| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 目录 | 第12-14页 |
| 插图目录 | 第14-15页 |
| 表格目录 | 第15-16页 |
| 略语表 | 第16-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-38页 |
| 1 microRNA 概述 | 第17-19页 |
| ·miRNA 的生物学特征及生物学功能 | 第17-18页 |
| ·miRNA 的加工和作用机制 | 第18-19页 |
| 2 miRNA 稳定性研究进展 | 第19-20页 |
| 3 血清miRNA 与生物标记物 | 第20-31页 |
| ·癌症生物标记物与miRNA | 第20-22页 |
| ·血清与外核体简介 | 第22-23页 |
| ·血清肿瘤标记物研究历史 | 第23-24页 |
| ·各类癌症相关生物标记物 | 第24-31页 |
| ·miRNA 与妊娠相关疾病 | 第31页 |
| 4 肝癌miRNA 研究进展 | 第31-33页 |
| 5 研究肿瘤miRNA 的主要方法 | 第33-38页 |
| ·分子杂交法 | 第33-34页 |
| ·Real-time PCR | 第34-36页 |
| ·Solexa 测序 | 第36页 |
| ·表面增强拉曼光谱法（surface-enhanced Raman spectroscopy，SERS） | 第36页 |
| ·用荧光DNA 探针检测成熟miRNA | 第36页 |
| ·miRNA 潜在靶标的预测 | 第36-38页 |
| 第2章 实验方案设计 | 第38-41页 |
| 1 研究目的和意义 | 第38页 |
| 2 研究主要内容 | 第38-40页 |
| 3 实验流程图 | 第40-41页 |
| 第3章 材料与方法 | 第41-61页 |
| 1 材料 | 第41-45页 |
| ·肝癌细胞系、组织与血清样本 | 第41页 |
| ·主要仪器及材料 | 第41页 |
| ·反转录茎环引物及PCR 引物 | 第41-43页 |
| ·试剂及其来源 | 第43-45页 |
| 2 方法 | 第45-61页 |
| ·血清样本制备 | 第45页 |
| ·总RNA 样本制备 | 第45-48页 |
| ·样本的处理 | 第48-49页 |
| ·目标miRNA 的筛选 | 第49-50页 |
| ·miRNA 茎环引物及PCR 引物设计 | 第50-52页 |
| ·miRNA 表达的检测和分析 | 第52-59页 |
| ·miRNA 表达的定量分析 | 第59-61页 |
| 第4章 结果与分析 | 第61-74页 |
| 1 总RNA 样本的质量分析 | 第61页 |
| 2 加热预处理对血清RNA 提取效率影响分析 | 第61-63页 |
| 3 miRNA 在肝癌细胞系、组织和血清中表达的检测与分析 | 第63-67页 |
| ·miRNA 基因的扩增（RT-PCR） | 第63-64页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定 | 第64-65页 |
| ·miRNA 基因的测序验证结果 | 第65-66页 |
| ·引物特异性的验证与分析 | 第66-67页 |
| 4 RNA 的稳定性分析 | 第67-71页 |
| ·Huh-7 细胞系中肝癌相关miRNA 的稳定性分析 | 第67-68页 |
| ·肝肿瘤样本中肝癌相关miRNA 的稳定性分析 | 第68-70页 |
| ·血清样本中肝癌相关miRNA 的稳定性分析 | 第70-71页 |
| 5 血清中miRNA 的表达个体差异性与性别的相关性 | 第71-72页 |
| 6 临床肝癌血清样本的检测分析 | 第72-74页 |
| 第5章 讨论 | 第74-78页 |
| 1 miRNA 高效的分离方法 | 第74页 |
| 2 血清miRNA 的稳定性分析 | 第74-75页 |
| 3 基于荧光定量PCR 技术检测血清miRNA | 第75页 |
| 4 miRNA 作为癌症的生物标记物 | 第75-78页 |
| 第6章 总结与展望 | 第78-81页 |
| 1 总结 | 第78页 |
| 2 展望 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 附录一 重要试剂的配制 | 第91-94页 |
| 论文及专利发表、申请情况 | 第94页 |
