第一部分 文献综述 | 第1-46页 |
第一章 禽类的原始生殖细胞(PGCs)的生物学特性 | 第13-22页 |
1 PGCs的特征和类型 | 第13-14页 |
2 PGCs的起源 | 第14-16页 |
3 PGCs的迁移规律 | 第16-19页 |
·1PGCs的迁移路径 | 第16-17页 |
·PGCs迁移机制 | 第17-19页 |
4 原始生殖细胞的培养 | 第19-20页 |
·原始生殖细胞的分离 | 第19页 |
·原始生殖细胞的冷冻保存 | 第19页 |
·原始生殖细胞的体外培养 | 第19-20页 |
5 禽类的性别决定和性别分化 | 第20-22页 |
·性别决定 | 第20-21页 |
·性别分化 | 第21-22页 |
第二章 禽类胚胎工程 | 第22-28页 |
1 禽类胚胎体外培养 | 第22-24页 |
·早期的器皿培养 | 第22页 |
·代用壳体系 | 第22-23页 |
·三期培养体系 | 第23-24页 |
2 禽类嵌和体的制备 | 第24-28页 |
·原始生殖细胞嵌合体 | 第24-25页 |
·种间嵌和体的制备 | 第25-26页 |
·嵌合体研究中存在的问题 | 第26-28页 |
第三章 禽类的转基因策略 | 第28-40页 |
1 生产转基因家禽的意义 | 第29-30页 |
2 转基因鸡研究方法 | 第30-36页 |
·种蛋产出体外前的遗传操作 | 第31-33页 |
·胚胎期的转染 | 第33-35页 |
·嵌合体法制备转基因鸡 | 第35-36页 |
·体内转移法 | 第36页 |
3 转基因动物的检测 | 第36-38页 |
·Southern杂交 | 第37页 |
·斑点杂交 | 第37页 |
·PCR的检测方法 | 第37-38页 |
·染色体原位杂交 | 第38页 |
4 禽类转基因研究存在的问题 | 第38页 |
5 展望 | 第38-40页 |
第四章 异种动物核移植研究进展 | 第40-46页 |
1 动物克隆的三个阶段 | 第40-41页 |
·胚胎细胞克隆阶段 | 第40页 |
·同种体细胞克隆阶段 | 第40-41页 |
·异种体细胞克隆阶段 | 第41页 |
2 异种动物克隆 | 第41-43页 |
·核质之间的相容性 | 第41-42页 |
·重构胚胎的线粒体命运 | 第42-43页 |
3 异种动物核移植的应用 | 第43-45页 |
·农业领域 | 第43页 |
·医学领域 | 第43-44页 |
·动物保护 | 第44-45页 |
4 展望 | 第45-46页 |
第二部分 试验研究 | 第46-93页 |
第一章 鸡PGCs迁移的生物学特性 | 第47-66页 |
1 引言 | 第47-48页 |
2 材料与方法 | 第48-53页 |
·材料 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-53页 |
3 结果 | 第53-62页 |
·抗体检测迁移过程中的鸡胚原始生殖细胞 | 第53-56页 |
·不同性别的白来航鸡早期胚胎发育阶段PGCs的含量比较 | 第56-59页 |
·微注射对鸡胚胎性腺中PGCs数量的影响 | 第59-62页 |
4 讨论 | 第62-66页 |
·PGCs的迁移规律迁移以及过程中的分子标记 | 第63-64页 |
·不同性别的鸡原始生殖细胞的差异 | 第64页 |
·血管微注射操作对胚胎生存的影响 | 第64页 |
·窗式培养的优点 | 第64-66页 |
第二章 质粒转染血液循环期PGCs制备转基因鸡 | 第66-84页 |
1 引言 | 第66页 |
2 材料和方法 | 第66-72页 |
·材料 | 第66-68页 |
·方法 | 第68-72页 |
3 结果 | 第72-80页 |
·胚胎注射质粒后窗式培养对鸡胚成活率的影响 | 第72-74页 |
·胚胎窗式培养过程中胚胎的检测 | 第74页 |
·GO代血液样品DNA的PCR检测 | 第74-75页 |
·G1代血液样品DNA的PCR检测 | 第75-76页 |
·扩增的G1目的片段的测序 | 第76-78页 |
·Southern斑点杂交 | 第78-79页 |
·G1代胚胎在荧光显微镜下的观察结果 | 第79-80页 |
4 讨论 | 第80-84页 |
·转基因的方法 | 第80-81页 |
·转基因的效率 | 第81-82页 |
·检测外源基因的方法 | 第82-84页 |
第三章 鸡-兔异种动物的核移植法制备转基因鸡 | 第84-93页 |
1 引言 | 第84页 |
2 材料和方法 | 第84-86页 |
·材料 | 第84-85页 |
·方法 | 第85-86页 |
3 结果 | 第86-91页 |
·克隆胚胎的体外发育 | 第86-88页 |
·重构胚胎的核DNA分析和线粒体DNA分析 | 第88-90页 |
·重构胚胎的免疫组化鉴定 | 第90-91页 |
4 讨论 | 第91-93页 |
·核质相互作用 | 第91页 |
·线粒体的存在方式 | 第91页 |
·胚胎发育早期的分子标记 | 第91-93页 |
研究结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
个人简历 | 第110页 |