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多杀性巴氏杆菌跨膜输出蛋白基因选择克隆载体的构建和应用

致谢第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
第一章 文献综述第13-30页
 1 多杀性巴氏杆菌及其生物特性研究第13-21页
   ·多杀性巴氏杆菌血清型及致病性第13-15页
   ·多杀性巴氏杆菌交叉保护因子第15-18页
   ·多杀性巴氏杆菌主要外膜蛋白第18-21页
 2 基于多杀性巴氏杆菌基因组的研究方法第21-25页
   ·基因芯片第21页
   ·限制性内切酶分析第21-22页
   ·核糖体分型第22-23页
   ·脉冲场凝胶电泳第23-24页
   ·DNA指纹技术第24页
   ·其他基因组学研究方法第24-25页
 3 膜蛋白的跨膜分泌与选择克隆第25-28页
   ·膜蛋白的跨膜与分泌第25页
   ·用于跨膜分泌与膜蛋白拓扑结构研究的方法第25-27页
   ·报告基因的种类和特性第27-28页
   ·有关报告基因融合方面的应用研究第28页
 4 本研究的工作基础、目的、意义和主要内容第28-30页
   ·本研究的工作基础第28-29页
   ·本研究的目的、意义和主要内容第29-30页
第二章 跨膜输出蛋白基因选择克隆载体的构建第30-43页
 1 材料第30-31页
 2 方法第31-36页
 3 结果第36-41页
   ·pMB-Lac载体的构建和分析第36-38页
   ·Ara启动子的扩增和BamH I位点突变第38页
   ·pMB-Ara载体的构建第38-39页
   ·pMB-Ara载体序列和结构分析第39-41页
 4 讨论第41-43页
第三章 载体pMB-Lac/pMB-Ara调控性验证第43-57页
 1 材料第44页
 2 方法第44-48页
 3 结果第48-54页
   ·△P Tet/△P T7-Tet基因的扩增第48-49页
   ·pMB-Lac△P Tet和pMB-Lac△P T7-Tet重组质粒的构建第49-51页
   ·pMBL△PTet和pMB-Ara△PTet重组质粒的构建第51页
   ·pMB-Lac载体调控性验证第51-52页
   ·pMB-Ara载体验证第52-54页
   ·重组质粒稳定性分析第54页
 4 讨论第54-57页
第四章 多杀性巴氏杆菌跨膜蛋白基因的克隆和分析第57-74页
 1 材料第57-58页
 2 方法第58-65页
 3 结果第65-72页
   ·C48-19基因组部分酶切片段的回收第65页
   ·转化重组子的筛选和PCR扩增插入基因片段第65-66页
   ·杂交分析差异表达的膜蛋白基因片段第66-67页
   ·PCR和酶切鉴定筛选获得的克隆子第67-68页
   ·19~#和88~#克隆诱导生长特性验证第68-69页
   ·膜蛋白基因片段的测序和分析第69-71页
   ·编码肽链的信号肽预测分析第71-72页
 4 讨论第72-74页
本研究的主要结论和创新点第74-75页
参考文献第75-83页

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