摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
本文所用英文缩写词表 | 第10-11页 |
第1章 绪论 | 第11-25页 |
1.1 检测m RNA 的常用方法 | 第11-16页 |
1.1.1 RT-PCR 方法 | 第11-12页 |
1.1.2 实时荧光定量 PCR 方法 | 第12页 |
1.1.3 传统核酸探针法 | 第12-13页 |
1.1.4 基因芯片方法 | 第13-16页 |
1.2 分子信标在核酸研究的应用 | 第16-22页 |
1.2.1 分子信标设计和作用原理 | 第16-18页 |
1.2.2 PCR 分子信标法测定靶DNA/RNA 的浓度 | 第18页 |
1.2.3 利用多色分子信标分析基因突变、SNP、多组分同时测定 | 第18-19页 |
1.2.4 痕量DNA/m RNA 的分离和检测 | 第19-20页 |
1.2.5 活体细胞内mRNA 表达的实时监测 | 第20-21页 |
1.2.6 DNA 转录过程的体外实时监测 | 第21页 |
1.2.7 核酸磷酸化的实时监测 | 第21-22页 |
1.2.8 DNA 传感器和生物芯片 | 第22页 |
1.3 本文拟开展的工作 | 第22-25页 |
第2章 分子信标快速检测p21m RNA 的方法 | 第25-38页 |
2.1 前言 | 第25-26页 |
2.2 实验部分 | 第26-30页 |
2.2.1 分子信标检测mRNA 表达水平的实验原理 | 第26-27页 |
2.2.2 试剂和仪器 | 第27-28页 |
2.2.3 实验方法 | 第28-30页 |
2.3 结果与讨论 | 第30-37页 |
2.3.1 p33~(ING1)高表达的HNE1 细胞系模型的建立和鉴定 | 第30-31页 |
2.3.2 建立p21 分子信标/cDNA 标准曲线 | 第31-34页 |
2.3.3 考察各种因素对于mRNA/p21 分子信标杂交影响 | 第34-35页 |
2.3.4 p21 分子信标定量检测鼻咽癌细胞中p21 m RNA 水平 | 第35-37页 |
2.3.5 RT-PCR 验证p21 信标检测方法的准确性 | 第37页 |
2.4 小结 | 第37-38页 |
第3章 p33~(ING1)高表达对人鼻咽癌细胞增殖的影响研究 | 第38-50页 |
3.1 前言 | 第38页 |
3.2 实验部分 | 第38-42页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第38-40页 |
3.2.2 实验方法 | 第40-42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-49页 |
3.3.1 p33~(ING1)高表达的抑制HNE1 细胞的生长 | 第42页 |
3.3.2 应用分子信标检测细胞中p33~(ING1) mRNA 的表达水平 | 第42-44页 |
3.3.3 免疫组化实验方法确定细胞中p53 蛋白的分布情况 | 第44页 |
3.3.4 分子信标用于固定化细胞中p33~(ING1) mRNA 表达成像 | 第44-45页 |
3.3.5 p33~(ING1)高表达促使细胞周期停滞于G_1 期 | 第45-46页 |
3.3.6 p33~(ING1)高表达促进细胞周期相关蛋白表达水平上调 | 第46-48页 |
3.3.7 p33~(ING1)高表达抑制细胞的侵袭转移能力 | 第48-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
第4章 p33~(ING1)高表达增强鼻咽癌HNE1 细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性 | 第50-61页 |
4.1 前言 | 第50-51页 |
4.2 实验部分 | 第51-53页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第51页 |
4.2.2 实验方法 | 第51-53页 |
4.3 结果与讨论 | 第53-60页 |
4.3.1 p33~(ING1) mRNA 的表达水平与5-FU 处理浓度和时间成正相关性.. | 第53-55页 |
4.3.2 p33~(ING1)高表达增强细胞对5-FU 敏感性 | 第55-57页 |
4.3.3 p33~(ING1)高表达促进5-FU 诱导的细胞凋亡 | 第57-59页 |
4.3.4 p33~(ING1)高表达促进抑癌蛋白表达水平并抑制原癌蛋白表达水平 | 第59-60页 |
4.4 小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第69页 |