中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
前言 | 第9-12页 |
第一部分 细胞表面钙调素结合位点(CaMBS)的免疫电镜定位 | 第12-25页 |
材料与方法 | 第12-15页 |
一、 主要实验仪器及试剂 | 第12-13页 |
二、 rhCaM的提取及纯化 | 第13-14页 |
三、 胶体金标记rhCaM、BSA的制备 | 第14页 |
四、 外周血单个核细胞的分离和预处理 | 第14页 |
五、 肿瘤细胞的培养和处理 | 第14-15页 |
六、 动物细胞表面CaMBS的免疫电镜定位 | 第15页 |
七、 卡介苗菌细胞壁CaMBS的免疫电镜定位 | 第15页 |
结果 | 第15-23页 |
一、 外周血单个核淋巴细胞表面的CaMBS | 第15-19页 |
二、 小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)表面的CaMBS | 第19页 |
三、 人胃癌细胞(MGC803)表面的CaMBS | 第19-21页 |
四、 卡介苗菌表面的CaMBS | 第21-23页 |
讨论 | 第23-25页 |
第二部分 钙调素定量ELISA方法的建立与初步应用 | 第25-33页 |
材料与方法 | 第25-27页 |
一、 主要实验仪器及试剂 | 第25页 |
二、 研究对象 | 第25-26页 |
三、 外周血单个核细胞的分离和裂解 | 第26页 |
四、 聚苯乙烯反应板的处理与抗原包被 | 第26页 |
五、 ELISA检测方法 | 第26-27页 |
结果 | 第27-31页 |
一、 聚苯乙烯反应板紫外线幅照效果 | 第27-28页 |
二、 包被液和包被时间的选择 | 第28-29页 |
三、 rhCaM抗原包被浓度的选择 | 第29-30页 |
四、 方法学考核 | 第30页 |
五、 外周血单个核细胞钙调素含量测定 | 第30-31页 |
讨论 | 第31-33页 |
第三部分 人源性噬菌体抗体库筛选钙调素抗体 | 第33-39页 |
材料与方法 | 第33-36页 |
一、 主要实验仪器及试剂 | 第33-34页 |
二、 原始库的扩增 | 第34页 |
三、 筛选流程 | 第34-35页 |
四、 阳性克隆的筛选 | 第35页 |
五、 ELISA检测与鉴定 | 第35页 |
六、 胶体金斑点试验 | 第35-36页 |
七、 钙离子敏感性试验 | 第36页 |
结果 | 第36-37页 |
一、 噬菌体抗体库筛选的富集效果 | 第36页 |
二、 ELISA鉴定结果 | 第36-37页 |
三、 胶体金斑点试验 | 第37页 |
四、 钙离子敏感性试验 | 第37页 |
讨论 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
综述1 钙调素的分子识别研究进展 | 第43-52页 |
综述2 噬菌体抗体库筛选技术 | 第52-60页 |
研究生学习期间学术成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |