中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
1 前言 | 第9-24页 |
2 材料与方法 | 第24-35页 |
·花生再生体系的改良 | 第24-25页 |
·供试品种 | 第24页 |
·外植体材料准备 | 第24页 |
·花生不同外植体的优化培养 | 第24-25页 |
·组培实验条件 | 第25页 |
·花生基因转化材料与方法 | 第25-35页 |
·基因转化材料与试剂 | 第25-26页 |
·质粒载体的分子鉴定和农杆菌菌株的转换 | 第26-29页 |
·花生基因转化研究方法 | 第29-31页 |
·花生抗性植株的分子检测 | 第31-34页 |
·转化植株后代种子的繁殖 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-67页 |
·花生不同再生体系优化结果分析 | 第35-46页 |
·花生丛生芽再生体系的优化分析 | 第35-37页 |
·丛生芽幼茎诱导培养效果 | 第35页 |
·外植体子叶留取体积对幼茎生长的影响 | 第35-37页 |
·花生胚状体再生体系优化分析 | 第37-38页 |
·花生胚小叶再生体系优化效果 | 第38-40页 |
·预培养天数对胚小叶生长的影响 | 第38-39页 |
·不同培养基对芽诱导的影响 | 第39-40页 |
·芽伸长培养基的摸索 | 第40页 |
·花生子叶外植体再生体系优化效果 | 第40-46页 |
·花生不同再生途径的效果分析 | 第46页 |
·农杆菌介导花生的遗传转化 | 第46-64页 |
·植物表达载体的分子鉴定和农杆菌菌株的转换 | 第46-49页 |
·植物表达载体的分子鉴定 | 第46-47页 |
·农杆菌菌株的转换 | 第47-49页 |
·花生Km抗性筛选浓度的确定及不同类型外植体的遗传转化 | 第49-59页 |
·花生芽伸长诱导Km最低抑制浓度的确定 | 第49-50页 |
·花生根系诱导Km抑制浓度的确定 | 第50页 |
·花生不同类型外植体遗传转化结果 | 第50-58页 |
·抗性植株的处理 | 第58-59页 |
·不同外植体基因转化效果比较 | 第59-64页 |
·转化植株的PCR检测 | 第64-65页 |
·花生基因组DNA提取 | 第64页 |
·抗性植株PCR反应体系的优化 | 第64页 |
·利用改良的PCR反应体系对转化植株的检测 | 第64-65页 |
·转化植株的PCR-Southern blot检测 | 第65-67页 |
4 结论与讨论 | 第67-73页 |
·关于花生组织培养再生技术 | 第67-68页 |
·丛生芽外植体再生技术研究 | 第67页 |
·体胚发生再生技术研究 | 第67-68页 |
·胚小叶外植体再生技术研究 | 第68页 |
·关于以农杆菌为介导花生外源基因转化 | 第68-72页 |
·关于不同外植体转化率的探讨 | 第68-70页 |
·丛生芽再生体系的遗传转化问题 | 第68-69页 |
·体胚再生体系的遗传转化问题 | 第69页 |
·胚小叶再生体系的遗传转化问题 | 第69-70页 |
·关于影响基因转化因素的探讨 | 第70-72页 |
·关于农杆菌变异问题 | 第70页 |
·关于共培养时间 | 第70页 |
·关于预培养时间 | 第70-71页 |
·关于工程菌液的处理及外植体侵染时间 | 第71页 |
·关于褐化问题 | 第71-72页 |
·后续工作 | 第72-73页 |
·研究中存在的主要问题 | 第72页 |
·有待于进一步深入研究的内容 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-84页 |
附录Ⅰ: 本研究所用质粒载体构建流程图 | 第84-85页 |
附录Ⅱ: 转化基因cDNA序列 | 第85-87页 |
附录Ⅲ: 部分英汉对照缩写词 | 第87-88页 |
附录Ⅳ: 对照植物烟草基因转化试验 | 第88-91页 |
附录Ⅴ: 学习期间发表论文与参与课题 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |