| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 文献综述 | 第14-29页 |
| 1 芸薹属植物连锁图谱和基因组研究进展 | 第14-16页 |
| ·花椰菜的分类地位 | 第14-15页 |
| ·构建芸薹属植物分子连锁图谱所使用的群体 | 第15页 |
| ·芸薹属分子连锁遗传图谱的构建 | 第15页 |
| ·芸薹属比较基因组的研究 | 第15-16页 |
| ·三个基本种之间的比较基因组研究 | 第16页 |
| ·基本种与复合种之间的比较基因组研究 | 第16页 |
| ·芸薹属植物与拟南芥的比较基因组研究 | 第16页 |
| 2 植物染色体微分离、微切割与微克隆技术研究进展 | 第16-23页 |
| ·染色体标本的制作与染色体的辨认 | 第17-18页 |
| ·显微切割与分离 | 第18-19页 |
| ·体外扩增和微克隆 | 第19-21页 |
| ·酶切直接克隆法 | 第19-20页 |
| ·用随机引物直接对染色体DNA进行PCR扩增 | 第20页 |
| ·加连接接头的PCR扩增(LA-PCR) | 第20-21页 |
| ·微克隆文库的鉴定 | 第21页 |
| ·染色体显微切割技术的应用 | 第21-23页 |
| ·构建特定染色体或染色体区段DNA文库 | 第21页 |
| ·绘制高密度的分子标记连锁图谱 | 第21-22页 |
| ·基因组物理作图 | 第22页 |
| ·分离重要基因 | 第22页 |
| ·染色体进化和比较基因组研究 | 第22-23页 |
| ·在花椰菜基因组研究中的应用价值 | 第23页 |
| 3 植物抗病基因研究进展 | 第23-29页 |
| ·R基因编码产物的保守区 | 第24-25页 |
| ·R基因的分类 | 第25页 |
| ·R基因数目和分布 | 第25-26页 |
| ·R基因克隆的策略与方法 | 第26-27页 |
| ·RGA与R基因的关系 | 第27-29页 |
| 第一章 RAPD法筛选花椰菜组培植株间多态性 | 第29-35页 |
| 1 材料与方法 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·实验所用RAPD引物 | 第29页 |
| ·花椰菜基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·RAPD的PCR反应 | 第29-30页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和快速银染法读数 | 第30页 |
| ·运用Microsoft excel和DPS软件分析实验结果 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-33页 |
| ·RAPD引物筛选 | 第30-31页 |
| ·遗传相似系数分析 | 第31-32页 |
| ·10种引物138条条带的聚类分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| ·来自不同F_1的花药培养植株具有较大的遗传多态性 | 第33页 |
| ·DNA的提取质量对RAPD的影响 | 第33页 |
| ·RAPD技术检测品种间遗传多态性(遗传距离)的可行性 | 第33-35页 |
| 第二章 花椰菜单染色体的显微分离和体外扩增 | 第35-45页 |
| 1 材料和方法 | 第35-39页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·染色体标本制备 | 第35页 |
| ·材料准备 | 第35页 |
| ·预处理 | 第35页 |
| ·固定和保存 | 第35页 |
| ·酶解和压片 | 第35页 |
| ·染色体的显微分离 | 第35-36页 |
| ·玻璃针的制备 | 第35-36页 |
| ·粘取法分离染色体 | 第36页 |
| ·单染色体的体外扩增 | 第36-39页 |
| ·LA-PCR | 第36-37页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第36页 |
| ·Sau3A酶切 | 第36页 |
| ·接头的制备和接头的连接 | 第36-37页 |
| ·PCR反应 | 第37页 |
| ·DOP-PCR | 第37-38页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第37页 |
| ·DOP-PCR反应 | 第37-38页 |
| ·Southern-Blotting杂交 | 第38-39页 |
| ·基因组DNA的制备 | 第38页 |
| ·DNA斑点印迹膜的手工制备 | 第38页 |
| ·探针制备 | 第38页 |
| ·预杂交 | 第38页 |
| ·杂交 | 第38-39页 |
| ·洗膜及压片 | 第39页 |
| ·显影和定影 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·玻璃针制备效果 | 第39页 |
| ·花椰菜染色体的显微分离和体外扩增结果 | 第39-41页 |
| ·扩增产物的验证 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| ·染色体微分离的关键技术 | 第42-43页 |
| ·单染色体体外扩增的污染问题 | 第43页 |
| ·影响LA-PCR扩增片段大小的因素 | 第43-44页 |
| ·应用Southern-blotting杂交分类花椰菜单染色体的尝试 | 第44-45页 |
| 第三章 花椰菜单染色体R基因同源序列的克隆与分析 | 第45-55页 |
| 1 材料与方法 | 第45-47页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·引物的选用与合成 | 第45页 |
| ·PCR反应 | 第45页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第45页 |
| ·与载体的连接反应 | 第45-46页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·连接产物的转化 | 第46-47页 |
| ·重组克隆的筛选和克隆片段的扩增 | 第47页 |
| ·克隆片段的酶切归类复筛 | 第47页 |
| ·测序与序列分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·基因组DNA中RGA的扩增与分离 | 第47-48页 |
| ·单染色体扩增产物RGA的扩增与分离 | 第48页 |
| ·花椰菜RGA克隆的获得和酶切归类复筛及测序 | 第48-49页 |
| ·RGA序列的分析 | 第49-52页 |
| ·RGA序列的blast分析 | 第49页 |
| ·RGA序列与已知R基因的比较分析 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| ·花椰菜抗病基因分子生物学研究的新的技术平台 | 第52-53页 |
| ·特定染色体RFLP探针的寻求新思路 | 第53页 |
| ·植物R基因研究的新途径 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录1 | 第62-66页 |
| 附录2 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
