致谢 | 第1-4页 |
目录 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
本文所用缩写说明 | 第9-10页 |
1 、 前言 | 第10-22页 |
·、 花生遗传育种及遗传工程的研究进展 | 第10-15页 |
·、 花生抗虫、耐除草剂基因工程对花生育种研究的意义 | 第10-11页 |
·、 花生遗传育种研究进展 | 第11-12页 |
·、 花生遗传转化的研究进展 | 第12-15页 |
·、 植物遗传转化辅助方法的研究进展 | 第15-16页 |
·、 转基因植株的鉴定 | 第16-20页 |
·、 植物基因组DNA的提取 | 第16-17页 |
·、 质粒DNA的提取 | 第17-19页 |
·、 PCR检测 | 第19-20页 |
·、 PCR-Southern杂交检测 | 第20页 |
·、 本实验的研究目的及意义 | 第20-22页 |
2 、 不同花生品种植株离体再生的比较及花生高频离体再生体系的完善 | 第22-29页 |
·、 材料 | 第22页 |
·、 实验方法 | 第22-23页 |
·、 70%酒精和0.1%升汞不同处理时间的灭菌效果及其对种子萌发的影响 | 第22页 |
·、 MS和1/2MS培养基对不同品种种子萌发的影响 | 第22页 |
·、 4种培养基对不同品种叶段芽诱导的影响 | 第22页 |
·、 活性炭对花生再生苗生根的影响 | 第22-23页 |
·、 培养条件 | 第23页 |
·、 再生苗移栽培养 | 第23页 |
·、 实验结果与讨论 | 第23-28页 |
·、 酒精和升汞的灭菌效果及其对种子萌发的影响 | 第23-24页 |
·、 不同品种种子在2种培养基中的萌发 | 第24-25页 |
·、 不同品种叶外段外植体芽的诱导 | 第25-26页 |
·、 活性炭对花生再生苗生根的影响 | 第26-27页 |
·、 花生再生苗的移栽 | 第27-28页 |
·、 小结 | 第28-29页 |
3 、 农杆菌介导的花生遗传转化的研究 | 第29-50页 |
·、 实验材料 | 第29-31页 |
·、 花生品种 | 第29页 |
·、 农杆菌菌株 | 第29页 |
·、 培养基 | 第29页 |
·、 用于抗虫性实验的昆虫种类 | 第29页 |
·、 昆虫饲料的配制 | 第29-30页 |
·、 试剂配制: | 第30-31页 |
·、 实验方法: | 第31-38页 |
·、 外植体的获得及菌株的培养 | 第31页 |
·、 花生叶段对抗生素Cb和Cef的敏感性试验 | 第31-32页 |
·、 筛选剂PPT筛选时期对花生叶段转化的影响 | 第32页 |
·、 3种不同方法提取质粒pCB302-3 | 第32-33页 |
·、 外源基因的分子检测 | 第33-34页 |
·、 PCR法标记探针 | 第34-35页 |
·、 斑点杂交(标记探针的定量分析) | 第35-36页 |
·、 外源基因的Southern杂交检测 | 第36-38页 |
·、 转基因植株后代的抗虫性分析 | 第38页 |
·、 转基因植株后代(T_1代)的分子检测 | 第38页 |
·、 实验结果与分析 | 第38-47页 |
·、 花生叶段对抗生素和草丁膦的敏感性试验 | 第38-40页 |
·、 三种方法提取的质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳比较 | 第40-41页 |
·、 三种方法提取的质粒DNA PCR特异性扩增结果比较 | 第41页 |
·、 转化植株的PCR检测结果 | 第41-42页 |
·、 探针标记电泳结果 | 第42-43页 |
·、 斑点杂交(探针定量分析)结果 | 第43页 |
·、 转化植株的Southern杂交分析结果 | 第43-44页 |
·、 转基因植株的抗虫性分析 | 第44-45页 |
·、 转基因后代(T_1代)植株的分子检测 | 第45-47页 |
·、 讨论 | 第47-50页 |
·、 质粒DNA的提取 | 第47页 |
·、 PCR法生物素标记探针 | 第47-48页 |
·、 Southern杂交 | 第48-49页 |
·、 农杆菌介导的花生遗传转化 | 第49-50页 |
4 、 负压和超声波辅助的农杆菌介导的花生遗传转化研究 | 第50-56页 |
·、 材料、培养基及试剂的配制 | 第50页 |
·、 实验方法 | 第50-51页 |
·、 负压处理辅助花生遗传转化 | 第50页 |
·、 超声波辅助农杆菌介导的转化(Sonication-assisted Agrobacterium-mediated transformation,SAAT) | 第50-51页 |
·、 实验结果与讨论 | 第51-55页 |
·、 不同程度负压处理对外植体芽诱导的影响 | 第51页 |
·、 不同辅助转化处理方式对转化的影响 | 第51-52页 |
·、 超声波处理时间对花生外植体分化的影响 | 第52-53页 |
·、 SAAT转化花生及若干因素的影响 | 第53-54页 |
·、 转基因植株的PCR检测结果 | 第54-55页 |
·、 小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |