| 原创性声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 果树遗传转化的研究进展 | 第13-15页 |
| ·农杆菌介导法 | 第13-14页 |
| ·基因枪法 | 第14页 |
| ·电激法 | 第14页 |
| ·聚乙二醇(PEG)法 | 第14-15页 |
| 2 苹果转基因研究进展 | 第15-20页 |
| ·苹果的转化体系和供受体系统 | 第15-16页 |
| ·影响苹果叶片高效再生的因素 | 第16-18页 |
| ·基因型对叶片再生的影响 | 第16页 |
| ·外植体类型及放置方式对离体叶片再生的影响 | 第16-17页 |
| ·基本培养基及激素配比对叶片再生的影响 | 第17页 |
| ·其它影响因素 | 第17-18页 |
| ·影响转化的因素 | 第18-20页 |
| ·农杆菌菌株致毒性 | 第18页 |
| ·农杆菌vir基因的活化 | 第18-19页 |
| ·浸菌时间及共培养时间 | 第19页 |
| ·抗生素及选择压 | 第19-20页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第20页 |
| 3 SAAT系统在植物转基因中的应用 | 第20-22页 |
| ·超声波法在植物遗传转化中应用 | 第20-21页 |
| ·SAAT法在植物遗传转化中的应用 | 第21-22页 |
| 4 铁载体基因研究进展 | 第22-30页 |
| ·植物的铁营养 | 第22-24页 |
| ·铁对植物的作用 | 第22-23页 |
| ·影响植物吸收铁的因素 | 第23-24页 |
| ·土壤因子 | 第23页 |
| ·植物自身因素 | 第23-24页 |
| ·铁载体蛋白基因及相关基因的研究进展 | 第24-26页 |
| ·H~+-ATPase酶 | 第25页 |
| ·Fe(III)还原酶基因的结构与功能 | 第25-26页 |
| ·铁载体IRT1基因及相关基因研究进展 | 第26-28页 |
| ·IRT1基因的结构 | 第26页 |
| ·IRT1基因的功能 | 第26-27页 |
| ·IRT1的表达与调控 | 第27-28页 |
| ·与IRT1相关的基因 | 第28页 |
| ·铁载体基因工程的研究进展 | 第28-30页 |
| 第二章 烟草超声波辅助农杆菌介导遗传转化体系的建立 | 第30-36页 |
| 1 材料与方法 | 第30-33页 |
| ·材料及仪器 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株、质粒及基因性质 | 第30-31页 |
| ·菌株的保存 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·烟草培养基 | 第31页 |
| ·细菌培养基 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·划板挑单菌落 | 第31-32页 |
| ·不同超声波处理时段对农杆菌介导的影响 | 第32页 |
| ·不同超声波处理时间及超声波功率对农杆菌介导的影响I | 第32页 |
| ·GUS基因瞬时表达检测 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-34页 |
| ·最适处理时段 | 第33页 |
| ·最佳处理时间和处理功率 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 八棱海棠超声波辅助农杆菌介导遗传转化体系的建立 | 第36-42页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·材料及仪器 | 第36-37页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·菌株、质粒及基因性质 | 第36页 |
| ·菌株的保存 | 第36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·八棱海棠培养基 | 第36-37页 |
| ·细菌培养基 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·划板挑单菌落 | 第37页 |
| ·不同超声波处理时段对农杆菌介导的影响 | 第37页 |
| ·不同超声波处理时间对农杆菌介导的影响 | 第37页 |
| ·不同超声波处理强度对农杆菌介导的影响 | 第37-38页 |
| ·不同外植体类型对超声波辅助介导的影响 | 第38页 |
| ·GUS基因瞬时表达检测 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-40页 |
| ·最适处理时段 | 第38页 |
| ·最佳处理时间 | 第38-39页 |
| ·超声波处理的最适强度 | 第39-40页 |
| ·最适外植体类型 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 农杆菌介导法获得转铁载体蛋白基因(IRT1)八棱海棠株系及其检测 | 第42-55页 |
| 1 材料与方法 | 第42-50页 |
| ·材料 | 第42-46页 |
| ·植物材料 | 第42-43页 |
| ·菌株、质粒及基因的特性 | 第43-45页 |
| ·培养基与培养液 | 第45-46页 |
| ·八棱海棠培养基 | 第45页 |
| ·细菌培养基 | 第45-46页 |
| ·GUS染色液配方 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-50页 |
| ·八棱海棠的转化 | 第46-47页 |
| ·农杆菌的活化 | 第46页 |
| ·侵染 | 第46页 |
| ·黑暗共培养 | 第46页 |
| ·延时筛选 | 第46页 |
| ·选择培养 | 第46-47页 |
| ·抗性植株的获得 | 第47页 |
| ·检测 | 第47-50页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第47页 |
| ·生根检测 | 第47页 |
| ·PCR扩增检测 | 第47-49页 |
| ·RT-PCR检测 | 第49-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-52页 |
| ·八棱海棠转IRT1基因植株的获得 | 第50页 |
| ·GUS基因组织化学方法检测 | 第50-51页 |
| ·八棱海棠抗性植株的生根检测 | 第51页 |
| ·PCR电泳检测 | 第51页 |
| ·RT-PCR检测 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 图版 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
