中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-5页 |
致谢 | 第5-12页 |
综述部分 | 第12-51页 |
第一章 细胞培养研究进展 | 第12-22页 |
1 细胞培养基本概念 | 第12-13页 |
·基本概念 | 第12页 |
·细胞培养研究的目的 | 第12页 |
·细胞培养方法 | 第12-13页 |
2 细胞培养研究简史 | 第13-14页 |
3 细胞周期及其调控 | 第14-18页 |
·细胞周期的概念 | 第14-16页 |
·细胞周期调控 | 第16-18页 |
4 细胞周期同步化 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-22页 |
第二章 哺乳动物体细胞核移植的研究进展 | 第22-41页 |
1 体细胞核移植的基本原理 | 第22-27页 |
·影响重构胚发育的因素 | 第22-26页 |
·MPF的作用 | 第24页 |
·DNA的复制 | 第24-25页 |
·细胞骨架 | 第25-26页 |
·协调受体胞质与供体核细胞周期时相的方案 | 第26-27页 |
·“万能受体”方案 | 第26页 |
·根据供体细胞周期确定卵母细胞激活法 | 第26页 |
·Honululu方法 | 第26-27页 |
2 核移植的方法与步骤 | 第27-31页 |
·核移植供体细胞的来源和准备 | 第27页 |
·核移植受体来源 | 第27-28页 |
·受体细胞去核的方法 | 第28-29页 |
·核移植的方法 | 第29-30页 |
·重构胚的激活 | 第30-31页 |
·化学激活 | 第30-31页 |
·电激活 | 第31页 |
·重构胚的体外培养 | 第31页 |
3 克隆山羊研究进展 | 第31-32页 |
4 我国哺乳动物细胞核移植研究的历史概况 | 第32页 |
5 克隆动物存在的问题 | 第32-34页 |
参考文献 | 第34-41页 |
第三章 哺乳动物体细胞核移植中供体细胞的研究进展 | 第41-51页 |
1 体细胞核移植的供体细胞的细胞类型 | 第41-42页 |
·胎儿成纤维细胞 | 第41-42页 |
·成年动物体细胞 | 第42页 |
2 供体细胞的年龄和细胞周期时相对核移植胚发育的影响 | 第42-44页 |
3 核移植技术存在的问题 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
实验部分 | 第51-88页 |
第一章 布尔山羊胎儿成纤维细胞体外培养 | 第51-59页 |
1 材料与方法 | 第51-53页 |
·主要试剂及仪器 | 第51-52页 |
·胎儿组织的采集和处理 | 第52页 |
·胎儿成纤维细胞初代培养法 | 第52页 |
·胎儿成纤维细胞的继代培养 | 第52-53页 |
·胎儿成纤维细胞的冷冻及解冻培养 | 第53页 |
·数据处理 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-56页 |
·胎儿成纤维细胞体外培养生长特点 | 第53-54页 |
·组织块原代细胞培养液的筛选 | 第54页 |
·原代细胞消化酶的筛选 | 第54页 |
·细胞生长曲线 | 第54-55页 |
·细胞对数生长期末群体倍增值 | 第55-56页 |
·成纤维细胞解冻后的贴壁结果 | 第56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
4 结论 | 第57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
第二章 山羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活的研究 | 第59-72页 |
1 材料和方法 | 第60-62页 |
·主要试剂及设备 | 第60-61页 |
·卵母细胞采集 | 第61页 |
·培养方案 | 第61-62页 |
·卵母细胞孤雌激活胚胎体外培养 | 第62页 |
·数据分析 | 第62页 |
2 结果 | 第62-64页 |
·血清对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第62页 |
·激素对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第62-63页 |
·EGF山羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活胚胎发育的影响 | 第63页 |
·水的质量对卵母细胞体外成熟的影响 | 第63-64页 |
·不同孤雌激活方法对山羊孤雌胚胎体外发育的影响 | 第64页 |
3 讨论 | 第64-67页 |
4 结论 | 第67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
第三章 供体细胞的处理方式对核移植胚胎早期发育的影响 | 第72-88页 |
1 材料和方法 | 第74-76页 |
·主要试剂和仪器 | 第74页 |
·屠宰山羊卵巢的采集 | 第74页 |
·屠宰山羊卵巢卵母细胞的采集 | 第74页 |
·卵丘卵母细胞复合体的体外成熟 | 第74-75页 |
·成熟卵母细胞的去核 | 第75页 |
·供体细胞的准备 | 第75-76页 |
·核移植 | 第76页 |
·克隆胚胎的激活 | 第76页 |
·克隆胚胎的体外培养 | 第76页 |
·数据分析 | 第76页 |
2 结果 | 第76-80页 |
·供体细胞G0/G1期同期化效率 | 第76-77页 |
·两种去核法的去核效率比较 | 第77-78页 |
·胞质内注射法构建核移植胚的效率 | 第78-79页 |
·供体细胞处理方式对核移植胚发育的影响 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-83页 |
4 结论 | 第83页 |
参考文献 | 第83-88页 |
个人简介 | 第88页 |