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供体细胞处理方式对山羊核移植胚胎早期发育的影响

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-5页
致谢第5-12页
综述部分第12-51页
 第一章 细胞培养研究进展第12-22页
  1 细胞培养基本概念第12-13页
   ·基本概念第12页
   ·细胞培养研究的目的第12页
   ·细胞培养方法第12-13页
  2 细胞培养研究简史第13-14页
  3 细胞周期及其调控第14-18页
   ·细胞周期的概念第14-16页
   ·细胞周期调控第16-18页
  4 细胞周期同步化第18-19页
  参考文献第19-22页
 第二章 哺乳动物体细胞核移植的研究进展第22-41页
  1 体细胞核移植的基本原理第22-27页
   ·影响重构胚发育的因素第22-26页
     ·MPF的作用第24页
     ·DNA的复制第24-25页
     ·细胞骨架第25-26页
   ·协调受体胞质与供体核细胞周期时相的方案第26-27页
     ·“万能受体”方案第26页
     ·根据供体细胞周期确定卵母细胞激活法第26页
     ·Honululu方法第26-27页
  2 核移植的方法与步骤第27-31页
   ·核移植供体细胞的来源和准备第27页
   ·核移植受体来源第27-28页
   ·受体细胞去核的方法第28-29页
   ·核移植的方法第29-30页
   ·重构胚的激活第30-31页
     ·化学激活第30-31页
     ·电激活第31页
   ·重构胚的体外培养第31页
  3 克隆山羊研究进展第31-32页
  4 我国哺乳动物细胞核移植研究的历史概况第32页
  5 克隆动物存在的问题第32-34页
  参考文献第34-41页
 第三章 哺乳动物体细胞核移植中供体细胞的研究进展第41-51页
  1 体细胞核移植的供体细胞的细胞类型第41-42页
   ·胎儿成纤维细胞第41-42页
   ·成年动物体细胞第42页
  2 供体细胞的年龄和细胞周期时相对核移植胚发育的影响第42-44页
  3 核移植技术存在的问题第44-45页
  参考文献第45-51页
实验部分第51-88页
 第一章 布尔山羊胎儿成纤维细胞体外培养第51-59页
  1 材料与方法第51-53页
   ·主要试剂及仪器第51-52页
   ·胎儿组织的采集和处理第52页
   ·胎儿成纤维细胞初代培养法第52页
   ·胎儿成纤维细胞的继代培养第52-53页
   ·胎儿成纤维细胞的冷冻及解冻培养第53页
   ·数据处理第53页
  2 结果与分析第53-56页
   ·胎儿成纤维细胞体外培养生长特点第53-54页
   ·组织块原代细胞培养液的筛选第54页
   ·原代细胞消化酶的筛选第54页
   ·细胞生长曲线第54-55页
   ·细胞对数生长期末群体倍增值第55-56页
   ·成纤维细胞解冻后的贴壁结果第56页
  3 讨论第56-57页
  4 结论第57页
  参考文献第57-59页
 第二章 山羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活的研究第59-72页
  1 材料和方法第60-62页
   ·主要试剂及设备第60-61页
   ·卵母细胞采集第61页
   ·培养方案第61-62页
   ·卵母细胞孤雌激活胚胎体外培养第62页
   ·数据分析第62页
  2 结果第62-64页
   ·血清对山羊卵母细胞体外成熟的影响第62页
   ·激素对山羊卵母细胞体外成熟的影响第62-63页
   ·EGF山羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活胚胎发育的影响第63页
   ·水的质量对卵母细胞体外成熟的影响第63-64页
   ·不同孤雌激活方法对山羊孤雌胚胎体外发育的影响第64页
  3 讨论第64-67页
  4 结论第67页
  参考文献第67-72页
 第三章 供体细胞的处理方式对核移植胚胎早期发育的影响第72-88页
  1 材料和方法第74-76页
   ·主要试剂和仪器第74页
   ·屠宰山羊卵巢的采集第74页
   ·屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集第74页
   ·卵丘卵母细胞复合体的体外成熟第74-75页
   ·成熟卵母细胞的去核第75页
   ·供体细胞的准备第75-76页
   ·核移植第76页
   ·克隆胚胎的激活第76页
   ·克隆胚胎的体外培养第76页
   ·数据分析第76页
  2 结果第76-80页
   ·供体细胞G0/G1期同期化效率第76-77页
   ·两种去核法的去核效率比较第77-78页
   ·胞质内注射法构建核移植胚的效率第78-79页
   ·供体细胞处理方式对核移植胚发育的影响第79-80页
  3 讨论第80-83页
  4 结论第83页
  参考文献第83-88页
个人简介第88页

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