| 摘要(中文) | 第1-11页 |
| 摘要(英文) | 第11-18页 |
| 文献综述 | 第18-38页 |
| 第一部分 | 第18-33页 |
| 1 牛遗传图谱和比较基因图谱作图进展 | 第18-22页 |
| ·牛遗传连锁图谱作图 | 第18-20页 |
| ·牛遗传连锁图谱的分子遗传标记类型 | 第18-19页 |
| ·第一代全基因组遗传连锁图谱 | 第19页 |
| ·第二代全基因组遗传连锁图谱 | 第19-20页 |
| ·SNP标记连锁图谱的构建 | 第20页 |
| ·比较基因图谱 | 第20-22页 |
| ·构建比较基因图谱的理论依据和作用 | 第20-21页 |
| ·比较作图的方法 | 第21-22页 |
| ·牛比较基因图谱作图进展 | 第22页 |
| 2 生物统计方法 | 第22-23页 |
| 3 奶牛和肉牛经济性状QTL检测研究现状 | 第23-33页 |
| ·奶牛经济性状QTL作图研究现状 | 第23-27页 |
| ·奶牛经济性状QTL作图的试验设计 | 第23-24页 |
| ·奶牛重要经济性状QTL作图工作取得的成绩 | 第24-27页 |
| ·肉牛经济性状QTL作图现状 | 第27-28页 |
| ·肉牛QTL作图研究中资源群体的建立 | 第27-28页 |
| ·肉牛QTL作图的研究现状 | 第28页 |
| ·牛经济性状QTL检测方法的改进 | 第28-30页 |
| ·奶牛采样方法的改进 | 第28页 |
| ·基因型测定数量的改进 | 第28-29页 |
| ·基因型测定方法的改进 | 第29页 |
| ·QTL的精细定位 | 第29页 |
| ·侯选基因法检测QTL | 第29-30页 |
| ·利用侯选基因方法检测奶牛和肉牛经济性状QTL的研究现状 | 第30-33页 |
| ·利用侯选基因方法检测奶牛产奶性状QTL的研究现状 | 第30-32页 |
| ·肉牛经济性状QTL检测的侯选基因 | 第32-33页 |
| 第二部分 DGAT1和DGAT2基因的研究概况 | 第33-38页 |
| 1 DGAT1基因的研究概况 | 第33-36页 |
| ·DGAT1在生物体内的功能 | 第34-35页 |
| ·不同生物的DGAT1的氨基酸序列长度 | 第35页 |
| ·牛DGAT1基因序列的克隆 | 第35-36页 |
| ·牛DGAT1基因多态性与牛经济性状的关系研究 | 第36页 |
| ·牛DGAT1基因K232A与乳脂率相关的验证 | 第36页 |
| 2 DGAT2基因的发现和基因克隆 | 第36-38页 |
| 正文 | 第38-99页 |
| 第一部分 牛DGAT2基因克隆 | 第38-55页 |
| 引言 | 第38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·菌株和载体 | 第38页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·主要试剂的配制 | 第39页 |
| ·引物的设计思路和方法 | 第39-41页 |
| ·肝脏RNA的提取 | 第41页 |
| ·反转录 | 第41-42页 |
| ·牛血液基因组DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·PCR扩增的反应体系和反应程序 | 第43页 |
| ·PCR产物的克隆测序 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-53页 |
| ·牛肝脏mRNA的纯度检测 | 第43页 |
| ·牛基因组DNA样品的检测 | 第43页 |
| ·牛DGAT2基因5′-RACE和3′-RACE结果 | 第43-53页 |
| ·3′-RACE及测序结果 | 第43-45页 |
| ·5′-RACE结果与分析 | 第45页 |
| ·牛DGAT2基因第3内含子克隆结果 | 第45-46页 |
| ·牛DGAT2基因第5内含子克隆的结果和分析 | 第46-48页 |
| ·牛DGAT2基因第6内含子克隆的结果 | 第48-50页 |
| ·牛DGAT2基因第7内含子克隆的结果与分析 | 第50-52页 |
| ·牛DGAT2基因第四内含子扩增电泳检测 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| ·3′-RACE和5′-RACE | 第53页 |
| ·牛DGAT2基因内含子的克隆 | 第53页 |
| ·牛DGAT2基因mRNA3′末端和部分内含子与人、小鼠和大鼠的相似性讨论 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 第二部分 DGAT1和DGAT2基因多态性与牛部分经济性状关系的研究 | 第55-90页 |
| 引 言 | 第55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-62页 |
| ·材料 | 第55-57页 |
| ·实验动物 | 第55-56页 |
| ·载体与菌株 | 第56页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第56-57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-61页 |
| ·采样 | 第57页 |
| ·牛肉大理石纹的评定和牛肉嫩度的测定 | 第57页 |
| ·主要试剂的配制 | 第57-58页 |
| ·引物设计 | 第58页 |
| ·PCR反应体系和反应程序 | 第58-59页 |
| ·PCR产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第59-60页 |
| ·引物PI5、PI6和PI7 PCR产物的限制性内切酶消化 | 第60-61页 |
| ·PCR产物的克隆测序 | 第61页 |
| ·统计分析 | 第61-62页 |
| ·基因频率和基因型频率的计算 | 第61页 |
| ·基因和基因型频率的差异显著性检验 | 第61页 |
| ·统计分析模型 | 第61-62页 |
| 2 结果 | 第62-84页 |
| ·牛基因组DNA样品的检测 | 第62页 |
| ·牛DGAT1基因和DGAT2基因多态性检测结果 | 第62-73页 |
| ·引物PN3 PCR产物凝胶电泳检测及SSCP检测结果 | 第62-64页 |
| ·牛DGAT2基因多态性检测结果 | 第64-73页 |
| ·侯选基因座多态性及其与牛部分经济性状相关性分析 | 第73-84页 |
| ·牛DGAT1基因第8外显子SSCP多态性牛部分经济性状相关性分析 | 第73-77页 |
| ·牛DGAT2基因第6内含子MspI酶切多态性及其与牛性状相关性分析 | 第77-79页 |
| ·牛DGAT2基因第6内含子TaqI酶切多态性与鲁西牛经济性状相关性分析 | 第79-80页 |
| ·牛DGAT2基因第3内含子多态性及其与牛部分经济性状的相关性分析 | 第80-82页 |
| ·牛DGAT2基因第8外显子多态性牛部分经济性状的相关性分析 | 第82-84页 |
| 3 讨论 | 第84-88页 |
| ·DGAT1基因第8外显子SSCP基因型分布频率 | 第84-86页 |
| ·DGAT1基因第8外显子双碱基aa→gc取代的检测方法 | 第84页 |
| ·DGAT1基因第8外显子多态性与牛部分经济性状的影响 | 第84-85页 |
| ·DGAT1基因K232A取代与物种及牛品种进化的关系 | 第85页 |
| ·DGAT1基因第8外显子的两个等位基因在不同群体中的分布频率 | 第85-86页 |
| ·DGAT2基因多态性等位基因频率分布及与牛部分经济性状关系 | 第86-87页 |
| ·DGAT2基因部分座为多态性等位基因频率分布 | 第86-87页 |
| ·DGAT2基因部分座为多态性与生产性状的相关性 | 第87页 |
| ·不同品种多态性信息含量的讨论 | 第87页 |
| ·牛经济性状座位检测研究中所面临的问题 | 第87-88页 |
| 4 结论 | 第88-90页 |
| ·DGAT1基因第8外显子多态性及其与牛部分经济性状的相关性 | 第88页 |
| ·DGAT2基因多态性及其与牛部分经济性状的相关性 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-99页 |
| 附录 | 第99-148页 |
| 附录Ⅰ.DNA提取相关试剂的配制 | 第99-100页 |
| 附录Ⅱ.琼脂糖电泳所用的有关试剂的配制 | 第100页 |
| 附录Ⅲ.RNA的提取和纯度检测 | 第100-101页 |
| 附录Ⅳ.PCR扩增的反应体系和反应程序 | 第101页 |
| 附录Ⅴ.转化所用的相关试剂 | 第101-103页 |
| 附录Ⅵ.牛血液基因组DNA的提取方法及检测 | 第103-104页 |
| 附录Ⅶ.PCR产物的纯化和克隆测序 | 第104-107页 |
| 附录Ⅷ.聚丙烯凝胶电泳所用的相关试剂的配制 | 第107-108页 |
| 附录Ⅸ.酶切反应体系 | 第108页 |
| 附录Ⅹ.牛肉大理石纹的评定和牛肉嫩度的测定 | 第108-148页 |
