蒙古鲌ob基因克隆及表达
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| 1．1 ob基因概念及其结构 | 第8页 |
| 1．2 瘦素概念和结构 | 第8-9页 |
| 1．3 瘦素生物学功能 | 第9-13页 |
| 1．3．1 瘦素与摄食调控 | 第9页 |
| 1．3．2 瘦素与影响食欲的肽类关系 | 第9-10页 |
| 1．3．3 瘦素与繁殖 | 第10页 |
| 1．3．4 瘦素与免疫 | 第10-12页 |
| 1．3．5 瘦素与骨量变化 | 第12页 |
| 1．3．6 瘦素与肥胖 | 第12页 |
| 1．3．7 影响瘦素分泌的因素 | 第12-13页 |
| 1．3．8 瘦素作用机制和信号转导途径 | 第13页 |
| 1．4 瘦素受体(ob-R) | 第13-14页 |
| 1．4．1 瘦素受体结构 | 第13-14页 |
| 1．4．2 leptin受体表达部位及功能 | 第14页 |
| 1．4．3 leptin受体生物学功能 | 第14页 |
| 1．5 与肥胖相关的基因与蛋白 | 第14-15页 |
| 1．6 研究展望 | 第15-16页 |
| 2 目的与意义 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-25页 |
| 3．1 材料 | 第17页 |
| 3．1．1 试验鱼 | 第17页 |
| 3．1．2 试验细菌 | 第17页 |
| 3．1．3 质粒和载体 | 第17页 |
| 3．2 重要仪器设备 | 第17页 |
| 3．3 主要生化试剂 | 第17页 |
| 3．4 主要试剂及溶液的配制 | 第17-20页 |
| 3．5 技术路线 | 第20-21页 |
| 3．6 方法 | 第21-25页 |
| 3．6．1 RNA提取 | 第21页 |
| 3．6．2 RT-PCR | 第21页 |
| 3．6．3 DNA纯化回收 | 第21-22页 |
| 3．6．4 RT-PCR产物克隆与测序 | 第22页 |
| 3．6．5 PCR扩增 | 第22页 |
| 3．6．6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 3．6．7 质粒的小量制备 | 第23页 |
| 3．6．8 ob基因的序列同源性分析 | 第23页 |
| 3．6．9 ob基因的原核表达 | 第23-24页 |
| 3．6．10 ob基因的组织表达特异性 | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-29页 |
| 4．1 ob基因克隆 | 第25-27页 |
| 4．1．1 RNA提取物 | 第25页 |
| 4．1．2 RT-PCR结果 | 第25页 |
| 4．1．3 克隆鉴定 | 第25-26页 |
| 4．1．4 测序结果及核苷酸同源性比较 | 第26-27页 |
| 4．1．5 leptin蛋白氨基酸序列同源性比较 | 第27页 |
| 4．2 ob基因的原核表达 | 第27-28页 |
| 4．3 ob基因的组织表达特异性 | 第28-29页 |
| 5 讨论 | 第29-32页 |
| 5．1 基因的克隆 | 第29-30页 |
| 5．2 序列分析 | 第30页 |
| 5．3 原核表达 | 第30-31页 |
| 5．4 组织表达特异性 | 第31-32页 |
| 小结 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
