摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-22页 |
·Bt 作物种植现状 | 第14页 |
·苏云金芽孢杆菌及其作用机制 | 第14-18页 |
·Bt 毒素作用机制 | 第15页 |
·中肠蛋白酶与 Bt 毒素的相互作用 | 第15-16页 |
·营养期杀虫蛋白概述 | 第16-17页 |
·营养期杀虫蛋白 Vip3Aa 的作用机制 | 第17-18页 |
·靶标害虫的抗性问题及其原因 | 第18-20页 |
·抗性现状 | 第18-19页 |
·抗性产生的机制 | 第19-20页 |
·昆虫中肠受体蛋白的研究进展 | 第20页 |
·害虫抗性治理策略 | 第20-21页 |
·传统的害虫抗性治理策略 | 第20页 |
·现代害虫抗性治理策略 | 第20-21页 |
·本论文的研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 研究内容及技术路线 | 第22-23页 |
·研究内容 | 第22页 |
·研究技术路线 | 第22-23页 |
第三章 Vip3Aa、Cry1Ac 对棉铃虫的杀虫活性及活化特性比较 | 第23-30页 |
·材料与方法 | 第23-26页 |
·供试虫源与菌株 | 第23页 |
·供试药剂及器材 | 第23-24页 |
·部分试剂及缓冲液的配制 | 第24页 |
·Vip3Aa 的诱导表达 | 第24页 |
·Vip3Aa 的纯化 | 第24页 |
·纯化蛋白中高浓度咪唑的去除 | 第24-25页 |
·Cry1Ac 蛋白的提取与活化 | 第25页 |
·生物测定杀虫活性方法 | 第25页 |
·胰蛋白酶对 Vip3Aa 和 Cry1Ac 的酶解 | 第25页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第25页 |
·蛋白含量测定 | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-28页 |
·Vip3Aa 的诱导表达与纯化 | 第26页 |
·Cry1Ac 蛋白和 Vip3Aa 蛋白的消化 | 第26-27页 |
·Vip3Aa 和 Cry1Ac 对棉铃虫幼虫的致死效果及 96-3A 抗性倍数分析 | 第27页 |
·胰蛋白酶对 Vip3Aa 和 Cry1Ac 蛋白的酶解比较 | 第27-28页 |
·结论与讨论 | 第28-30页 |
第四章 棉铃虫取食 Vip3Aa 蛋白后的中肠组织病理变化 | 第30-37页 |
·材料与方法 | 第30-31页 |
·供试虫源和菌株 | 第30页 |
·取样 | 第30页 |
·电镜观察 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31页 |
·棉铃虫中肠组织超微结构的变化 | 第31页 |
·不同毒蛋白对棉铃虫中肠的组织病理学影响 | 第31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
附图 | 第33-37页 |
第五章 Vip3Aa、Cry1Ac 对棉铃虫幼虫多种酶活力影响 | 第37-46页 |
·材料与方法 | 第37-39页 |
·供试材料与仪器 | 第37-38页 |
·部分试剂的配制 | 第38-39页 |
·样品制备 | 第39页 |
·几种主要酶活性的测定 | 第39-40页 |
·总蛋白酶活性测定 | 第39页 |
·类胰蛋白酶活性测定 | 第39页 |
·类胰凝乳蛋白酶活性测定 | 第39页 |
·α-乙酸萘酯酶活力测定 | 第39页 |
·谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活力测定(微量板酶动力学法) | 第39-40页 |
·氨肽酶活性测定 | 第40页 |
·可溶性总蛋白含量测定 | 第40页 |
·结果分析 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-44页 |
·对总蛋白酶活性的影响 | 第40-41页 |
·对类胰蛋白酶活性的影响 | 第41-42页 |
·对类胰凝乳蛋白酶活性的影响 | 第42页 |
·对 -乙酸萘酯酶活性的影响 | 第42-43页 |
·对谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响 | 第43-44页 |
·对氨肽酶活性的影响 | 第44页 |
·结论与讨论 | 第44-46页 |
第六章 Vip3Aa 耐性、敏感品系棉铃虫中肠结合蛋白的比较 | 第46-51页 |
·材料与方法 | 第46-47页 |
·供试昆虫 | 第46页 |
·供试药剂及器材 | 第46-47页 |
·试剂及缓冲液的配制 | 第47页 |
·提取 BBMV | 第47页 |
·蛋白浓度测定 | 第47页 |
·双向电泳 | 第47页 |
·考染 | 第47页 |
·银染 | 第47页 |
·实验结果 | 第47-49页 |
·提取 BBMV | 第47-48页 |
·抗、感品系棉铃虫 BBMV 蛋白的分离 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
第七章 讨论 | 第51-53页 |
·本文结论 | 第51-52页 |
·有待进一步开展的工作 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |