| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 ：瓦式黄颡鱼胰蛋白酶和α-淀粉酶研究概况 | 第10-20页 |
| 1 胰蛋白酶 | 第10-15页 |
| ·胰蛋白酶的概念 | 第10页 |
| ·胰蛋白酶的合成途径和催化机理 | 第10-12页 |
| ·胰蛋白酶的合成途径 | 第10-11页 |
| ·胰蛋白酶的催化机理 | 第11-12页 |
| ·胰蛋白酶的基因研究 | 第12-14页 |
| ·无脊椎类 | 第12页 |
| ·昆虫类 | 第12页 |
| ·甲壳类 | 第12页 |
| ·两栖类 | 第12页 |
| ·鸟类 | 第12页 |
| ·哺乳类 | 第12-13页 |
| ·鱼类 | 第13-14页 |
| ·鱼类基因的序列研究 | 第13页 |
| ·鱼类基因的同源性 | 第13页 |
| ·胰蛋白酶分布表达 | 第13-14页 |
| ·鱼类胰蛋白酶的理化性质 | 第14页 |
| ·胰蛋白酶的应用 | 第14-15页 |
| 2 淀粉酶 | 第15-19页 |
| ·α-淀粉酶的概念 | 第15页 |
| ·α-淀粉酶的合成途径和催化机理 | 第15-16页 |
| ·α-淀粉酶的的结构 | 第15-16页 |
| ·α-淀粉酶的催化机理 | 第16页 |
| ·淀粉酶的基因研究 | 第16-18页 |
| ·甲壳类动物 | 第16-17页 |
| ·哺乳类 | 第17页 |
| ·鱼类 | 第17-18页 |
| ·淀粉酶的应用 | 第18-19页 |
| 3 本实验的实验设计 | 第19页 |
| 4 本实验的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 瓦式黄颡鱼胰蛋白酶、α-淀粉酶序列克隆 | 第20-28页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·主要生化试剂 | 第20页 |
| ·常用溶液的配制 | 第20-21页 |
| ·基因的扩增及克隆所用试剂 | 第20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳缓冲液 | 第20页 |
| ·质粒和菌株 | 第20-21页 |
| ·用碱裂解法提取质粒 DNA 的裂解液 | 第21页 |
| ·亚克隆相关试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·基因组生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·瓦式黄颡鱼胰蛋白酶、α-淀粉酶克隆 | 第22-25页 |
| ·瓦式黄颡鱼总 RNA 的提取 | 第22页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第22-23页 |
| ·中间片段的获得 | 第23页 |
| ·PCR 产物回收与纯化 | 第23页 |
| ·T 载体连接 | 第23-24页 |
| ·转化感受态细胞 | 第24页 |
| ·筛选和鉴定重组质粒 | 第24页 |
| ·重组质粒的提取 | 第24页 |
| ·重组质粒转化感受态细胞 | 第24页 |
| ·重组质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·测序 | 第25页 |
| ·3’末端和 5’末端序列的获得 | 第25-27页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第26页 |
| ·LD-PCR(long-distance PCR) | 第26页 |
| ·3’末端序列的获得 | 第26-27页 |
| ·5’末端序列的获得 | 第27页 |
| ·全长 cDNA 的扩增 | 第27页 |
| ·瓦式黄颡鱼各组织分布 | 第27页 |
| ·进化树的构建 | 第27-28页 |
| 第3章 瓦式黄颡鱼胰蛋白酶、α-淀粉酶的结果 | 第28-44页 |
| ·瓦式黄颡鱼的克隆结果 | 第28-31页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第28页 |
| ·胰蛋白酶、α-淀粉酶中间片段、5’和 3’末端扩增克隆结果 | 第28页 |
| ·胰蛋白酶和α-淀粉酶 cDNA 和氨基酸的全序列 | 第28-31页 |
| ·胰蛋白酶 cDNA 和氨基酸的全序列 | 第28-29页 |
| ·α-淀粉酶 cDNA 和氨基酸的全序列 | 第29-31页 |
| ·同源性比较与系统进化树的构建 | 第31-40页 |
| ·瓦式黄颡鱼胰蛋白酶氨基酸同源性对比的情况 | 第31-34页 |
| ·瓦式黄颡鱼α-淀粉酶氨基酸同源性的比较 | 第34-40页 |
| ·淀粉酶和胰蛋白酶的组织分布结果 | 第40页 |
| ·胰蛋白酶在瓦式黄颡鱼各组织中的表达 | 第40页 |
| ·淀粉酶在瓦式黄颡鱼各组织中的表达 | 第40页 |
| ·瓦式黄颡鱼胰蛋白酶和α-淀粉酶基因蛋白推导和结构预测 | 第40-44页 |
| ·瓦式黄颡鱼胰蛋白酶基因的蛋白基本参数推导 | 第40页 |
| ·瓦式黄颡鱼胰蛋白酶基因蛋白二级空间结构的预测 | 第40-41页 |
| ·瓦式黄颡鱼α-淀粉酶基因的蛋白基本参数推导 | 第41-42页 |
| ·瓦式黄颡鱼α-淀粉酶基因蛋白二级空间结构的预测 | 第42-44页 |
| 第4章 瓦式黄颡鱼胰蛋白酶、α-淀粉酶的讨论 | 第44-47页 |
| ·瓦式黄颡鱼胰蛋白酶的讨论 | 第44-45页 |
| ·胰蛋白酶激活肽 | 第44页 |
| ·胰蛋白酶基因的二硫键 | 第44-45页 |
| ·瓦式黄颡鱼 mRNA 组织分布表达 | 第45页 |
| ·瓦式黄颡鱼α-淀粉酶的讨论 | 第45-47页 |
| 第5章 瓦式黄颡鱼胰蛋白酶、α-淀粉酶的结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第55-57页 |
