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农杆菌介导几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因遗传转化花生(Arachis hypogaea L.)的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1 前言第9-24页
2 材料与方法第24-35页
   ·花生再生体系的改良第24-25页
     ·供试品种第24页
     ·外植体材料准备第24页
     ·花生不同外植体的优化培养第24-25页
     ·组培实验条件第25页
   ·花生基因转化材料与方法第25-35页
     ·基因转化材料与试剂第25-26页
     ·质粒载体的分子鉴定和农杆菌菌株的转换第26-29页
     ·花生基因转化研究方法第29-31页
     ·花生抗性植株的分子检测第31-34页
     ·转化植株后代种子的繁殖第34-35页
3 结果与分析第35-67页
   ·花生不同再生体系优化结果分析第35-46页
     ·花生丛生芽再生体系的优化分析第35-37页
       ·丛生芽幼茎诱导培养效果第35页
       ·外植体子叶留取体积对幼茎生长的影响第35-37页
     ·花生胚状体再生体系优化分析第37-38页
     ·花生胚小叶再生体系优化效果第38-40页
       ·预培养天数对胚小叶生长的影响第38-39页
       ·不同培养基对芽诱导的影响第39-40页
       ·芽伸长培养基的摸索第40页
     ·花生子叶外植体再生体系优化效果第40-46页
     ·花生不同再生途径的效果分析第46页
   ·农杆菌介导花生的遗传转化第46-64页
     ·植物表达载体的分子鉴定和农杆菌菌株的转换第46-49页
       ·植物表达载体的分子鉴定第46-47页
       ·农杆菌菌株的转换第47-49页
     ·花生Km抗性筛选浓度的确定及不同类型外植体的遗传转化第49-59页
       ·花生芽伸长诱导Km最低抑制浓度的确定第49-50页
       ·花生根系诱导Km抑制浓度的确定第50页
       ·花生不同类型外植体遗传转化结果第50-58页
       ·抗性植株的处理第58-59页
     ·不同外植体基因转化效果比较第59-64页
   ·转化植株的PCR检测第64-65页
     ·花生基因组DNA提取第64页
     ·抗性植株PCR反应体系的优化第64页
     ·利用改良的PCR反应体系对转化植株的检测第64-65页
   ·转化植株的PCR-Southern blot检测第65-67页
4 结论与讨论第67-73页
   ·关于花生组织培养再生技术第67-68页
     ·丛生芽外植体再生技术研究第67页
     ·体胚发生再生技术研究第67-68页
     ·胚小叶外植体再生技术研究第68页
   ·关于以农杆菌为介导花生外源基因转化第68-72页
     ·关于不同外植体转化率的探讨第68-70页
       ·丛生芽再生体系的遗传转化问题第68-69页
       ·体胚再生体系的遗传转化问题第69页
       ·胚小叶再生体系的遗传转化问题第69-70页
     ·关于影响基因转化因素的探讨第70-72页
       ·关于农杆菌变异问题第70页
       ·关于共培养时间第70页
       ·关于预培养时间第70-71页
       ·关于工程菌液的处理及外植体侵染时间第71页
       ·关于褐化问题第71-72页
   ·后续工作第72-73页
     ·研究中存在的主要问题第72页
     ·有待于进一步深入研究的内容第72-73页
参考文献第73-84页
附录Ⅰ: 本研究所用质粒载体构建流程图第84-85页
附录Ⅱ: 转化基因cDNA序列第85-87页
附录Ⅲ: 部分英汉对照缩写词第87-88页
附录Ⅳ: 对照植物烟草基因转化试验第88-91页
附录Ⅴ: 学习期间发表论文与参与课题第91-92页
致谢第92页

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