胶内水解及肽指纹图谱的获得 | 第112-115页 |
| ·讨论 | 第115-118页 |
| 6 总结 | 第118-121页 |
| ·本研究主要取得了以下几方面的成果 | 第118页 |
| ·本研究的方法创新点 | 第118-119页 |
| ·研究过程中意外发现 | 第119页 |
| ·研究意义与展望 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-135页 |
| 附录1 攻读博士学位期间发表的论文 | 第135-136页 |
| 附录2 英文缩写及中英文全名对照表 | 第136-138页 |
| 附录3 常用氨基酸缩写表 | 第138-139页 |
| 附录4 博士学习期间参与申请专利情况 | 第139页 |
