摘要 | 第1-5页 |
1 文献综述 | 第5-20页 |
1.1 卤虫相关基因的研究和生物学特征 | 第5-15页 |
1.1.1 卤虫相关基因的研究 | 第5-7页 |
1.1.2 卤虫分子生物学方面的研究 | 第7-9页 |
1.1.3 卤虫的生物学特征 | 第9-15页 |
1.1.4 卤虫研究存在的问题 | 第15页 |
1.2 克隆新基因的常用方法 | 第15-20页 |
1.2.1 序列克隆法 | 第15-16页 |
1.2.2 功能克隆法 | 第16页 |
1.2.3 cDNA文库的构建与全长cDNA的克隆 | 第16页 |
1.2.4 基因表达的序列分析 | 第16-17页 |
1.2.5 消减杂交和抑制消减杂交 | 第17页 |
1.2.6 外显子捕捉 | 第17-18页 |
1.2.7 mRNA差异显示 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 材料 | 第20-23页 |
2.1.1 卤虫孵化及培养条件 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-30页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 总 RNA模板的纯化 | 第24页 |
2.2.3 RNA分子量和浓度的测定 | 第24页 |
2.2.4 反转录 | 第24-25页 |
2.2.5 PCR扩增和产物的凝胶电泳 | 第25页 |
2.2.6 硝酸银染色和差异条带的回收 | 第25-26页 |
2.2.7 成像 | 第26页 |
2.2.8 差异条带的回收 | 第26页 |
2.2.9 差异条带的再扩增 | 第26-27页 |
2.2.10 差异条带的纯化 | 第27页 |
2.2.11 差异片段的克隆 | 第27-28页 |
2.2.12 克隆片断的筛选 | 第28页 |
2.2.13 克隆片断的富集 | 第28-29页 |
2.2.14 质粒的提取 | 第29页 |
2.2.15 差异片段的测序 | 第29页 |
2.2.16 RT-PCR和测序验证 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-43页 |
3.1 总RNA的质量 | 第30页 |
3.2 差异显示PCR结果 | 第30-31页 |
3.3 序列结果及同源性分析 | 第31-42页 |
3.3.1 Seq1 Query=(866 letters) | 第32-37页 |
3.3.2 Seq2 Query=(301 letters) | 第37-39页 |
3.3.3 Seq3 Query=(626 letters) | 第39-40页 |
3.3.4 Seq4 Query=(468 letters) | 第40-42页 |
3.4 RT-PCR和测序验证 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-55页 |
4.1 序列同源性比较结果的分析 | 第43-52页 |
4.1.1 序列结果的分析 | 第43页 |
4.1.2 同源性比较结果分析 | 第43-52页 |
4.2 差异显示方法的改进 | 第52-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
Abstract | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
学位论文独创性声明 | 第68页 |
学位论文版权的使用授权书 | 第68页 |