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Vip3Aa毒杀棉铃虫的生理生化机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 绪论第14-22页
   ·Bt 作物种植现状第14页
   ·苏云金芽孢杆菌及其作用机制第14-18页
     ·Bt 毒素作用机制第15页
     ·中肠蛋白酶与 Bt 毒素的相互作用第15-16页
     ·营养期杀虫蛋白概述第16-17页
     ·营养期杀虫蛋白 Vip3Aa 的作用机制第17-18页
   ·靶标害虫的抗性问题及其原因第18-20页
     ·抗性现状第18-19页
     ·抗性产生的机制第19-20页
   ·昆虫中肠受体蛋白的研究进展第20页
   ·害虫抗性治理策略第20-21页
     ·传统的害虫抗性治理策略第20页
     ·现代害虫抗性治理策略第20-21页
   ·本论文的研究目的和意义第21-22页
第二章 研究内容及技术路线第22-23页
   ·研究内容第22页
   ·研究技术路线第22-23页
第三章 Vip3Aa、Cry1Ac 对棉铃虫的杀虫活性及活化特性比较第23-30页
   ·材料与方法第23-26页
     ·供试虫源与菌株第23页
     ·供试药剂及器材第23-24页
     ·部分试剂及缓冲液的配制第24页
     ·Vip3Aa 的诱导表达第24页
     ·Vip3Aa 的纯化第24页
     ·纯化蛋白中高浓度咪唑的去除第24-25页
     ·Cry1Ac 蛋白的提取与活化第25页
     ·生物测定杀虫活性方法第25页
     ·胰蛋白酶对 Vip3Aa 和 Cry1Ac 的酶解第25页
     ·SDS-PAGE 电泳第25页
     ·蛋白含量测定第25-26页
   ·结果与分析第26-28页
     ·Vip3Aa 的诱导表达与纯化第26页
     ·Cry1Ac 蛋白和 Vip3Aa 蛋白的消化第26-27页
     ·Vip3Aa 和 Cry1Ac 对棉铃虫幼虫的致死效果及 96-3A 抗性倍数分析第27页
     ·胰蛋白酶对 Vip3Aa 和 Cry1Ac 蛋白的酶解比较第27-28页
   ·结论与讨论第28-30页
第四章 棉铃虫取食 Vip3Aa 蛋白后的中肠组织病理变化第30-37页
   ·材料与方法第30-31页
     ·供试虫源和菌株第30页
     ·取样第30页
     ·电镜观察第30-31页
   ·结果与分析第31页
     ·棉铃虫中肠组织超微结构的变化第31页
     ·不同毒蛋白对棉铃虫中肠的组织病理学影响第31页
   ·讨论第31-33页
 附图第33-37页
第五章 Vip3Aa、Cry1Ac 对棉铃虫幼虫多种酶活力影响第37-46页
   ·材料与方法第37-39页
     ·供试材料与仪器第37-38页
     ·部分试剂的配制第38-39页
     ·样品制备第39页
   ·几种主要酶活性的测定第39-40页
     ·总蛋白酶活性测定第39页
     ·类胰蛋白酶活性测定第39页
     ·类胰凝乳蛋白酶活性测定第39页
     ·α-乙酸萘酯酶活力测定第39页
     ·谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活力测定(微量板酶动力学法)第39-40页
     ·氨肽酶活性测定第40页
     ·可溶性总蛋白含量测定第40页
     ·结果分析第40页
   ·结果与分析第40-44页
     ·对总蛋白酶活性的影响第40-41页
     ·对类胰蛋白酶活性的影响第41-42页
     ·对类胰凝乳蛋白酶活性的影响第42页
     ·对 -乙酸萘酯酶活性的影响第42-43页
     ·对谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响第43-44页
     ·对氨肽酶活性的影响第44页
   ·结论与讨论第44-46页
第六章 Vip3Aa 耐性、敏感品系棉铃虫中肠结合蛋白的比较第46-51页
   ·材料与方法第46-47页
     ·供试昆虫第46页
     ·供试药剂及器材第46-47页
     ·试剂及缓冲液的配制第47页
     ·提取 BBMV第47页
     ·蛋白浓度测定第47页
     ·双向电泳第47页
     ·考染第47页
     ·银染第47页
   ·实验结果第47-49页
     ·提取 BBMV第47-48页
     ·抗、感品系棉铃虫 BBMV 蛋白的分离第48-49页
   ·讨论第49-51页
第七章 讨论第51-53页
   ·本文结论第51-52页
   ·有待进一步开展的工作第52-53页
参考文献第53-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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